二陳湯加味方對COPD穩定期患者血清中MMP-9、TIMP-1活性及其比值的影響

王肖艷 王俊月 宋倩紅 牛賀 謝文英 包永生

(河南中醫藥大學，河南 鄭州 450046)

慢性阻塞性肺疾病(COPD)常由慢性炎癥引發，并隨老齡化及環境污染而加重，發病率逐年持續增長，有極高的死亡率和致殘率〔1～4〕。因此發現并證實治療COPD急性發作期(AECOPD)的有效藥物，成為時下的當務之急。根據本課題組前期研究顯示〔5～11〕，二陳湯加味方可以通過對多種信號通路的干預，達到緩解大鼠氣道重塑，控制炎癥，改善免疫功能的作用。研究發現，激活基質金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMP)-1可以有效抑制基質金屬蛋白酶(MMP)-9的活性，并抑制細胞外基質(ECM)的降解，達到控制炎癥，阻止氣道重塑的目的〔12〕。白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α同樣在COPD炎癥反應和氣道重塑的進程中發揮重要作用，因此本實驗分析治療前后血清中MMP-9、TIMP-1、TNF-α、IL-6的含量，以探索二陳湯加味方對COPD患者的干預途徑。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取河南省中醫院、河南中醫藥大學第三附屬醫院、新華中醫院呼吸科于2016年3月至2018年3月收治的COPD穩定期患者160例，隨機分為兩組，各80例。治療組男42例，女38例，年齡57～69歲，平均(61.88±3.2)歲，平均病程(16.11±4.47)個月。對照組男39例，女41例，年齡58～68歲，平均(61.83±1.95)歲，平均病程(18.08±4.13)個月。兩組性別、年齡及病程、肺功能等，經Ridit檢驗，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組一般情況對比(n=80,n)

1.2診斷標準 參照《實用中醫內科學》〔13〕、《中藥新藥臨床研究指導原則》〔14〕進行中醫辨證，分別診斷“喘證”和“痰濕阻肺證”，參照中華醫學會呼吸病學分會《慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)》〔15〕，診斷符合COPD穩定期的西醫標準。

1.3納入標準 (1)符合COPD 穩定器診斷標準，刻下均有輕微的咳嗽、咯痰、悶喘等癥狀，且均持續2 w以上；(2)年齡≤70歲；(3)患者在1個月內均未使用免疫抑制劑或免疫增強劑，半月內未使用氨茶堿或糖皮質激素等。

1.4排除標準 (1)合并支氣管擴張、支氣管哮喘、活動性肺結核；(2)合并有胸腔積液、氣胸、肺栓塞；(3)并發肝、腎功能嚴重損害及嚴重心功能不全者；(4)排除其他部位炎癥、結締組織病、糖尿病、腫瘤等慢性消耗性疾??；(5)依從性差、神志不清、癡呆或者各種精神疾病患者；

1.5治療 對照組給予安慰劑(5%藥物成分、苦味劑、食用色素、糊精等)和西醫常規治療，即擴張支氣管、抗感染、祛痰，并根據監測的病情配合氧療，維持機體水和電解質的平衡、給予營養支持。治療組同樣進行常規治療，并在此基礎上，使用二陳湯加味方配合治療，方藥組成如下：半夏10 g(批號 1501001S)，茯苓20 g(批號1509006W)，陳皮10 g(批號 1509002S)，炙麻黃6 g(批號 1509001S)，杏仁10 g(批號 1512002S)，炒蘇子20 g(批號1512001S)，枳殼10 g(批號1510002W)，白術15 g(批號 1510004 S)，黨參25 g(批號 1511003W)等，以上藥物為中藥顆粒，由華潤三九公司提供。對照組安慰劑與治療組二陳湯加味方均2次/d。整個療程持續60 d，療程結束后對療效進行評價。

1.6療效評價 參照診斷及辨證標準進行臨床療效評價〔16，17〕，綜合肺功能指標、6 min步行距離、呼吸困難分級及體重指數(BMI)進行評價。將治療效果分為臨床控制、顯效、有效與無效4個等級。其中前三項即有效、顯效和臨床控制合稱有效，并計算總有效率。療效評價標準：顯效(治療后患者咳嗽、咯痰、悶喘等癥狀均明顯減輕)，有效(治療后患者咳嗽、咯痰、悶喘等癥狀有所減輕)，無效(治療后患者咳嗽、咯痰、悶喘等癥狀無減輕或加重)?？傆行视嬎惴椒?臨床控制例數+顯效病例數+有效病例數)/總病例數×100%。

1.7肺功能測定 采用德國Jaeger公司生產的MasterScreen PFT肺功能儀來測定患者治療前后肺功能的變化，測量的數據有用力肺活量(FVC)、第1秒最大呼氣量(FEV1)、FEV1%與FEV1/FVC。

1.8實驗室檢測指標 于治療前和治療后在清晨空腹狀態下，抽取靜脈血5 ml，用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測MMP-9、IL-6、TNF-α、TIMP-1水平，操作嚴格按照試劑盒的說明書。

1.9統計學處理 采用SPSS21.0軟件進行方差分析和Spearman等級相關分析。

2 結 果

2.1兩組總有效率的比較 治療組總有效率顯著高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組總有效率比較〔n=80,n(%)〕

2.2治療前后肺功能比較 治療后治療組FEV1、FVC、FEV1/FVC均顯著增大(P<0.05)。治療組與對照組治療后對比，FEV1、FVC、FEV1均顯著增大(P<0.01)。見表3。

表3 兩組治療前后肺功能比較

2.3兩組血清MMP-9、TIMP-1含量比較 治療后兩組與本組治療前相比，血清中MMP-9均顯著降低(P<0.05)，TIMP-1均顯著升高(P<0.05)，MMP-9/TIMP-1均顯著降低(P<0.05)。治療后與對照組比較，治療組 MMP-9均顯著降低(P<0.05)，TIMP-1均顯著升高，MMP-9/TIMP-1均顯著降低(P<0.05)。見表4。

表4 兩組治療前后MMP-9、TIMP-1含量及兩者比值的比較

2.4兩組血清IL-6、TNF-α含量的比較 治療后兩組與本組治療前相比IL-6、TNF-α均顯著降低(P<0.05)；治療后與對照組相比，治療組IL-6、TNF-α均顯著降低(P<0.05)。見表5。

表5 兩組治療前后IL-6、TNF-α含量的比較

2.5不良反應 在使用二陳湯加味方的過程中，未發現明顯不良反應，主要的不適有便次增多，便質變稀及頭暈，停藥后不適感消失。

3 討 論

COPD的特征為不可逆的氣流受限，屬非特異性的肺部炎癥〔1〕。研究顯示〔18〕，西醫的常規治療方法效果不顯著。中醫認為，COPD屬于肺脹等范疇，多因吸煙導致，吸煙會煉津為痰，并阻礙氣機運行，因此化痰理氣是治療COPD的重中之重，二陳湯加味方以二陳湯中的半夏、陳皮、茯苓來化痰理氣。COPD常兼有氣喘這種肺氣宣肅失常的情況，因此加用蘇子、杏仁、炙麻黃等來宣肅肺氣，并且以降為先。COPD屬于慢性疾病，長期的痰氣交阻會導致正氣消耗而呈現出脾肺氣虛之象，黨參、白術的使用便是基于此種原因，冀以恢復長期疾病過程中損耗的正氣〔19〕。用二陳湯化痰理氣以治本，用加味降氣補氣以治標，因此才能達到“覆杯而愈”的效果，前期的臨床實驗也證實了這一點〔6，20〕。

吸煙等有害氣體或PM2.5等顆粒會對氣道產生刺激，致使氣道之中的炎癥細胞發生浸潤，并釋放各種細胞因子、炎癥介質，并在氣道壁上發揮作用。細胞因子和炎癥介質能夠通過多條代謝通路誘發氣道組織損傷，同時引起氣道組織發生異常修復，反復損傷和修復的過程是COPD患者氣道重塑的主要原因〔21〕。COPD發生氣道重塑的過程中ECM發揮重要作用，研究顯示，ECM的合成與降解的失衡，是引發COPD發生氣道重塑的主要誘因〔22，23〕。而本次研究的重點，即MMP-9和TIMP-1皆屬于調節ECM合成與降解主要成分〔24〕。作為MMP-9的內源抑制劑，TIMP-1會與激活狀態下的MMP-9結合，并以此抑制其活性，達到抑制ECM降解的目的，達到成功阻止COPD患者氣道重塑的目的〔25〕。綜上，MMP-9的興奮與TIMP-1的抑制及MMP-9/TIMP-1比值的升高都是COPD氣道重塑發生的重要機制〔26，27〕。

IL-6、TNFα同為促進COPD炎癥反應和氣道重塑的炎癥因子，在COPD的發生、發展中起重要作用。據研究，Toll樣受體(TLRs)為一種天然免疫受體，其中的TLR-4主要分布在氣道上皮細胞、肺血管內皮細胞、平滑肌細胞〔28〕，TLR-4會和自身的配體結合，經信號傳導及轉錄激活等活化反應，來促進TNF-α與IL-6的大量釋放〔29〕，以介導肺的氣管和血管重塑及血管炎癥反應的進程〔30〕，因此，無論是炎癥反應，還是肺的氣、血管重塑，TNF-α與IL-6都發揮著巨大作用。本實驗提示二陳湯加味方是通過抑制MMP-9、TNF-α、IL-6，興奮TIMP-1來達到恢復肺功能的作用。

二陳湯加味方對COPD穩定期患者有顯著的治療作用，治療機制可能與抑制炎癥反應、阻止氣道重塑有關，具體機制為對MMP-9、TNF-α、IL-6的抑制作用和對TIMP的促進作用及對MMP-9/TIMP-1比值的下調，得以阻止氣道重塑、抑制炎癥反應、改善肺功能。