王東輝,曹麗萍,湯彤國
(1.張掖市甘州區畜牧獸醫工作站,甘肅 張掖 734000;2.甘肅省動物疫病預防控制中心,甘肅 蘭州 730046;3.張掖市甘州區黨寨鎮畜牧獸醫站,甘肅 張掖 734000)
2019年9月30日-10月22日,選擇張掖市甘州區農區某鄉鎮1戶舍飼養羊戶飼養的1群綿羊,除去種公羊和出生3月齡以內的羔羊,將剩余的53只母羊作為試驗羊只;試驗所用3種疫苗均為農業農村部批準的正規企業生產,其中:小反芻獸疫-山羊痘二聯活疫苗(Clone9株+AV41株)批號c0919013,山羊痘活疫苗批號19115009,小反芻獸疫疫苗批號2018023-1;試驗所用羊痘間接ELISA抗體檢測試劑盒由中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產,批號為20190919119,小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒由青島立見診斷技術發展中心生產,批號020171907;試驗所用酶標儀為深圳雷杜公司生產,型號RT6100。
將試驗羊只隨機分為4組。試驗1組(小反芻獸疫-山羊痘二聯活疫苗免疫組),分配試驗羊20只;對照1組(山羊痘活疫苗免疫組),分配試驗羊15只;對照2組(小反芻獸疫疫苗免疫組),分配試驗羊15只;試驗2組(山羊痘活疫苗與小反芻獸疫疫苗同時分點免疫組),剩余的試驗羊3只,用油漆對各組試驗羊做了明顯的區分標記,對各組分別按照各種疫苗說明書規定劑量和部位進行免疫注射。

表1 小反芻獸疫-山羊痘二聯苗免疫效果實驗室檢測數據統計
按照試驗指標設置了試驗期羊只采食、精神狀態及發病死亡等不良反應記錄表,由畜主每天記錄,以取得安全性評價數據;免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d分別對各組羊只采血,分離出羊血清后統一編號集中保存,用于實驗室抗體檢測,以取得免疫性評價數據。
第8 d、第15 d試驗1組羊痘和小反芻獸疫抗體轉陽羊只增加數量與對照1、對照2組增加數量的差異顯著性采用生物統計均數差異性T檢驗方法進行檢驗。
根據畜主記錄,在整個試驗期,試驗羊群均未表現出食欲減退、免疫過敏、流產和死亡等不良反應。
在實驗室對免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d各組羊只采集的血清,應用酶標儀按照羊痘間接ELISA抗體檢測試劑盒和小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒檢測方法進行免疫抗體效價檢測,并對第8 d、第15 d試驗1組羊痘和小反芻獸疫抗體轉陽羊只增加量與對照1、對照2組增加量的顯著性采用生物統計均數差異性T檢驗,結果見表1。
在試驗過程中,試驗羊群未出現過敏、流產和死亡,也沒有其他不良反應,表明該二聯苗具有較好的安全性。
從實驗室抗體檢測結果看,該二聯苗在注射后第8 d產生免疫抗體,其中:羊痘抗體轉陽個體增加數與對照1組相比無顯著差異,小反芻獸疫抗體轉陽個體增加數與對照2組相比差異極顯著;第15 d抗體水平達到高峰,二聯苗與單苗比較羊痘抗體轉陽個體增加數與對照1組相比差異顯著,小反芻獸疫抗體轉陽個體增加數與對照2組相比差異極顯著,說明該二聯苗在抗體產生速度上優于對照組,具有較好的免疫效果。
鑒于試驗條件所限,沒有做攻毒和抗體消減實驗,缺乏對該二聯疫苗保護性及免疫抗體維持時間等實驗數據,有待進一步驗證。
試驗2組系附帶試驗兩種疫苗同時免疫之效果,與本試驗關系不大,可忽略。
本試驗表明,該小反芻獸疫-山羊痘二聯活疫苗用于綿羊小反芻獸疫和羊痘兩種疫病的預防免疫,具有較好的安全性和較強的免疫效果,僅從免疫安全性、免疫后抗體產生快慢和抗體水平以及疫苗和人工成本等經濟性綜合考慮,該二聯苗對小反芻獸疫疫苗和山羊痘疫苗具有一定的可替代性。