冠心病合并慢性心力衰竭病人血清鳶尾素、微小RNA-133與心功能指標的相關性

周明敏，方子美

冠心病(CHD)是一種冠狀動脈慢性炎癥性疾病，由糖脂代謝紊亂和血管內皮損傷引起[1]。慢性心力衰竭(CHF)是心臟結構重構和功能減退的慢性病變過程，是多種心血管疾病的終末期表現[2]。鳶尾素(irisin)是由肌肉細胞分泌的一種肽類激素，可促進白色脂肪向棕色脂肪轉變，參與能量代謝和糖脂代謝[3]。微小RNA-133(miR-133)包括miR-133a、miR-133b，主要表達于心肌和骨骼肌，與心臟細胞凋亡、心肌重構等有關[4]。本研究探討血清鳶尾素、miR-133與CHD合并CHF病人心功能指標的相關性?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年5月—2018年5月我院心內科收治的CHD合并CHF病人109例作為研究對象，均經冠狀動脈造影、心電圖及心肌酶學檢查確診。納入標準：符合世界衛生組織(WHO)關于缺血性心臟病的命名和診斷標準[5]；符合2007年《慢性心力衰竭診斷治療指南》[6]。排除標準：瓣膜性心臟病、嚴重肝腎等臟器功能障礙、糖尿病、感染性疾病、惡性腫瘤、免疫系統疾病。入選的109例病人作為CHD+CHF組，男58例，女51例；年齡45～79(61.28±8.45)歲；根據美國心臟病協會(NYHA)心功能分級：Ⅱ級36例，Ⅲ級41例，Ⅳ級32例；體質指數(24.57±8.11)kg/m2。選取同期我院收治的CHD穩定型心絞痛心功能代償病人50例作為CHD組，男27例，女23例；年齡47～77(59.01±9.64)歲；體質指數(25.03±8.55)kg/m2。選取同期到我院進行健康體檢的正常人群50名作為對照組，男28名，女22名；年齡46～78(59.86±9.78)歲；體質指數(24.98±8.64)kg/m2。3組一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 檢測指標及方法

1.2.1 血清鳶尾素水平檢測 于清晨抽取所有研究對象4 mL空腹靜脈血，以3 000 r/min離心10 min，獲得血清。鳶尾素采用酶聯免疫吸附法檢測，試劑盒來自上海臻科生物科技有限公司。

1.2.2 血清miR-133水平檢測 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)檢測。采用總RNA提取試劑盒(TRIzol法)提取總RNA，試劑盒來自BioTNT，樣品純度合格樣品標準：A260/A280≥1.8～2.0。逆轉錄試劑盒及實時熒光定量PCR試劑盒購自寶生物公司。本研究所需miR-133a、miR-133b、內參U6的上游、下游引物均購自上海生工公司。PCR反應條件：92 ℃ 60 s，92 ℃ 60 s，56 ℃ 60 s，74 ℃ 60 s，設置為36個循環。采用2-△△Ct法來計算miR-133a、miR-133b相對表達量。重復3次，取平均值。

1.2.3 心功能指標 采用荷蘭Philips Ie33超聲檢測儀檢查心功能指標左室射血分數(LVEF)、左室舒張末期內徑(LVEDD)。

2 結 果

2.1 3組血清鳶尾素、miR-133表達水平比較 CHD+CHF組和CHD組血清鳶尾素明顯低于對照組(P<0.05)，miR-133a、miR-133b表達量明顯高于對照組(P<0.05)；CHD+CHF組血清鳶尾素明顯低于CHD組(P<0.05)，miR-133a、miR-133b表達量明顯高于CHD組(P<0.05)。詳見表1。

表1 3組血清鳶尾素、miR-133水平比較(±s)

2.2 CHD+CHF組不同心功能分級病人血清鳶尾素、miR-133表達水平比較 隨著心功能分級的提高，CHD+CHF組血清鳶尾素逐漸降低，miR-133a、miR-133b表達量逐漸升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 CHD+CHF組不同心功能分級病人血清鳶尾素、miR-133水平比較(±s)

2.3 3組心功能指標比較 CHD+CHF組和CHD組LVEF明顯低于對照組，LVEDD明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；CHD+CHF組LVEF明顯低于CHD組，LVEDD明顯高于CHD組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 3組心功能指標比較(±s)

2.4 CHD+CHF組不同心功能分級病人心功能指標比較 隨著心功能分級的提高，LVEF逐漸降低(P<0.05)，LVEDD逐漸升高(P<0.05)。詳見表4。

表4 CHD+CHF組不同心功能分級病人心功能指標比較(±s)

P<0.05。

2.5 CHD+CHF組病人鳶尾素、miR-133與心功能指標的相關性分析 Pearson相關性分析顯示，鳶尾素與LVEF呈正相關(r=0.601，P<0.01)，與LVEDD呈負相關(r=-0.562，P<0.01)；miR-133a、miR-133b與LVEF呈負相關(r=-0.481，P<0.01；r=-0.456，P<0.01)，與LVEDD呈正相關(r=0.437，P<0.01；r=0.422，P<0.01)。詳見表5。

表5 CHD+CHF組鳶尾素、miR-133與心功能指標的相關性分析

3 討 論

CHD是一種嚴重威脅人類健康和生命安全的心血管疾病，老年人群CHD合并CHF的發病率不斷提高，其發病機制與糖尿病、血脂異常、高血壓、炎癥反應等均有關[7]。CHF是各種心臟病導致心功能不全的終末期階段，主要表現為心臟功能與結構的改變。

作為一種肌肉因子，鳶尾素是Ⅲ型纖連蛋白結構域包含蛋白5在蛋白酶水解下分解后，進入血液循環形成的多肽[8]。有動物實驗表明，鳶尾素可誘導白色脂肪向棕色脂肪轉變，提高能量代謝，減輕小鼠體重，有利于緩解糖耐量異常和胰島素抵抗[9]。莫顯剛等[10]研究表明，心力衰竭病人循環鳶尾素水平降低，血清鳶尾素濃度與肌酐、穩態胰島素評估模型胰島素抵抗、LVEDD及NYHA心功能分級呈負相關，與LVEF、三酰甘油及高密度脂蛋白膽固醇呈正相關，可能參與心力衰竭的糖脂代謝紊亂。

miRNA是一類單鏈非編碼小分子 RNA，在人體內的表達和分布具有高度的組織或細胞特異性，其中miR-133就可特異性表達于心臟的心肌細胞，在心肌細胞凋亡、心肌發育、心肌纖維化等調控過程中起重要作用[11]。徐振宇等[12]研究表明，CHF病人血清miR-133a、miR-133b表達量隨心功能分級提高而升高，且與左房內徑(LAP)、左心室右壁厚度(LVPW)、左室質量指數(LVMI)均呈正相關。張雪蓮等[13]研究表明，miR-133a和miR-133b在CHF病人血清中表達量升高，與心肌重構和心臟功能密切相關。Carè等[14]研究發現，通過抑制體內miR-133a表達可引發心肌肥厚，而在體外過表達miR-133a則可阻止心肌肥厚的發生。因此，miR-133與心臟功能有密切關系。

本研究結果表明，CHD+CHF組和CHD組血清鳶尾素明顯低于對照組，miR-133a、miR-133b表達量明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；CHD+CHF組血清鳶尾素明顯低于CHD組，miR-133a、miR-133b表達量明顯高于CHD組，差異均有統計學意義(P<0.05)。說明鳶尾素、miR-133a、miR-133b與CHD病人密切相關，同時還可能參與CHF過程。隨著心功能分級的提高，CHD+CHF組血清鳶尾素逐漸降低(P<0.05)，miR-133a、miR-133b表達量逐漸提高(P<0.05)。提示鳶尾素、miR-133a、miR-133b與心功能分級明顯相關。Pearson相關性分析顯示，鳶尾素與LVEF呈正相關，與LVEDD呈負相關；miR-133a、miR-133b與LVEF呈負相關，與LVEDD呈正相關。提示鳶尾素、miR-133a、miR-133b與CHD+CHF病人的心功能密切相關，分析其可能原因是胰島素抵抗參與多種心血管疾病(如高血壓、CHD、2型糖尿病等)的發病機制，當機體的血清鳶尾素水平降低時，可使胰島素抵抗加劇，從而導致糖、脂質的代謝發生紊亂，進而引發或加劇動脈粥樣硬化的進程，從而參與心臟重構。而有研究表明，miR-133能結合于RhoA基因轉錄產物，使RhoA基因表達和細胞分化周期蛋白表達降低，減少心肌纖維合成，提高結締組織生長因子表達，進而引起心肌細胞的增殖異常。

綜上所述，血清鳶尾素、miR-133可有效反映CHD合并CHF病人的心功能情況，有利于評估心室重構情況。