紅細胞無效輸注判定檢測技術

蒲梁春

【中圖分類號】R457.1 【文獻標識碼】B 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2020.11.094

輸血是臨床一項重要的治療方式與搶救手段，隨著近幾年醫療技術中分離技術的迅速發展，成分輸血已逐漸在臨床普及推廣開。紅細胞懸液作為血液成分中最為重要且用量最大，其無效輸注的情況占比較高，無效輸注不僅浪費了血液資源，還對患者的治療效果構成較大的影響。因此，需結合患者的具體病情指定合理的用血方案，尤其注意輸血后的反應效果。現階段，血紅蛋白Hb的上升情況與溶血產物增加是對紅細胞輸注效果評價主要依據，血紅蛋白增加未達到預期值，溶血產物量大量增加可判定紅細胞輸注無效。為保障患者的輸注效果，對輸注無效的原因進行明確至關重要。其中免疫與非免疫因素都是紅細胞輸注無效的主要原因，非免疫因素例如手術外傷、紅細胞質量、藥物毒理及輻射化療等;免疫因素例如紅細胞代謝產物、特殊血性物質、特殊抗體與其他體內免疫復合物等。因免疫因素造成的紅細胞輸注無效判定比較困難。對此，筆者就臨床處理紅細胞輸注無效的情況及判定紅細胞輸注無效的實驗進行規范性的理論與闡述。

1? 紅細胞輸注效果的判定方式

1.1測定血紅蛋白預期值

臨床定義200ml全血分離中的成分血為1U，體重55～65kg者，血紅蛋白供給量為110～130g/L，400ml全血中Hb的標準達到52g。相同體重受者輸注2U紅細胞，其外周血Hb需要提高10g/L。將化驗結果的標準定為輸血以內的12～24h化驗結果。按照臨床規定的無效輸血試行標準，輸注全血或紅細胞制劑24h內，排除輸液稀釋或失血的情況，若與此次輸注紅細胞前相較，血紅蛋白升高為達到預期值，則可初步判定輸注無效。計算公式：Hb升高預期值（g/L）=供者Hb（g/L）×輸入量（L）患者體質量（kg）×0.085×90%。將全血量作為輸入量的標準，紅細胞制劑折兌對應的全血量;小兒則按照0.09L/kg計算檢驗誤差。

1.2游離膽紅素與血紅蛋白測定

人體正常血漿游離的血紅蛋白濃度在0～50mg/L，若血管內的紅細胞或溶血遭到破壞，其血漿游離血紅蛋白數值即會升高。因此，可以通過測定血漿游離血紅蛋白判定是否發生溶血或溶血程度。游離膽紅素、總膽紅素及直接膽紅素均能簡潔將紅細胞輸注無效的程度反映出來，其中游離膽紅素的反應占比最高。由于機體經單核吞噬系統，進行衰老、變形、破裂的紅細胞處理，最終產生膽紅素。其計算公式為游離膽紅素（IB）=總膽紅素（TB）-直接膽紅素（DB）。若總膽紅素超過85umol/L，直接膽紅素/總膽紅素值超過20%可判定溶血性黃疸。

2? 紅細胞輸注無效的因素

2.1免疫因素

造成異體免疫與致敏的因素主要包括大量或多次輸血、妊娠、自身疾病等，引發針對紅細胞抗原的相應抗體。若再次輸注紅細胞會因抗原體反應造成紅細胞即刻破壞，或因回憶性免疫反應造成遲發性的溶血最終造成紅細胞破壞。

2.2紅細胞制品貯存時間

庫存血液與貯存時間呈正比，白細胞所釋放的多種因子會對紅細胞的脂質特性構成影響。貯存時間大于7d，未經濾除的白細胞的紅細胞懸液中紅細胞的變形性會顯著減少，而溶血則提高，血袋內pH值顯著降低，最終造成紅細胞經末梢循環時被破壞，引發單核吞噬系統功能跳躍，以致血紅蛋白上升效果不佳，膽紅素升高，變為紅細胞輸注無效。

2.3交叉配血的敏感性

凝聚胺配血時會受到冷凝集的影響，發生敏感度降低且漏檢的情況，造成部分低效價親和力抗體在應用凝聚胺配血時發生假陰性。近幾年推廣的微注凝膠配血法檢測出一些不規則的抗體、若抗體的敏感度顯著高于凝聚胺配血法，且具有簡便、迅速等優勢，使其輸血效果更安全。

2.4輸血常見的不良反應

發熱反應是輸血中常見的不良反應，有研究指出發熱反應與紅細胞輸注無效有密切關聯，究其原因可能是機體免疫系統活動有關，亦或是機體的高代謝狀態有關。此外，肝脾腫大等并發癥也會對輸血效果構成影響。

3? 紅細胞輸注無效的檢測新技術

3.1熒光探針法檢測NO水平

NO作為一種不穩定生物自由基，不僅能穩定紅細胞的變形性，降低紅細胞凋亡，還對血液循環系統發揮著重要生理作用，包括擴張微小血管與松弛血管平滑肌、介導細胞免疫反應及神經遞質作用三大功效。若紅細胞破壞增多，會造成血漿內游離血紅蛋白含量提高，機體內的NO減少，從而降低血管內皮中NO的利用率，引發內皮功能障礙，形成血小板與凝血因子的活化現象出現。目前，臨床主要使用NO熒光探針法檢測NO的熒光強度，當NO的表達量降低則初步判定溶血發生。

3.2單核細胞的單層試驗

目前，國外相關機構已將單核細胞單層試驗作為新生兒溶血病診斷的一個常規輔助手段，此種方式主要結合體外單核細胞吞噬抗體致敏后的紅細胞情況來判定患者血漿內是否有紅細胞破壞抗體，并且能夠預估抗體在體內引發溶血程度的強弱性。通過模擬機體內致敏紅細胞的免疫全過程，其實驗將體內紅細胞被破壞程度準確的反映出，且能預測分析機體的溶血情況，但其操作繁雜。經油鏡下可對200～600個單核細胞進行觀察，對發生吞噬與黏附的單核細胞進行計數，計算出單核細胞總數的百分比PI值占比陽性對照的PI值，若樣品PI值與陽性對照PI值對比超過5%，則表明溶血反應發生。若低于5%則表明溶血反應的發生幾率較小。

4? 總結

紅細胞輸注引起的不良反應與紅細胞輸注無效在臨床均獲得醫護人員的重點關注，而對引發輸注無效的因素進行解決更是臨床所面臨的重點內容。對于無效輸注的標準臨床早已有定義，但有關的實驗判定卻鮮為人知。經對紅細胞代謝產物、相關免疫物質及特殊血型3方面進行實驗檢測判定，歸納總結出輸注無效的反映新指標，有望制定出無效輸注的新型鑒定方式，并借此找出紅細胞輸注無效的發生原因，為患者提供高質量的輸注效果。本文綜合幾個有關輸注無效判定的直接、間接有關指標，而對無效輸注現象的評估有待商榷。因此，需要通過大量樣本進行臨床試驗獲得進一步的指征上述指標對無效輸注的判定是否有效、是否準確，并由此再篩選出更優質、更客觀的判定指標。近幾年，隨著臨床對紅細胞免疫、紅細胞儲存受損的深入研究，加之患者病情復雜的生理、病理狀態，以至針對不同患者需要選擇對應的實驗或指標來進行無效輸注判定。而利用無效輸注原因實行臨床干預并制定相應的精準輸血治療手段，是臨床持續研究的探討方向，將其作為提供給臨床處理紅細胞無效輸注合理、規范的流程，并進行臨床合理、科學的指導，提高用血安全性。