肺結(jié)核患者血液和胸腔積液IL-35的表達(dá)

周敏 邱粵勇 鄭燕賢

【摘要】 目的：探討肺結(jié)核患者血液和胸腔積液IL-35的表達(dá)情況。方法：選取2017年10月-2019年10月于筆者所在醫(yī)院治療的肺結(jié)核患者60例作為研究組，60例健康患者作為對(duì)照組，對(duì)比患者和健康志愿者IL-35表達(dá)水平的差異。結(jié)果：研究組治療1個(gè)月后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較治療前下降明顯（P<0.05）;研究組治療前與治療后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較對(duì)照組更高（P<0.05）;研究組中性粒細(xì)胞絕對(duì)值和百分比較對(duì)照組高（P<0.05）。結(jié)論：肺結(jié)核患者較健康者的胸腔積液及血液IL-35表達(dá)水平升高，治療后表達(dá)水平顯著下降，具有診斷參考意義。

【關(guān)鍵詞】 肺結(jié)核 血液 胸腔積液 IL-35

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.25.025 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2020）25-00-03

[Abstract] Objective： To explore the expression of blood and pleural effusion IL-35 in tuberculosis patients. Method： A total of 60 cases of tuberculosis patients treated in our hospital from October 2017 to October 2019 were selected as study groups， and 60 healthy patients were used as a control group， compared the differences in the expression levels of IL-35 in patients and health volunteers. Result： The level of IL-35 expression of peripheral blood and chest cavity fluid decreased significantly compared to pre-treatment （P< 0.05）; after 1 month of treatment in the study group， and the IL-35 expression level of peripheral blood and chest fluid before and after treatment was higher than that of the control group （P<0.05）; and the absolute value and the percentage of the neutrophils cells of the study group were higher than those of the control group （P<0.05）. Conclusion： The level of IL-35 in pleural effusion and blood of patients with pulmonary tuberculosis is higher than that of healthy patients， and the expression level after treatment decreases significantly， which is of diagnostic reference significance.

[Key words] Tuberculosis Blood Pleural effusion IL-35

First-authors address： Huidong County Peoples Hospital， Huidong 516300， China

肺結(jié)核是呼吸道的一種慢性疾病，同時(shí)也是我國(guó)國(guó)內(nèi)進(jìn)行重點(diǎn)防治的具有強(qiáng)烈傳染性的疾病之一[1]。該疾病大多是由結(jié)核桿菌引發(fā)，并與患者的變態(tài)反應(yīng)及免疫力的具有密切的聯(lián)系[2]。IL-35是一種負(fù)向免疫調(diào)節(jié)因子，屬于少數(shù)幾種具有抑制免疫活性的信號(hào)分子之一，主要發(fā)揮免疫抑制和抗炎作用[3]。本研究主要通過(guò)研究受試者血液及胸腔積液中IL-35的具體表達(dá)情況，探討IL-35在肺結(jié)核免疫抑制調(diào)節(jié)中的意義，具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年10月-2019年10月于筆者所在醫(yī)院治療的肺結(jié)核患者60例作為研究組，60例健康患者作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合《WS-288-2008肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)》中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];經(jīng)CT、X線、病理檢查確診為肺結(jié)核患者;無(wú)免疫及免疫相關(guān)疾病;既往5個(gè)月未服用免疫抑制劑或激素者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心、肝腎等重大臟器疾病者;存在意識(shí)或精神障礙不能與患者取得良好配合者。研究組男31例，女29例;年齡35～88歲，平均（47.3±3.2）歲。對(duì)照組男30例，女30例;年齡35～87歲，平均（46.3±3.4）歲。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。患者及其家屬均同意本研究進(jìn)行，醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)研究實(shí)施。

1.2 方法

肺結(jié)核患者入院后常規(guī)進(jìn)行抗結(jié)核治療，若患者肝功能出現(xiàn)異常，需將抗結(jié)核治療暫時(shí)停止，增加護(hù)肝治療。

血液檢測(cè)方法：兩組患者均于入院后的24 h以?xún)?nèi)于患者空腹?fàn)顟B(tài)下抽取患者2 ml肘靜脈血仔細(xì)置于血常規(guī)管內(nèi)，肝素抗凝，靜置5 min，控制溫度為4 ℃，以2 500 r/min的速度進(jìn)行離心，離心時(shí)間為10 min，研究組治療1個(gè)月后重復(fù)以上步驟。

采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒及Biotek有限公司生產(chǎn)的酶標(biāo)儀進(jìn)行，操作步驟參照試劑盒所標(biāo)注的內(nèi)容嚴(yán)格進(jìn)行，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

采用SysmexXT-1800i全自動(dòng)血球分析以對(duì)患者治療后外周血淋巴細(xì)胞百分比及中性粒細(xì)胞水平進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)應(yīng)用Graphpad prism 5.0進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后IL-35表達(dá)水平對(duì)比

研究組治療1個(gè)月后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較治療前下降明顯（P<0.05）;研究組治療前與治療后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較對(duì)照組更高（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2 兩組中性粒細(xì)胞絕對(duì)值及其百分比對(duì)比

治療后研究組中性粒細(xì)胞絕對(duì)值和百分比較對(duì)照組高（P<0.05），見(jiàn)表2。

3 討論

研究指出，人感染結(jié)核菌后不一定發(fā)病，當(dāng)機(jī)體抵抗力低或細(xì)胞介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)增高時(shí)，才能引起臨床發(fā)病[5]。有研究報(bào)道感染MTB（結(jié)核分枝桿菌）后，Th1型免疫反應(yīng)被抑制，或者Th2反應(yīng)性增加，Th1/Th2失衡，最終導(dǎo)致結(jié)核病;但隨著病情的好轉(zhuǎn)呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì)，且不同轉(zhuǎn)歸的患者體內(nèi)各種細(xì)胞因子的變化趨勢(shì)不同，Th1/Th2的失衡可能是影響結(jié)核病發(fā)病和轉(zhuǎn)歸的一個(gè)重要因素[6]。機(jī)體Th1、Th2平衡失調(diào)，與腫瘤免疫逃逸、細(xì)菌、病毒等微生物感染有一定的關(guān)系，并參與變態(tài)反應(yīng)性疾病，自身免疫性疾病和移植排斥反應(yīng)的發(fā)生。與傳統(tǒng)的臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目不同，檢測(cè)Th1、Th2相關(guān)因子的意義，并不著重于輔助疾病的診斷，而更注意分析疾病發(fā)生發(fā)展的狀況，為臨床調(diào)整Th1、Th2失衡提供正確的治療措施，在抗結(jié)核的免疫反應(yīng)中不同細(xì)胞因子呈現(xiàn)出不同的變化趨勢(shì)。Th1型和Th2型細(xì)胞因子在肺結(jié)核活動(dòng)期處于高水平狀態(tài)。但隨著病情的好轉(zhuǎn)呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì)且不同轉(zhuǎn)歸的患者體內(nèi)各種細(xì)胞因子的變化趨勢(shì)不同[7]。因此，Th1型、Th2型免疫水平過(guò)低或者Th1/Th2的失衡可能是影響結(jié)核病發(fā)病和轉(zhuǎn)歸的一個(gè)重要因素。許多免疫治療的目的是提高Th1的免疫反應(yīng)水平，維持Th1/Th2的再平衡[8]。

本文研究的IL-35是一種負(fù)向免疫調(diào)節(jié)因子，在抑制效應(yīng)T細(xì)胞增殖、Th17細(xì)胞分化和IL-17的合成中發(fā)揮作用，IL-35在抑制效應(yīng)T細(xì)胞增殖、Th17細(xì)胞分化和IL-17的合成、維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境免疫平衡和免疫性/炎癥性疾病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用[9]。因此，檢測(cè)肺結(jié)核患者IL-35的表達(dá)水平，可能對(duì)觀察肺結(jié)核患者的免疫狀態(tài)有幫助，實(shí)現(xiàn)Th1/Th2的再平衡。同時(shí)IL-35是由調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）分泌的具有抗炎和免疫抑制作用的細(xì)胞因子，并且在多種免疫相關(guān)疾病中起到關(guān)鍵的作用[10]。IL-35生物學(xué)作用不同于IL-12家族的其他成員，它可以增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）的抑制能力，屬于少數(shù)幾種具有抑制免疫活性的信號(hào)分子之一，主要發(fā)揮免疫抑制和抗炎作用[11]。B細(xì)胞可通過(guò)提供IL-35限制EAE發(fā)病，從EAE恢復(fù)需要B細(xì)胞的IL-35表達(dá)，B細(xì)胞可以通過(guò)產(chǎn)生IL-35抑制抗微生物免疫，IL-35是T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑[12]。在結(jié)核病的潛伏期、發(fā)病、治療及轉(zhuǎn)歸的過(guò)程中，Th1、Th2、Th17和Treg型免疫細(xì)胞和因子均參與反應(yīng)，細(xì)胞因子的變化趨勢(shì)在不同的結(jié)核病患者中顯著不同[13]。

本研究數(shù)據(jù)顯示，研究組治療1個(gè)月后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較治療前下降明顯（P<0.05）;研究組治療前與治療后外周血和胸腔積液IL-35表達(dá)水平較對(duì)照組更高（P<0.05），提示肺結(jié)核患者胸腔積液及外周血中IL-35表達(dá)水平較正常人明顯升高，臨床檢查中可參照患者IL-35水平來(lái)判斷患者是否患有肺結(jié)核;研究組中性粒細(xì)胞絕對(duì)值和百分比較對(duì)照組升高（P<0.05），提示肺結(jié)核患者對(duì)于病原菌所致的炎性反應(yīng)具有較大的反應(yīng)度，機(jī)體難以對(duì)炎癥反應(yīng)進(jìn)行有效控制。

本研究對(duì)前期收集的符合本研究觀察條件的病例按研究方案的要求進(jìn)行血液和胸腔積液IL-35的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其在不同的結(jié)核病患者及不同的治療療程中的表達(dá)和變化趨勢(shì)有所不同，關(guān)于IL-35在肺結(jié)核患者血液和胸腔積液的表達(dá)，尚需進(jìn)行更進(jìn)一步的研究。

綜上所述，肺結(jié)核患者相較于健康患者來(lái)說(shuō)，胸腔積液及血液IL-35表達(dá)水平出現(xiàn)升高，治療后表達(dá)水平顯著下降，具有診斷輔助參考意義。

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（收稿日期：2020-06-29） （本文編輯：郎序瑩）