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調制方法對吉林曬紅煙品質的影響

2020-11-07 10:37:46趙曉軍符云鵬侯振武邱寶平
煙草科技 2020年10期

趙曉軍,符云鵬,侯振武,凡 聰,邱寶平,李 煒,王 靜

1.河南農業大學煙草學院 煙草行業煙草栽培重點實驗室,鄭州市文化路95號 450002 2.昆明市煙草公司嵩明縣分公司,云南省嵩明縣秀嵩街68號 651700 3.蛟河市煙葉有限公司,吉林省蛟河市河南街楊木林子路27號 132500 4.紅塔遼寧煙草有限責任公司營口卷煙廠,遼寧省營口市建設街72號 115002 5.上海煙草集團北京卷煙廠有限公司,北京市通州區萬盛南街99號 101121

調制是煙葉品質形成的關鍵環節。調制過程中溫濕度不同可導致煙葉失水速率、酶活性、物質降解與轉化等的差異,進而對調制后煙葉內外在品質及使用價值有較大影響[1-7]。在烤煙調制方面,李章海等[4]研究表明,掛桿密集烤房和散葉密集烤房烤后煙葉腺毛分泌物總量分別約為傳統普通烤房的50%和60%,框裝密集烤房烤后煙葉腺毛分泌物總量與傳統普通烤房調制的煙葉相當。蔡憲杰等[2]、王愛華等[3]、孫帥帥等[8]研究表明,烘烤過程中溫濕度對煙葉淀粉酶、蛋白酶、多酚氧化酶、過氧化物酶等活性及煙葉失水速率、色素降解、常規化學成分和致香物質含量有明顯影響;階梯升溫有利于提高多種香氣物質和氨基酸含量,進而提高煙葉香氣質和香氣量[9];中濕度烘烤有利于皖南煙葉焦甜香風格的彰顯[10]。白肋煙調制方面,史宏志等[11]提出,晾房類型對白肋煙中部葉、上部葉中性香味物質含量以及中部葉感官品質有較大影響,評吸得分均以竹笆涂泥晾房調制的煙葉最高,小青瓦晾房調制的煙葉最低;李小波[12]試驗認為,增溫排濕晾房能提高晾房內溫度、降低相對濕度,使煙葉晾制時間縮短7~10 d,晾制后煙葉香氣質、香氣量、雜氣、余味均有所改善;李青誠等[13]研究表明,中濕度調制有利于白肋煙上、中部葉重要香氣物質的積累,低濕調制更有利于下部葉香氣物質的積累[14]。另外調制設施[15]、調制方法[16]、調制期間濕度[17]對香料煙調制過程生理生化變化及品質也有明顯影響。但目前關于曬紅煙調制方法研究報道較少。僅尹永強等[18]研究了湘西曬紅煙調制過程中煙葉主要化學成分的變化;鄭昕等[19]試驗了調制方法對萬源曬紅煙品質的影響,發現折曬煙葉TSNAs總量顯著降低,吸食余味較好;索曬煙葉香味物質總量及重要香味成分含量顯著提高,煙葉風格突出、香氣質好,感官品質較優。

曬紅煙是中式低焦油卷煙的重要原料[20-21],我國曬紅煙資源豐富,分布范圍廣,調制方法以傳統調制為主。吉林省曬紅煙產區多采用田間露天曬制,或在曬煙架上用塑料薄膜覆蓋曬制,曬制期間環境溫度低,易受風、雨等不良天氣條件的影響,導致煙葉變黃、變紅緩慢且不均勻,煙葉中大分子物質降解不充分,葉片僵硬,致使曬后煙葉香氣量不足,余味欠舒適。為此,進行了不同調制方法對曬紅煙經濟性狀、常規化學成分、香味物質、煙草特有亞硝胺(TSNAs)及感官品質的影響試驗,旨在為當地曬紅煙生產確定適宜的調制方法提供依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗于2016年在吉林省長春市農安縣青山口鄉江東王村進行。供試曬紅煙品種為大葉黃,試驗地土壤為黑鈣土,肥力中等,質地疏松。試驗地面積0.2 hm2,5月20日移栽,行距1.2 m,株距0.5 m,按當地優質曬紅煙生產技術規范進行煙田管理,初花期打頂,留葉16片/株,8月22日采收中部葉,8月28日采收上部葉。

1.2 試驗設計

選擇生長均勻一致的煙株,取成熟的中部葉(自下而上第8~10位葉)和上部葉(自下而上第12~14位葉)進行調制試驗。設置3個處理,每處理3次重復。中、上部葉每處理各編煙12繩,每重復4繩煙;煙繩長4 m,每個繩扣編煙2片,每米煙繩編煙60片。

處理分別為:①傳統曬制(T1),即煙葉上繩上架后直接曬制,遇雨煙繩并攏,并覆蓋塑料薄膜。該處理變黃期繩間距20 cm;變紅前期繩間距10 cm,變紅后期繩間距15~20 cm;干筋期白天繩間距20 cm,晚上將煙繩并攏,直至主脈干燥。②塑料薄膜覆蓋曬制(T2),即煙葉上繩上架后先失水凋萎2 d,然后覆蓋塑料薄膜,待煙葉變黃6~7成后揭膜進行露天曬制。該處理不同調制階段煙繩間距同T1,調制期間遇雨煙繩并攏,并覆蓋塑料薄膜。③塑料大棚曬制(T3),即煙葉上繩后掛入塑料大棚(塑料棚長6 m,寬4 m,中高1.8 m,邊高1.4 m),掛煙一層,繩間距20 cm;變黃期密封保溫保濕,變紅期打開棚兩端薄膜適量通風排濕;干筋期白天通風,晚上密封,直至主脈干燥;調制期間遇雨密封。T1和T2處理的3次重復掛置在同一煙架上,T3處理的3次重復掛置在同一調制棚內。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 調制期間溫濕度測定

采用DL-WS211溫濕度自動記錄儀(杭州盡享科技有限公司)測定煙葉曬制環境溫濕度。每處理1臺溫濕度記錄儀,每臺溫濕度記錄儀配備3個溫度探頭和3個濕度探頭,分別置于該處理曬煙架3個重復代表性煙繩間煙葉中部位置,記錄并計算不同調制方法煙葉在變黃期、變紅期及干筋期晝、夜平均溫濕度。

1.3.2 煙葉經濟性狀

按照吉林省地方標準DB22/T 925—1999曬紅煙[22]進行各處理調制后的曬紅煙煙葉分級,并計算均價及產值。

1.3.3 常規化學成分

各處理取調制后曬紅煙二級煙葉樣品2.0 kg用于品質評價。其中取0.5 kg煙葉去除主脈,在50℃下恒溫烘干,粉碎后過0.25 mm篩,用于常規化學成分、中性香味物質、堿性香味物質及煙草特有亞硝胺含量的測定。

按 照標準 方法 YC/T159—2002、YC/T160—2002、YC/T161—2002、YC/T162—2011、YC/T217—2007、YC/T216—2013[23-28]測定總糖、還原糖、煙堿、總氮、氯、鉀和淀粉含量(質量分數),采用AA3型流動分析儀(德國BRAN+LUEBBE公司)進行測定。

1.3.4 中性香味物質

由河南農業大學煙草行業煙草栽培重點實驗室采取同時蒸餾萃取(SDE)、GC/MS測定曬紅煙中性香味物質含量(質量分數)[29],NIST庫檢索定性。所用儀器為氣質聯用儀(HP58902Ⅱ-5972,美國Agilent公司)。待測液制備:在同時蒸餾萃取裝置的一端連接1 000 mL的平底燒瓶,內裝20.00g煙葉(粉)樣品、500 mL蒸餾水和2.00 g檸檬酸,另一端連接250 mL燒瓶,內裝40 mL二氯甲烷、1 mL 0.15 mg/mL乙酸苯乙酯(色譜純)內標溶液,萃取2.5 h。在所得二氯甲烷萃取液中加入10.00 g無水硫酸鈉干燥,搖勻、靜置過夜,然后將溶液轉移至濃縮瓶,用旋轉蒸發儀在50℃條件下濃縮至1 mL,轉移至色譜進樣瓶中進行GC/MS分析。GC/MS條件為:

色譜柱:DB-5MS毛細管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm),檢測器FID;載氣:N2;流速0.8 mL/min;進樣量2 μL,分流比10∶1;進樣口溫度250 ℃。程序升溫:初始溫度50℃,保持5 min;以2℃/min升至80℃,再以3℃/min升至230℃,保持16 min;然后以12℃/min升至280℃,保持8 min。檢測器溫度∶280℃;傳輸線溫度:280℃;離子源溫度177℃;電離能70 eV;質量數范圍:35~500 amu;檢索譜庫:NIST02。

1.3.5 堿性香味物質

標準品:吡啶、2-甲基吡啶、2-甲基吡嗪、3-甲基吡啶、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、3-乙酰基吡啶、2,3,5-三甲基吡嗪、2-乙酰基吡啶、喹啉、3-苯基吡啶和吲哚(色譜純或AR,美國Sigma公司)。主要儀器:Waters 1525型高效液相色譜儀、Waters 2424型蒸發光散射檢測器(美國Waters公司);GC6890/MS5973N 氣質聯用儀(美國Agilent公司);RE-52A旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠)。參照文獻[30-31]的方法測定曬紅煙中堿性香味物質含量(質量分數)。

1.3.6 煙草特有亞硝胺

標準品:N-亞硝基降煙堿(NNN),4-(N-甲基亞硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK),N-亞硝基新煙草堿(NAT),N-亞硝基假木賊堿(NAB),NNN-d4,NNK-d4,NAT-d4,NAB-d4(純度>98%,加拿大TRC公司);超純水(電阻率≥18.2MΩ·cm);甲醇(色譜純,美國Fisher公司);乙酸、乙酸銨(色譜純,美國Tedia公司)。

主要儀器:在線SPE-HPLC聯用系統(荷蘭Spark Holland公司),API5500質譜議(美國ABI公司),Milli-Q50超純水儀(美國Millipore公司),13 mm×0.22μm親水PTFE針式濾器(上海安譜科學儀器有限公司),TZ-2AG臺式往復旋轉振蕩器(北京沃德儀器公司);BondElut PRS柱、Hysphere C18HD柱(荷蘭Spark Holland公司);CP2245電子天平(感 量 0.000 1 g,德國 Sartorius公司)。

煙草特有亞硝胺NNN、NNK、NAT和NAB由上海煙草集團有限責任公司技術中心北京工作站采用在線二維固相萃取-高效液相色譜-串聯質譜(Online 2D SPE-HPLC-MS/MS)法測定。待測液制備:準確稱取1.0 g煙樣,將其放入250 mL錐形瓶中,加入100μL 4種氘代TSNA(內標)溶液和100 mL100 mmol/L乙酸銨水溶液,在室溫下用振蕩器200 r/min萃取40 min。萃取液過0.22μm水相濾膜后,用在線二維固相萃取-高效液相色譜-串聯質譜聯用法檢測萃取液中煙草特有亞硝胺含量(質量分數)[32]。

1.3.7 感官品質

參照標準方法 YC/T 138—1998[33]進行煙葉感官品質評價,由紅塔遼寧煙草有限責任公司技術中心7位具有煙草行業評吸資質的專家進行評吸。評吸指標包括香氣質、香氣量、濃度、勁頭、刺激性、雜氣、余味、燃燒性和灰色,每個指標最大標度為9,各項指標分值之和為總分。

1.4 數據處理

運用Microsoft Excel 2013對試驗數據進行初步處理并制表,采用SPASS19.0軟件進行方差分析,用Duncan′s新復極差法進行差異顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 不同調制方法調制期間溫濕度的變化

由表1可以看出,中部葉和上部葉調制期間,白天和晚上的平均溫度均表現為T3>T2>T1。與傳統曬制方法相比,塑料大棚曬制在變黃期、變紅期、干筋期白天平均溫度分別提高6.9~8.6℃、4.7~7.4℃和10.8~13.3℃,晚上的平均溫度分別提高6.0℃、5.1~6.0℃和3.9~6.1℃。特別是在上部葉干筋期,當地氣溫在20℃以下,傳統曬制不利于煙葉主脈水分的散失。

不同調制方法調制期間環境相對濕度變化與溫度有所不同。在變黃期,白天和晚上的相對濕度均表現為T1>T2>T3,可能與該階段調制棚內溫度高,煙葉失水較快有關;變紅期不同調制方式的調制環境相對濕度與變黃期相反,傳統曬制最低,塑料大棚曬制最高,主要是該階段天氣較干旱,塑料大棚具有較好的保溫保濕效果,因而有利于煙葉變紅;干筋期,不同處理白天的相對濕度變化與變黃期相似,晚上的相對濕度表現為塑料大棚曬制明顯低于其他兩個處理,有利于煙葉干筋。

表1 不同處理調制過程中晝、夜平均溫濕度比較①Tab.1 Average day and night temperature and humidity values during different curing treatments

2.2 調制方法對曬紅煙經濟性狀的影響

由表2可知,調制方法對曬紅煙經濟性狀具有明顯的影響。調制后曬紅煙均價、1~2級煙葉比例均表現為T3>T2>T1,且處理間差異顯著;中部葉和上部葉單葉質量、產量和產值均表現為T3顯著高于T2和T1。說明采用塑料棚曬制的曬紅煙單葉質量、高等級煙葉比例、均價及產值比傳統曬制、覆蓋塑料薄膜曬制煙葉顯著提高。

表2 不同處理曬紅煙經濟性狀比較①Tab.2 Economic traits of dark sun-cured tobacco under different curing treatments

2.3 調制方法對曬紅煙常規化學成分含量的影響

由表3可知,不同調制方法對曬紅煙總糖、還原糖、淀粉、煙堿及鉀含量影響較大。上部葉總糖、還原糖含量及糖堿比表現排序依次為T3>T1>T2,處理間差異達顯著水平;淀粉含量表現排序依次為T1>T2>T3,鉀含量表現排序依次為T3>T2>T1,處理間均有顯著差異;煙堿含量則表現為塑料大棚曬制顯著低于其他兩個處理。中部葉總糖、還原糖含量及糖堿比表現排序依次為T3>T2>T1,處理間差異達到顯著水平;鉀含量變化與上部葉相似;淀粉和煙堿含量則表現為塑料大棚曬制顯著低于其他兩個處理。可見,采用塑料大棚曬制可促進曬紅煙淀粉的充分降解,提高煙葉總糖、還原糖、鉀含量及糖堿比。T3處理煙堿含量顯著降低,一方面是煙葉曬制過程中煙堿的光氧化降解[34-35],另一方面與該處理干物質消耗相對較少、單葉質量顯著高于T2和T1,煙堿相對含量降低有關[36]。

表3 不同處理調制后曬紅煙常規化學成分含量比較Tab.3 Chemical contents in dark sun-cured tobacco leaves under different curing treatments

2.4 調制方法對曬紅煙香味物質的影響

2.4.1 中性香味物質

從表4可以看出,調制方法對多數中性香味物質成分影響較大。就上部葉而言,調制后曬紅煙棕色化反應產物中含量最高的糠醛以T3處理最高,T2處理最低;糠醇含量以T2處理最高,T3處理最低;其他3種物質及該類物質總含量則表現為T3>T2>T1;類胡蘿卜素降解產物中巨豆三烯酮的4種同分異構體、氧化異佛爾酮、β-大馬酮、二氫獼猴桃內酯、β-二氫大馬酮、香葉基丙酮、螺巖蘭草酮等12種物質及該類物質總含量表現為T3>T2>T1。苯丙氨酸類降解產物中苯乙醛以T3處理最高,苯甲醇以T2處理最高,但苯甲醛、苯乙醇的含量及該類物質總量同樣表現為T3>T2>T1。曬紅煙重要香味物質茄酮的含量以T3處理明顯高于其他2個處理;芳樟醇、葉綠素降解產物新植二烯含量則表現為T3>T2>T1。上部葉中性香味物質總含量T3處理明顯高于T1和T2處理。

中部葉中糠醛、3,4-二甲基-2,5-呋喃二酮等4種棕色化反應產物及該類物質總量表現為T3>T2>T1。類胡蘿卜素降解產物中β-環檸檬醛、二氫獼猴桃內酯、6-甲基-5-庚烯-2-醇、氧化異佛爾酮、β-大馬酮、β-二氫大馬酮、螺巖蘭草酮、法尼基丙酮、巨豆三烯酮(3)等11種物質含量及該類物質總量也表現為T3>T2>T1。苯丙氨酸類降解產物中含量較高的苯乙醛、苯甲醇、苯乙醇含量均以T3處理最高,苯甲醛含量則以T2處理最高,該類物質總量表現為T3>T2>T1。T3和T2處理茄酮含量明顯高于T1處理,新植二烯、芳樟醇、面包酮含量均表現為T3>T2>T1。中部葉中性香味物質總含量處理間差異明顯,表現為T3>T2>T1。說明采用塑料大棚曬制可提高大多數中性香味物質含量及總量。

2.4.2堿性香味物質

由表5可知,不同部位、不同處理間曬紅煙堿性香味物質含量差異較為明顯,總體上各處理上部葉堿性香味物質總量明顯高于中部葉。上部葉中5種吡啶類、4種吡嗪類以及吡咯、喹啉、吲哚共計13種堿性香味物質含量均表現為T3>T2>T1;2,6-二甲基吡啶、3-甲基吡啶、2,5-二甲基吡啶含量為T3>T1>T2;吡嗪中含量最高的物質2-甲基吡嗪含量則表現為T1、T2處理明顯高于T3處理;定性定量的17種堿性香味物質總量為T3>T2>T1。中部葉2,6-二甲基吡啶、3-甲基吡啶、2-甲氧吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2-甲基喹啉和吲哚含量以T2處理最高,其他11種堿性香味物質含量及堿性香味物質總量均表現為T3>T2>T1。說明采用塑料大棚曬制能明顯提高曬紅煙堿性香味物質含量。

2.5 調制方法對曬紅煙亞硝胺(TSNAs)含量的影響

由表6可知,上部葉NAT、NNK、NNN含量及TSNAs總量大于中部葉。無論上部葉還是中部葉,NAT、NNK、NNN含量及TSNs總量均表現為T1>T2>T3,且處理間差異達到顯著水平;NAB含量表現為T3處理顯著低于T1和T2處理,T1與T2處理間差異很小。說明采用塑料大棚曬制有利于降低煙葉中TSNAs含量,進而提高煙葉吸食的安全性。

表4 不同處理曬紅煙中性香味物質含量比較Tab.4 Contents of neutral aroma components in dark sun-cured tobacco leaves under different curing treatments(μg·g-1)

表5 不同處理曬紅煙堿性香味物質含量比較Tab.5 Contents of alkaline aroma components in dark sun-cured tobacco leaves under different curing treatments(μg·g-1)

表6 不同處理曬紅煙TSNAs含量比較Tab.6 Contents of TSNAs in dark sun-cured tobacco leaves under different curing treatments (μg·g-1)

2.6 調制方法對曬紅煙感官品質的影響

評吸結果(表7)表明,上部葉的香氣質、香氣量、濃度、燃燒性分值均表現為T3>T2>T1,刺激性、余味分值表現為T3、T2處理大于T1處理,燃燒性則以T3處理優于T2和T1處理。中部葉的香氣質、香氣量、濃度、雜氣、刺激性、灰色分值均表現為T3>T2>T1,余味分值表現為T3處理優于T1和T2處理,燃燒性分值則是T2和T3處理優于T1處理,上部葉和中部葉感官品質總分值均表現為T3>T2>T1,且處理間差異明顯。說明采用塑料大棚曬制對改善曬紅煙的感官品質效果最好,在變黃期覆蓋塑料薄膜曬制的煙葉品質也明顯優于傳統露天曬制。

表7 不同處理曬紅煙感官品質比較Tab.7 Sensory qualities of dark sun-cured tobacco leaves under different curing treatments (分)

3 討論

煙葉調制過程中溫濕度對煙葉水分的散失及物質轉化具有較大的影響[1]。Burton等[37]研究表明,在24℃和32℃下調制的白肋煙胡蘿卜素、葉黃素含量較15℃下調制的煙葉降低25%以上;24℃條件下調制的白肋煙巨豆三烯酮、β-大馬酮、β-紫羅蘭酮等類胡蘿卜素降解產物明顯高于15℃下調制的煙葉;調制期間溫度在15~32℃之間,堿性香味物質吲哚的含量隨溫度的升高而增加。曬紅煙調制受外界氣候條件影響很大。吉林省曬紅煙通常調制時間是8月下旬至9月份,傳統露天曬制環境溫度較低(晚上已經降至20℃以下),濕度也難以控制,煙葉中大分子物質如淀粉、色素、蛋白質等降解不充分,這可能是導致傳統露天曬制煙葉淀粉含量較高、糖含量以及中性、堿性香味物質含量總體偏低的主要原因。利用塑料大棚曬制的煙葉淀粉含量顯著降低,總糖、還原糖、中性和堿性香味物質含量提高,煙葉感官品質明顯改善,這主要與塑料大棚曬制可將調制環境溫濕度控制在相對適宜的范圍內,使淀粉、質體色素等水解酶活性及脂氧合酶活性提高,有利于促進大分子物質降解及香味物質形成有關[33]。

在煙葉調制過程中,煙堿量降低的原因主要是煙堿的氧化降解[37]。調制方法對調制后煙葉煙堿含量影響較復雜,當調制過程中煙葉干物質消耗高時,則調制后煙葉煙堿相對含量增高,反之則低。本研究中發現,傳統露天曬制和變黃期覆蓋塑料薄膜曬制的曬紅煙煙堿含量顯著高于塑料大棚曬制,主要與前兩種調制方法調制期間溫度相對較低、調制時間較長、煙葉干物質損失較多導致煙堿相對含量提高有關。塑料大棚曬制煙葉鉀含量顯著高于其他處理,可能是該處理調制前期塑料大棚內溫度高、相對濕度較低,煙葉失水較快,主脈中水分較多向葉片遷移[38],主脈中鉀離子隨水分遷移至葉片所致;也可能與傳統曬制煙葉干燥緩慢,當細胞膜破裂后電解質外滲較多,導致鉀素流失有關,具體原因仍有待進一步研究。

煙草特有亞硝胺主要是在煙葉調制過程中形成,且與細胞膜破壞同步,尤其是在煙葉變黃后至葉片干燥期間積累達到高峰[39-40]。調制過程中溫濕度條件、煙葉干燥速度及煙葉表面某些微生物的活動對煙葉TSNAs含量影響較大,高溫(32℃)、高濕(83%)晾制條件可導致煙葉中NO2和 TSNAs的大量增加[38,41]。在不影響煙葉品質的同時,適當降低調制環境濕度、提高溫度,可縮短干燥時間,同時降低煙葉表面微生物群落及活動能力,最終降低煙葉TSNAs的積累[42-43]。本研究中采用塑料大棚曬制,曬紅煙TSNAs顯著降低,主要是因為塑料大棚曬制的煙葉在變紅定色期,可保持較高的溫度(20~30℃)和適宜的相對濕度(50%~80%),既有利于煙葉順利變紅,又有利于煙葉失水干燥,縮短煙葉干燥時間,因而TSNAs含量降低。傳統曬制在煙葉變紅期均暴露在自然條件下,該階段氣溫較低(15~20℃),煙葉失水干燥緩慢,有利于細菌滋生,導致TSNAs含量顯著提高。塑料薄膜覆蓋曬制雖然在煙葉變紅期也暴露在自然條件下,但由于變黃期處于較高的溫度條件下,使煙葉變黃、變紅期提前,調制時間縮短,進而TSNAs含量也顯著低于傳統露天曬制。

4 結論

塑料大棚曬制、塑料薄膜覆蓋曬制、傳統曬制等調制方法對吉林曬紅煙經濟性狀及品質影響較大。與傳統曬制和變黃期覆蓋塑料薄膜曬制相比,采用塑料大棚曬制可提高調制環境的溫度、保持調制環境具有適宜的相對濕度,有利于淀粉、質體色素等大分子物質的降解,顯著提高曬紅煙的等級結構、均價及產值,同時提高煙葉糖含量、中性和堿性香味物質含量以及煙葉感官品質,顯著降低曬紅煙TSNAs含量。變黃期覆蓋塑料薄膜曬制的煙葉經濟性狀、化學成分協調性、中性和堿性香味物質及煙葉的感官品質也優于傳統曬制,且TSNAs含量顯著低于傳統曬制。因此,吉林曬紅煙產區適宜的調制方法為塑料大棚曬制。

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