腸道益生菌對老年非酒精性脂肪性肝病患者肝臟脂肪含量和認知功能的影響

馮保樂，張琦，張艷麗 陽谷縣人民醫院消化內科，山東聊城5300；陽谷縣人民醫院麻醉科，山東聊城5300

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)指肝細胞內脂肪過度沉積，發生彌漫性脂肪變性，且非酒精和其他明確的肝臟損傷因素導致的一種臨床病理綜合征[1]。一般認為NAFLD的發生與脂肪代謝紊亂、胰島素抵抗、遺傳易感性等因素有關，且NAFLD患者發生代謝綜合征和2型糖尿病的風險較高[2]。NAFLD在全球的發病率較高，而老年人群由于血糖、血脂、血壓普遍高于年輕人，其發病率也相對增加。NAFLD診斷和治療不及時可逐步進展為肝硬化，對患者生命健康構成嚴重威脅，因此有效預防和治療是控制病情進展為終末期肝病的關鍵[3]。近年研究認為，肝功能障礙、代謝性疾病與腸道微生態之間有密切聯系，腸道菌群和腸源性內毒素血癥在NAFLD發病中起到重要作用，因此推測腸道益生菌對該疾病有一定的治療效果[4]。本研究旨在探討腸道益生菌在治療老年NAFLD過程中的作用和療效，為該病的治療提供依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年7月～2019年7月我院消化內科收治的86例老年NAFLD患者為研究對象。納入標準：符合《非酒精性脂肪性肝病診療指南(2010年修訂版)》[5]中NAFLD相關診斷標準；B超或肝活檢病理檢查確診；年齡≥60歲，性別不限；入組3個月內未服用減肥藥、保肝藥或其他可導致肝臟酶學改變的藥物；入組3個月內未使用抗生素、免疫抑制劑、益生菌等影響腸道菌群的藥物。排除標準：有飲酒史(飲酒量：男性﹥140 g/周，女性﹥70 g/周)的脂肪肝患者；合并病毒性肝炎、遺傳性肝病、自身免疫性肝病等疾病者；合并嚴重心、肺、腎等臟器疾病者；合并感染性疾病或惡性腫瘤者；合并糖尿病、高血壓等慢性疾病者。根據簡單隨機分組原則，用抽簽法將86例患者分為觀察組和對照組各43例。觀察組患者男24例、女19例，年齡(66.18±6.89)歲，BMI(23.94±3.12)kg/m2，病程(4.10±0.85)年，脂肪肝病理分級為輕度23例、中度15例、重度5例。對照組患者男21例、女22例，年齡(65.42±6.17)歲，BMI(23.56±3.01)kg/m2，病程(4.32±0.81)年，脂肪肝病理分級為輕度22例、中度17例、重度4例。兩組患者上述資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)。本研究經我院醫學倫理委員會批準，患者均自愿簽署知情同意書。

1.2 治療方法 對照組患者予以常規治療：口服多烯磷脂酰膽堿膠囊，456 mg/次，3次/d，1個月后劑量減至456 mg/d；控制飲食，限制脂肪和酒精攝入，有氧運動，適當服用降糖藥和降脂藥。觀察組患者在對照組基礎上予以雙歧桿菌三聯活菌膠囊口服，0.63 g/次，2次/d，早晚飯后半小時溫開水送服。兩組患者均治療3個月。

1.3 觀察指標

1.3.1 腸道菌群 分別于治療前、治療3個月后留取患者大便，應用熒光定量PCR技術檢測雙歧桿菌、大腸桿菌數目，計算腸道微生物定值抗力即雙歧桿菌/大腸桿菌(B/E)。B/E≥1提示腸道定值抗力正常；B/E<1提示腸道菌群紊亂，定值抗力下降。

1.3.2 腸道屏障功能 分別于治療前、治療3個月后采集患者清晨肘靜脈血3 mL，常規離心分離血清。用鱟試劑基質偶氮顯色法測定內毒素水平，試劑盒由上海伊華醫學科技有限公司提供；用雙抗體夾心法檢測二胺氧化酶(DAO)水平，試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供。

1.3.3 肝功能 同上取血清，應用日立7600全自動生化分析儀檢測門冬氨酸轉氨酶(AST)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、谷氨酰轉移酶(GGT)水平。

1.3.4 肝臟超聲衰減系數及脂肪含量 分別于治療前、治療3個月后用彩色超聲診斷儀對患者進行B超檢查，采用直方圖技術對脂肪肝做定量分析，測量同一切面不同深度的肝組織回聲，計算其衰減系數，衰減系數越高則脂肪肝越嚴重；B超檢查后，采用磁共振及質子磁共振波譜(1HMRS)測定肝臟脂肪含量(LFC)。

1.3.5 認知功能 采用蒙特利爾認知評估量表(MoCA)[6]進行評估，包括視空連線測驗、注意力、計算力、抽象能力、定向力等11項檢測內容，涉及8個認知領域，總分30分，≥26分為認知功能正常，<26分為認知功能減退。受教育程度≤12年的測試者，若總分<30分則加1分，以矯正文化水平對測試結果的影響。

2 結果

2.1 兩組治療前后腸道菌群比較 治療3個月后，觀察組患者雙歧桿菌數、大腸桿菌數、B/E均高于治療前和對照組(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后腸道菌群比較

2.2 兩組治療前后腸道屏障功能比較 治療3個月后，觀察組患者血清內毒素、DAO水平均低于治療前和對照組(P均<0.05)。見表2。

表2 兩組治療前后血清內毒素、DAO水平比較

2.3 兩組治療前后肝功能比較 治療3個月后，兩組患者血清AST、ALT、GGT水平均較治療前降低，且觀察組低于對照組(P均<0.05)。見表3。

表3 兩組治療前后肝功能比較

2.4 兩組治療前后肝臟超聲衰減系數、LFC比較 治療3個月后，兩組患者肝臟超聲衰減系數、LFC均較治療前降低，且觀察組低于對照組(P均<0.05)。見表4。

2.5 兩組治療前后認知功能比較 治療3個月后，兩組患者MoCA評分均較治療前升高，且觀察組高于對照組(P均<0.05)。見表4。

表4 兩組治療前后肝臟超聲衰減系數、LFC、MoCA評分比較

3 討論

NAFLD作為一種代謝應激相關性疾病，隨著疾病進展可發生肝炎、肝纖維化和肝硬化，因此臨床應加強該疾病的預防和治療以阻止病情惡化。臨床上缺乏針對NAFLD病因的特異性治療藥物，以抗炎保肝、改善氧應激反應、緩解代謝綜合征等對癥治療為主。目前對NAFLD發病機制的研究認為，飲食、炎癥因子、宿主與微生物之間相互作用、遺傳等多種因素同時作用于肝臟，共同參與NAFLD的發生與發展，其中腸道微生態破壞引起的腸源性內毒素血癥起到重要作用[7]。

腸道菌群定植于消化道，是人體內復雜的共生系統，其中與人體健康密切相關的優勢菌群主要有雙歧桿菌、乳酸桿菌、柔嫩梭菌、擬桿菌4類，發揮著穩定機體內環境的重要作用[8]。既往研究表明，腸道菌群可通過表觀遺傳方式影響宿主對疾病的易感性，也可通過代謝產物調控機體免疫活性，腸道菌群失調可引起人體多種疾病，互為因果[9]。肝腸胚胎起源相同，在生物學功能上存在許多內在聯系，有學者對NAFLD患者的腸道菌群進行檢測和分析，發現其雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸桿菌等菌群數目有顯著改變[10]。本研究選擇雙歧桿菌三聯活菌膠囊對NAFLD患者進行治療，腸道菌群檢測結果顯示，觀察組患者治療后雙歧桿菌數、大腸桿菌數、B/E均高于治療前和對照組，表明腸道微生物定植抗力明顯提高。分析其原因認為，腸道益生菌可改善腸道菌群結構，通過營養競爭抑制有害菌群增長，維持菌群平衡，在調控腸道微生態的基礎上達到改善免疫代謝的效果，而且益生菌治療較抗生素更為安全和經濟[11]。

腸道菌群構成腸道重要的生物屏障，一旦屏障功能受損，大量內毒素進入門脈系統，促進炎癥介質釋放，可造成肝臟的氧化應激和炎癥損傷，因此調節腸道微生態、改善屏障功能、減少內毒素進入肝臟是治療NAFLD的新研究方向[12]。腸黏膜通透性可準確反映腸道屏障功能，檢測血液中內毒素和DAO含量,可間接反映腸黏膜完整性和通透性變化[13]。本研究結果顯示，觀察組患者治療后血清內毒素、DAO水平低于治療前和對照組，表明腸道益生菌可有效改善NAFLD患者腸道屏障功能。益生菌在體內代謝過程中產生的多種有機酸可下調腸道pH值，促進腸道蠕動，及時排出腸道內產生的毒素，減輕內毒素血癥，進而減輕肝臟損傷[14]。本研究還發現，兩組患者治療后血清AST、ALT、GGT水平均較治療前降低，且觀察組低于對照組，表明加用益生菌的NAFLD患者肝功能改善更明顯，分析原因可能與益生菌調控炎癥因子的作用有關，肝臟炎癥反應的減輕有利于促進肝功能恢復。

影像學檢查是判斷脂肪肝病情嚴重程度的重要依據。超聲檢測可利用直方圖技術對肝臟脂肪做定量分析，磁共振檢測則通過1HMRS定量檢測肝臟脂肪含量。本研究發現，兩組患者超聲衰減系數、LFC均較治療前降低，且觀察組低于對照組，表明加用益生菌可明顯減少肝臟脂肪沉積，可能與益生菌減少腸道細菌脂多糖、降低脂肪儲存等對脂類代謝的調控作用有關[15]。近年來臨床研究發現，肝臟慢性疾病引起的全身炎癥反應可能導致認知功能減退，而許旌[16]等研究表明，老年NAFLD患者認知功能與肝臟脂肪沉積的嚴重程度呈正相關。本研究采用MoCA評分對患者認知功能進行評估，結果發現觀察組患者MoCA評分高于對照組，表明益生菌可通過減少肝臟脂肪沉積，達到改善NAFLD患者認知功能的效果。

綜上所述，老年NAFLD患者口服腸道益生菌有助于腸道菌群平衡和腸道屏障功能改善，可減少肝臟脂肪沉積，促進肝功能恢復，并有效提高認知功能，其作用安全有效，值得在臨床推廣。