孜然種子提取物枯茗酸對2種病害藥效的初步研究

張 潔

(咸陽職業技術學院，陜西 咸陽 712000)

我國幅員遼闊，孕育了多種植物資源，據統計在我國現有植物資源中 ，高等植物約占35 112種[1]，大部分具有藥用價值，其中較多的植物具有生物活性，并被作為植物源農藥利用或研究。

孜然(CuminumcyminumL.)又名枯茗、孜然芹、為傘形科孜然芹屬一年生或兩年生草本植物，原產于埃塞俄比亞、埃及地區，自唐代以后傳入中國后，深受我國人民喜愛，現主要栽培于我國新疆地區，多作調味料使用。

孜然的提取物具有多種生物活性，在醫學方面，研究表明其種子提取的精油具有治療消化道系統疾病、驅逐人體腸道寄生蟲、驅寒除濕等功效[2]，此外，孜然種子內含有的類貼、香豆素等多種成分具有降脂、抗癌、提高人體免疫力等多種功效[3]。在農用方面，目前國內外對其的生物活性研究多在殺蟲及抑菌方面，國外研究表明，孜然種子提取的精油對地中海粉斑螟(EphestiaKuehniella)及雜擬谷盜(TriboliumConfusum)、棉蚜蟲(phisgossypii)朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus)、具有熏蒸活性[4-5]，對埃及伊蚊(Aedesaegypti)具有毒殺活性[6]。

孜然在抑菌方面的活性研究最為廣泛，研究表明其多種提取對多種病害都具有抑制及治療作用，韓建華等研究發現孜然種子丙酮提取物對辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici)等多種病原真菌有較強的的抑制活性[7]，胡林峰等從孜然種子乙醇總浸膏中分離得到兩種化合物質枯茗酸及枯茗醛，并發現枯茗酸對辣椒疫霉病菌等多種病原菌均有抑制活性及防治效果[8]。因此，本試驗基于前期研究的基礎上，為了進一步明確枯茗酸的抑菌活性，本實驗選取番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea)及小麥白粉病菌(Blumeriagraminis)為試驗菌，測定枯茗酸對兩種病菌的生物活性，以期為孜然農用生物活性的研發提供一些參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗植物材料 番茄(Lycopersiconesculentum)(金鵬十號)，小麥(Triticumaestivum)(輝縣紅)，咸陽職業技術學院試驗基地種植。

1.1.2 試驗病菌 番茄灰霉病菌、小麥白粉病菌均由咸陽職業技術學院儀祉農林學院提供。

1.1.3 試驗試劑 枯茗酸(濃度為98%)(上海晶純有限公司)，50%速克靈可濕性粉劑(日本住友化學工業株式會社)，15%三唑酮可濕性粉劑(四川國光農化有限公司)，均為市購。

1.2 試驗方法

測定枯茗酸對番茄灰霉病均的藥效采用組織法[9]。選取成熟、新鮮、大小形狀一致且未接觸過殺菌劑的帶蒂番茄，用水清洗干凈后晾干至無任何水漬后用濃度為75%的酒精擦拭表面自然晾干，用接種針在番茄果實表面刺出直徑為4～5 mm的感染區域后，將番茄灰霉病菌打成R=4 mm的菌餅扣在番茄表面。

保護作用處理時先用噴霧法將藥劑均勻的噴灑在番茄表面，自然晾干藥液后開始接菌種。 治療作用處理時將處理好的菌餅直接扣在番茄表面。

待番茄發病后按照公式1-1和公式1-2計算病斑直徑及藥效。

果實病斑直徑(mm)=兩次直徑平均值-4(菌餅直徑)

公式1-1

藥效(%)=

公式1-2

采用盆栽法[10]測定枯茗酸對小麥白粉病的藥效。將供試小麥種子播種于盆中，每盆播種10～15粒，無菌土常規培養，待小麥長至一心一葉時開始試驗。保護作用處理時將藥劑稀釋至供試濃度后均勻地噴灑在小麥表面，24 h后采用孢子抖落法接菌種，然后將接菌種后的小麥放置于人工培養箱(溫度：18℃，光暗周期：14 h ∶10 h，相對濕度68±2℃),待小麥完全發病時開始記錄病情指數。治療作用處理時先在小麥表面噴灑少量清水，然后采用孢子抖落法接菌種，接菌種后放入人工培養箱(溫度：18℃，光暗周期：14 h ∶10 h，相對濕度68±2℃)內24 h后噴灑藥劑，待小麥完全發病時開始記錄病情指數。注意藥劑噴灑要均勻。

2 結果與分析

2.1 枯茗酸對番茄灰霉病藥效的試驗結果

在表1中，分別測試枯茗酸在濃度為0.5 g·L-1、1 g·L-1情況下對番茄灰霉病菌的藥效反應，同時設置清水、溶劑、藥劑(50%速克靈可濕性粉劑)進行對照，每次處理5個番茄果實。

由表1可見，枯茗酸對番茄灰霉病菌的保護和治療均有一定效果，在枯茗酸的供試濃度為1 g·L-1時，對番茄灰霉病的保護效果和治療效果分別為59.31%、46.11%，保護效果較為明顯。

2.2 枯茗酸對小麥白粉病藥效的試驗結果

以噴霧法測定了枯茗酸在濃度為0.5 g·L-1、1 g·L-1情況下對小麥白粉病菌的藥效反應，同時設置清水、溶劑、藥劑(15%三銼酮可濕性粉劑)進行對照，結果見表2。

表1 枯茗酸對番茄灰霉病菌的藥效測定結果

表2 枯茗酸對小麥白粉病的藥效測定結果

由表2可見，當在枯茗酸的供試濃度為0.5 g·L-1時，枯茗酸對小麥白粉病的保護及治療藥效分別為66.20%、50.89%；在枯茗酸的供試濃度為1 g?L-1時，對小麥白粉病的保護及治療藥效達到了70.91%、61.03%。證明枯茗酸對小麥白粉病的保護作用較好。

3 結論與討論

近年來，由于人們過度且不理性的使用化學類農藥，使得我們的生存環境受到了較大的影響，正因如此，植物源農藥成為了國內外研究發展的趨勢。枯茗酸是從孜然種子中分離得到的活性物，屬于天然化合物，具有抑菌普廣、低毒、不易殘留等優點，符合國內外農藥研究發展的趨勢。

通過研究發現，枯茗酸對番茄灰霉病均有一定的保護和治療作用，其中保護作用達到了59.31%，效果較好；采用噴霧法使用枯茗酸對小麥白粉病也有治療和作用，保護效果較好，達到了70.91%，同時本實驗還采用了灌根法對小麥白粉病進行施藥，但治療和保護作用藥效均不明顯，說明枯茗酸內吸性效果不強。

綜上所述，枯茗酸具有較好的生物活性，且抑菌普廣，需進一步研究開發，提高其抑菌活性。