咸陽市2019年監督抽檢小麥粉中過氧化苯甲酰的檢測分析

□ 鄭欣欣 劉跳跳 咸陽市食品藥品檢驗檢測中心

1 引言

過氧化苯甲酰（benzoyl peroxide，BPO）是一種白色結晶性粉末，稍有氣味，具有弱氧化性，其自身轉化生成的苯甲酸（benzeneformic acid，BA）可抑制小麥中蛋白質分解酶的活性，進而提高小麥粉的貯氧能力[1]。過氧化苯甲酰具有增強面粉彈性、提升面粉等級等作用，有助于改進面粉品質。但是，過量添加過氧化苯甲酰會使面粉顏色發青，同時破壞其中的維生素，降低面粉質量，嚴重影響食品衛生指標及食用品質[2]。當前，某些企業為追求巨大的經濟利益而忽視標準的規定，致使在市售小麥粉中非法添加過氧化苯甲酰的事件時有發生[3—4]。在食安通食品抽檢信息與分析系統中查詢到，2012年4月至2019年10月公布的不合格小麥粉共計24批次，且主要集中在2012～2016年之間。其中，2012年不合格小麥粉占25%，主要原因可能是公告執行初期很多生產企業未及時調整工作。但是，近幾年小麥粉中過氧化苯甲酰不合格的事件也偶有發生。

現有的文獻資料往往注重探討過氧化苯甲酰檢驗新方法的驗證，如采用分光光度法[5]構建面粉中過氧化苯甲酰的快速檢測體系，且多數文獻選用高效液相色譜法[6—10]進行檢測，但均未被《國家食品安全監督抽檢實施細則》所錄入，對小麥粉中過氧化苯甲酰監督抽檢的研究也少有報道。因此，本研究采用《小麥粉中過氧化苯甲酰的測定高效液相色譜法》（GB/T 22325—2008）[11]對陜西省咸陽市3個市縣的小麥粉生產企業進行監督抽檢，檢測其小麥粉中的過氧化苯甲酰含量，以期為3個市縣的監管部門對小麥粉加工生產過程的監管提供可靠的依據，進而幫助監管部門和人民群眾了解小麥粉生產的安全狀況。

2 材料與方法

2.1 實驗材料

2.1.1 儀器

高效液相色譜儀，島津；電子天平，島津制作所；旋渦混合器，海門市其林貝爾儀器制造有限公司；溶劑過濾器，天津市津騰實驗設備有限公司。

2.1.2 試劑

甲醇：色譜純；碘化鉀溶液：50%水溶液，質量濃度；苯甲酸：純度為99.96%，LGC；乙酸銨緩沖溶液（0.02mol/L），苯甲酸標準貯備溶液（1mg/mL）。

2.1.3 材料

30批次小麥粉為2019年咸陽市縣級監督抽檢樣品，全部從3個市縣的小麥粉生產企業抽取，其中，彬州市17批次、長武縣6批次、旬邑縣7批次。

2.2 實驗方法

2.2.1 方法原理

由甲醇提取的過氧化苯甲酰以碘化鉀為還原劑將其還原為苯甲酸，通過高效液相色譜儀分離，在230nm下檢測，最低檢出限為0.5mg/kg。

2.2.2 樣品前處理

稱取5g樣品置于50mL具塞比色管中，加10.0mL甲醇，在旋渦混合器上混勻1min，靜置5min；加50%碘化鉀水溶液5.0mL，在旋渦混合器上混勻1min，放置10min；加水至50.0mL，混勻，靜置，吸取上清液通過0.22μm濾膜，濾液置于樣品瓶中，備用。

2.2.3 色譜條件

檢測器：紫外檢測器；色譜柱：Shim—pack GIST C18；規格：4.6mm×250mm×5μm；檢測波長：230nm；流動相：甲醇∶水（含0.02mol/L乙酸銨）為10∶90（體積分數）；流速：1.0mL/min；進樣量：10.0μL。

2.2.4 標準溶液的制備

稱取0.025g苯甲酸標準品，用甲醇溶解并定容至25mL容量瓶中，得到1000μg/mL標準貯備液。準確移取苯甲酸標準貯備液0.05、0.10、0.20、0.40、0.60mL，分別置于5個50mL容量瓶中，并分別加入甲醇至50.0mL，配備成濃度分別為1.0、2.0、4.0、8.0、12.0μg/mL的苯甲酸標準系列溶液。

2.2.5 計算方法

式中：D為樣品中過氧化苯甲酰的含量，g/kg；c是由工作曲線上查出的試樣測定液中相當于苯甲酸的濃度，μg/mL；V為試樣提取液的體積，mL；m為樣品質量，g；0.992是由苯甲酸換算成過氧化苯甲酰的換算系數。

3 結果與分析

3.1 苯甲酸標準物質分析

苯甲酸標準物質色譜圖，如圖1所示。以GB/T 22325—2008中附錄A苯甲酸標品色譜圖的保留時間為7.728min的色譜峰為苯甲酸標品的目標峰，圖1與標準中苯甲酸的色譜圖一致。

圖1 苯甲酸標準溶液色譜圖

3.2 標準曲線

由圖2可知，苯甲酸標準曲線的回歸方程為Y=35322.1X+4646.36，相關系數(r2)=0.9999851，擬合度(R2)=0.9999703，標準曲線的相關系數與擬合度都達到了0.9999級別，故符合實驗要求。

圖2 苯甲酸標準溶液的校準曲線

3.3 不同區域小麥粉質量分析

由圖3可知，對3個市縣27家面粉廠的30批次小麥粉進行監督抽檢，合格29批次、不合格1批次，總體合格率為96.67%、不合格率為3.33%。通過對不同區域分析可知，彬州市和旬邑縣的小麥粉全部合格，合格率達到100%；長武縣的小麥粉合格5批次，合格率為83.33%，不合格1批次，不合格率為16.67%。結果表明，3個市縣的大多數面粉企業都能夠遵守衛生部【2011】年第4號公告中“禁止在面粉生產中添加過氧化苯甲酰”的要求，但依然有個別企業未遵守公告要求，造成小麥粉不合格。

圖3 不同區域面粉廠的抽檢結果統計圖

3.4 不合格小麥粉樣品檢測

由圖4可知，小麥粉樣品色譜圖中與苯甲酸標準品目標峰（保留時間為7.728min）對應位置出現色譜峰，其對應的保留時間為7.753min，表明樣品中含有過氧化苯甲酰。根據標準曲線和計算公式可知，小麥粉樣品中的過氧化苯甲酰含量為0.032g/kg，且平行小麥粉樣品同樣檢出過氧化苯甲酰，含量為0.032g/kg。

圖4 小麥粉檢驗樣品色譜圖

3.5 不合格小麥粉加標樣品檢測

圖5 加標樣品色譜圖

由圖5可知，向小麥粉樣品中加入濃度為8.0μg/mL、體積為0.4mL的苯甲酸標準品，加標樣品色譜圖中在與苯甲酸標準品目標峰（保留時間為7.728min）對應位置只出現一個色譜峰，表明樣品的色譜峰和標準品的目標峰相重合，其保留時間為7.749min，加標樣的色譜峰面積明顯增大。根據標準曲線和計算公式可知，加標樣的過氧化苯甲酰的含量為 0.1 1 g/kg。根據回收率計算公式可得，回收率為98.73%。按照GB/T 27404—2008中對回收率的要求范圍為90%～110%，故本實驗的回收率滿足要求，結果準確可靠。

3.6 不合格小麥粉復測樣品檢測

由圖6可知，由不同檢驗員再次對小麥粉樣品進行復測，得到的樣品色譜圖中與苯甲酸標準品目標峰（保留時間為7.728min）對應位置出現色譜峰，其對應的保留時間為7.699min，表明復測小麥粉樣品中含有過氧化苯甲酰。根據標準曲線和計算公式可知，復測小麥粉樣品中相應的過氧化苯甲酰的含量為0.032g/kg。

圖6 小麥粉復測樣品色譜圖

3.7 實驗結果分析

通過平行實驗、加標回收實驗、復測實驗對不合格樣品進行檢測和再次確認，結果都表明不合格小麥粉中含有過氧化苯甲酰。根據復測數據及過氧化苯甲酰計算公式可得，不合格小麥粉樣品中過氧化苯甲酰的含量為0.032g/kg，故確定該小麥粉為不合格產品。

3.8 實驗的精密度

依據GB/T 22325—2008中對精密度的要求，重復性是在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過重復性限（r），再現性是再現性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過再現性限（R）。該標準規定，標準中重復性和再現性公式的適用范圍是小麥粉中過氧化苯甲酰的含量在0.00～0.20mg/kg時，而實驗測定的不合格小麥粉中的過氧化苯甲酰的含量為32mg/kg，不在適用范圍內，故無法計算精密度。通過查詢資料，“關于國家標準《小麥粉中過氧化苯甲酰的測定 高效液相色譜法》（GB/T 22325—2008）精密度的問題”[12]中提到兩方面的問題，一是方法的最低檢出限是0.5mg/kg與精密度要求的范圍相互矛盾，采用本法無法檢出0.00～0.20mg/kg范圍；二是當檢測結果超出0.00～0.20mg/kg范圍時，重復性和再現性無法衡量。

參考現行有效且適用于小麥粉的檢測標準，《出口食品中過氧化苯甲酰的測定 高效液相色譜法》（SN/T 3148—2012）只對回收率有所要求，《小麥粉中過氧化苯甲酰的測定 液相色譜法》（DB22/T 384—2004）中對精密度的要求是兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%，《小麥粉中過氧化苯甲酰的測定方法》（GB/T 18415—2001）中對精密度的要求是雙試驗測定值的相對偏差不得大于15%。

上述方法與GB/T 22325—2008的共同點都是利用不同還原劑將過氧化苯甲酰還原為苯甲酸，再利用高效液相色譜法進行測定。因此，該方法的精密度參考上述檢測標準進行計算如下。

精密度：在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。實驗的精密度為符合精密度要求，實驗結果準確可靠。

4 結論與討論

2019年，本研究對陜西省咸陽市3個市縣27家面粉廠的30批次小麥粉進行抽檢，并對小麥粉中的過氧化苯甲酰含量進行檢測。得出統計結果，30批次小麥粉中合格29批次、不合格1批次，合格率為96.67%。檢測中，通過平行實驗、加標回收實驗、復測實驗對不合格產品進行了檢測和再次確認，結果均表明不合格小麥粉中含有過氧化苯甲酰，含量為0.032g/kg。

通過分析，小麥粉中含有過氧化苯甲?？赡苡袃煞矫嬖颍阂环矫?，企業在小麥粉生產過程中直接使用了過氧化苯甲酰；另一方面，企業在小麥粉生產過程中使用的小麥粉添加劑中含有過氧化苯甲酰，再由添加劑帶入小麥粉中。因此，企業在小麥粉生產過程中不僅要做到不使用過氧化苯甲酰，還要在購買小麥粉添加劑時仔細查看其配料成分是否正規合法。通過對咸陽市3個市縣的小麥粉生產企業進行監督抽檢，有效了解了小麥粉生產的安全狀況，為3個市縣的監管部門提供了可靠的依據。