李新正 邢啟銀 韓占兵
番鴨又稱瘤頭鴨、麝香鴨、鴛鴦鴨,屬雁形目、鴨科、棲鴨屬鳥類,原產地在南美洲和中美洲的熱帶雨林,馴化后被引入世界各地。番鴨在我國已有300多年的飼養歷史,福建和臺灣地區是傳統的番鴨養殖區域,目前已經逐步引入我國北方各省。在2020年農業農村部公布的《國家畜禽遺傳資源目錄》中,番鴨被列為特種畜禽,按照《中華人民共和國畜牧法》管理。目前我國番鴨養殖以中小養殖戶為主,管理粗放,飼養環境條件差,場地消毒不嚴格,導致番鴨副黏病毒病、番鴨細小病毒病、鴨疫里默氏桿菌病(傳染性漿膜炎)、禽霍亂時有發生,甚至暴發禽流感,嚴重影響到養殖戶的經濟效益。2020年6月,河南省新密市一番鴨養殖場70日齡留種番鴨發病,出現大群采食量下降、個別精神差、有扭頭等神經癥狀,發病后每天死亡率1%左右。養殖戶帶有癥狀的病鴨和病死鴨來河南牧業經濟學院禽病實驗室就診,經病理剖檢、實驗室診斷,檢測結果為副黏病毒和鴨疫里默氏桿菌混合感染,檢測過程和治療情況介紹如下:
一、發病情況
該養殖戶從外地購進60日齡種番鴨3 000只,引入5天后個別番鴨出現精神沉郁、羽毛松亂、食欲減少、排黃白色稀便,隨著病情發展出現食欲廢絕,排黃色、暗紅色、綠色或墨綠色水樣糞便,70日齡時病情加重前來就診。觀察患病鴨,兩腿發軟、不愿運動,離群呆立、愛蹲伏,強行驅趕時行動蹣跚。后期嚴重患鴨出現陣發性扭頭轉圈和頭向后仰等神經癥狀,部分病鴨出現甩頭、咳嗽,并伴隨呼嚕而發出啰音。發病早期每天死亡10多只,來診時每天死亡已達到30多只。
二、剖檢病變
剖檢可見肝臟腫大,在肝外膜上附著一層黃白色纖維蛋白滲出物,去掉被膜,肝質地發硬,表面有數量不等、大小不一的灰黃色壞死灶;脾臟腫大1~2倍,表面布滿粟粒或芝麻大小、灰白色的壞死灶;心包腔內積有黃白色纖維蛋白滲出物,使心包和心壁粘連;氣囊增厚,在氣囊上有黃白色纖維素性滲出物;胰臟腫脹出血,表面有灰白色光滑的壞死點;腸道漿膜出血,剖開腸腔在十二指腸、回腸、空腸可見散在性、大小不一的出血和局灶性壞死。剖開痂皮后可見出血或潰瘍灶,腺胃黏膜與肌胃角質層下出血。
三、實驗室診斷
1. 細菌分離鑒定
在無菌條件下采集發病番鴨的肝臟、脾臟,分別劃線接種于普通營養瓊脂培養基和血液瓊脂培養基上,在37℃條件下分別培養于普通培養箱和5%二氧化碳培養箱。從生長良好的培養基中將單個菌落進一步純化培養,然后進行革蘭氏染色鑒定。
2. 病毒分離鑒定
①病料采集與處理
采集早期死亡和癥狀典型的病鴨的腦組織,將病料研磨成漿,加入無菌PBS液制成1∶5懸液,按每毫升加入青霉素、鏈霉素各2 000單位,反復凍融3次,再按3 000轉/分鐘離心30分鐘,吸取上清液,用除菌過濾器除菌。
②分離病毒
選用10~11日齡SPF雞胚30枚,雞胚尿囊腔接種上述上清液0.2毫升,在37.8℃條件下繼續孵化,每天照蛋4次,廢棄24小時內死亡雞胚,將24~72小時內死亡雞胚冷藏后收集尿囊液,同時剖解觀察胚體病變。
③病毒鑒定
a.檢測血凝性及血凝抑制試驗 檢測24~72小時內死亡雞胚尿囊液的血凝活性,如能凝集1%雞紅細胞,判斷存在副黏病毒或禽流感病毒。然后分別選擇副黏病毒陽性血清、禽流感H9N2陽性血清、H5N1(Re-11,Re-12)陽性血清和H7N9(Re-2)陽性血清,分別進行血凝抑制試驗。倘若已知陽性血清(抗血清)能抑制尿囊液被檢病毒的血凝活性,且不被已知陰性血清所抑制,即可確定病毒種類。
b.動物回歸試驗 選擇健康未免疫、易感的20日齡雛番鴨,用上述分離尿囊液每只鴨皮下注射0.2 毫升。飼養1周,觀察是否出現發病、死亡病例,且與自然死亡病例具有同樣典型病變特征。
四、試驗結果
1. 細菌分離鑒定結果
經過細菌分離,該菌不能在普通營養瓊脂培養基中生長,能在血液瓊脂培養基生長,而且在5%二氧化碳培養箱中生長旺盛、菌落更大。菌落形態為凸起、邊緣整齊、半透明、有光澤的奶油狀光滑菌落,無溶血現象,純化培養后的細菌經革蘭氏染色鏡檢為革蘭氏陰性小桿菌。根據病理剖檢變化、培養特性及鏡檢結果診斷為鴨疫里默氏桿菌感染。
2. 雞胚接種后死胚病變觀察
雞胚接種后28~72小時,出現雞胚死亡,死亡的胚體全身出血發紅。
3. 病毒血凝特性與血凝抑制試驗
收集尿囊液做血凝試驗,結果顯示該病毒能凝集1%雞紅細胞,判斷有副黏病毒或禽流感病毒感染。進一步鑒定病毒,用副黏病毒陽性血清、禽流感H9N2陽性血清、H5N1(Re-11,Re-12)陽性血清、H7N9(Re-2)陽性血清分別做血凝抑制試驗。結果顯示,只有副黏病毒陽性血清能抑制該病毒的血凝現象,診斷為副黏病毒感染。
4. 動物回歸試驗
將分離尿囊病毒液采用皮下注射方法攻毒,攻毒后48小時出現副黏病毒臨床癥狀,72小時出現死亡,剖檢癥狀和副黏病毒臨床病例一致。
五、診斷與治療
1. 診斷
根據臨床癥狀、病理剖檢變化和實驗室診斷,最后確診該病例為副黏病毒和鴨疫里默氏桿菌混合感染。
2. 治療
將出現精神沉郁、食欲減少的病鴨進行隔離飼養,淘汰神經癥狀的病鴨。加強場區消毒工作,每天進行2次帶鴨消毒。用抗副黏病毒高免抗體注射,每只鴨4毫升;對嚴重病例第二天再注射1次。氟苯尼考和強力霉素按說明書中的用量飲水服用,中藥清瘟敗毒散拌料飼喂,用藥3天后,大群精神采食恢復正常,不再有新的病例發生。
六、小結
鴨疫里默氏桿菌主要侵害水禽,引起水禽傳染性漿膜炎,是一種急性、敗血性傳染病。國外報道最早發病在鵝上,近些年在番鴨養殖中也時有發生,番鴨養殖戶要引起高度重視。預防該病需要加強飼養管理,減少應激,避免呼吸道有害氣體刺激;養殖場地清除石塊和尖銳異物,防止腳蹼刺傷。本文病例番鴨多采用地面散養,飼養環境條件差,平時不注意消毒,特別是陰雨天地面泥濘,容易導致傳染病的發生,養殖戶應將防控重點放在改善飼養環境上,做好日常環境消毒工作。水禽副黏病毒病是由禽副黏病毒引起的一種病毒性、急性傳染病,其發病率較高,如果養殖戶不進行副黏病毒病的免疫接種工作,該病很容易在水禽場發生,建議種用水禽開產前至少用副黏病毒滅活苗免疫3次。此外,該病例出現的典型傳染性漿膜炎癥狀也與轉群應激有關,養殖戶從外地購進種鴨近1周,因轉群應激導致鴨群抵抗力下降,從而引起副黏病毒和鴨疫里莫氏桿菌病混合感染。
(作者聯系地址:河南牧業經濟學院 郵編:450046)