ELISA技術(shù)在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用進(jìn)展

賈麗萍

（山西省忻州市動物疫病預(yù)防控制中心山西忻州 034000）

目前，ELISA檢測技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)上具有廣泛的應(yīng)用，不但可以用于測定血清中的抗原，還可以有效準(zhǔn)確檢測出血清中的抗體含量，ELISA檢測技術(shù)需要具備3個試驗(yàn)用劑，包括固相的抗體或者抗原、酶標(biāo)記的抗體或者抗原以及酶的作用底物。目前ELISA檢測技術(shù)通過發(fā)展有以下幾種常見的方法類型，例如雙抗體夾心ELISA檢測技術(shù)、雙位點(diǎn)一步ELISA檢測技術(shù)、間接法ELISA抗體檢測技術(shù)以及競爭ELISA檢測法和捕獲ELISA檢測法等。在畜牧養(yǎng)殖行業(yè)中ELISA檢測技術(shù)已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，主要用于飼料品質(zhì)安全的檢測、畜禽免疫抗體水平的評估、畜禽動物疫病的鑒定診斷以及畜禽飼養(yǎng)環(huán)境污染的控制等方面。本文將對ELISA檢測技術(shù)在畜牧養(yǎng)殖行業(yè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展進(jìn)行介紹，以期為畜牧養(yǎng)殖行業(yè)的科學(xué)發(fā)展帶來幫助。

1 ELISA檢測技術(shù)的原理

ELISA檢測技術(shù)的原理包括3個方面，首先需要保障抗原或者抗體吸附于固相載體的表面，同時保持抗原或者抗體的免疫活性；其次是需要保障抗原或者抗體與酶可以相連接形成酶復(fù)合物，所連接形成的酶復(fù)合物同樣具有良好的免疫活性以及酶活性；最后是所連接形成的酶復(fù)合物與待測的抗原或者抗體進(jìn)行反應(yīng)結(jié)合后，通過加入酶反應(yīng)底物出現(xiàn)顏色變化與否來判斷是否出現(xiàn)免疫反應(yīng)，通過讀取反應(yīng)顏色的變化程度以及標(biāo)準(zhǔn)樣品中抗原或者抗體的比例來確定待檢樣品中檢測物質(zhì)的含量，得到試驗(yàn)數(shù)據(jù)性結(jié)果。ELISA檢測技術(shù)是一種具有高度靈敏性以及特異性的檢測方法，與經(jīng)典的抗原抗體檢測方法相比，ELISA檢測技術(shù)的準(zhǔn)確性更高，同時試驗(yàn)操作更為迅速快捷，可以同時檢測大批量待測樣品，既節(jié)約時間又有效的節(jié)約成本[1]。

2 ELISA檢測技術(shù)在畜牧養(yǎng)殖中飼料品質(zhì)檢測的應(yīng)用

ELISA檢測技術(shù)在畜牧養(yǎng)殖中飼料品質(zhì)檢測的應(yīng)用主要是對于飼料中農(nóng)藥、霉菌毒素等有毒有害物質(zhì)的殘留以及畜禽產(chǎn)品中藥物殘留的檢測。畜禽飼料中農(nóng)藥和霉菌毒素等有毒有害物質(zhì)的殘留會導(dǎo)致畜禽肉產(chǎn)品中出現(xiàn)藥物殘留，進(jìn)而危害廣大消費(fèi)者的身體健康，對于飼料以及畜禽產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)的檢測技術(shù)就顯得尤為重要了。現(xiàn)階段通過ELISA檢測技術(shù)可以準(zhǔn)確檢測出牛奶中的抗生素殘留，包括慶大霉素、賽拉霉素、卡那霉素以及新霉素的殘留含量，還可以有效檢測出畜產(chǎn)品中乙炔雌二醇、甲基睪酮以及去甲基睪酮等激素類物質(zhì)[2]。基于單克隆抗體技術(shù)在ELISA檢測技術(shù)中的應(yīng)用，有研究學(xué)者通過使用具有高靈敏度的單克隆抗體ELISA檢測方法可以有效檢測出甲基毒死蜱有機(jī)磷殺蟲劑的殘留量，通過研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用自動化ELISA檢測技術(shù)系統(tǒng)，對于檢測甲基對硫磷農(nóng)藥的敏感度和準(zhǔn)確性更為優(yōu)秀。通過改進(jìn)傳統(tǒng)的ELISA檢測技術(shù)，將有機(jī)磷農(nóng)藥的生物素結(jié)合親和素進(jìn)行酶連免疫吸附試驗(yàn)，其交叉反應(yīng)沒有出現(xiàn)明顯的改變，但是檢測的準(zhǔn)確度以及靈敏性得到了巨大的提高。通過基于單克隆抗體開發(fā)的直接競爭性ELISA檢測技術(shù)可以有效的檢測出畜禽飼料原料中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，同時還可以有效檢出飼料原料中吡蟲啉的殘留量，這種ELISA檢測方法具備準(zhǔn)確度高、可重復(fù)性強(qiáng)以及可以多個樣品同時檢測，成本相對較低以及速度較快的優(yōu)點(diǎn)。現(xiàn)階段ELISA檢測技術(shù)在雞蛋、雞肉、豬肉、漁類產(chǎn)品以及牛奶等畜牧產(chǎn)品中抗生素殘留的檢測研究發(fā)展非常迅速，具有非常大的開發(fā)前景[3]。

3 ELISA檢測技術(shù)在畜牧養(yǎng)殖中疫病的診斷

畜禽養(yǎng)殖過程中的疫病問題是限制畜禽健康狀況和生產(chǎn)性能的重大阻礙，給畜禽養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展以及養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。畜禽養(yǎng)殖過程中疫病的科學(xué)防控和診斷對于畜禽疫病的預(yù)防和治療具有關(guān)鍵的作用，尤其是重大動物疫病免疫抗體水平評估和傳染性疫病的檢測工作，只有提前進(jìn)行科學(xué)準(zhǔn)確的免疫和抗體水平評估以及及早畜禽疫病診斷才能得到有效的控制。ELISA檢測技術(shù)在畜禽養(yǎng)殖中的免疫程序制定、免疫防疫、疫病診斷方面的應(yīng)用對于改善疫病防控和診斷的準(zhǔn)確性和時效性發(fā)揮了良好的作用，例如常見的對于豬偽狂犬病免疫抗體和野毒感染抗體檢測、牛病毒性腹瀉病毒的ELISA檢測具備高度的敏感性以及操作簡便、反應(yīng)迅速的特點(diǎn)，在豬、牛養(yǎng)殖過程中對于豬偽狂犬病和牛病毒性腹瀉的早期防治起到了關(guān)鍵的作用。在畜牧養(yǎng)殖中口蹄疫疫病是常見的傳染性疫病，通過利用標(biāo)記非結(jié)構(gòu)性蛋白3ABC融合蛋白作為抗原，通過ELISA檢測技術(shù)可以有效檢測出不同動物血清中3ABC非結(jié)構(gòu)蛋白抗體，對于畜禽養(yǎng)殖中口蹄疫疫病的凈化工作具有重大意義。同時ELISA檢測技術(shù)在牛白血病病毒、畜禽線蟲感染疫病、布魯氏菌感染、淋巴結(jié)炎癥等疫病的診斷方面均有良好的效果[4]。

4 ELISA檢測技術(shù)在畜禽養(yǎng)殖中環(huán)境污染控制的應(yīng)用

畜禽養(yǎng)殖過程中環(huán)境條件對于畜禽養(yǎng)殖的健康水平具有重大影響，良好的飼養(yǎng)環(huán)境可以有效改善畜禽的生產(chǎn)性能。畜禽養(yǎng)殖環(huán)境中飲水的衛(wèi)生、空氣質(zhì)量以及圈舍的清潔程度均是環(huán)境質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)，研究發(fā)現(xiàn)通過直接競爭性ELISA檢測技術(shù)可以科學(xué)的檢測水樣以及空氣中殘留的有毒有害物質(zhì)，同時具有檢測迅速、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。通過間接競爭性ELISA檢測技術(shù)可以科學(xué)的檢測飼養(yǎng)中水體、土壤以及飼料中有毒有害物質(zhì)的殘留量，包括水體中溴苯腈的檢測等。同時通過ELISA檢測技術(shù)可以有效的檢測土壤中的農(nóng)藥殘留含量，保障畜禽養(yǎng)殖環(huán)境品質(zhì)優(yōu)良[5]。

5 結(jié)束語

ELISA檢測技術(shù)在畜禽養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的廣泛應(yīng)用對于畜禽養(yǎng)殖疫病的防控和診斷具有關(guān)鍵的作用，豬偽狂犬病的凈化監(jiān)測技術(shù)以ELISA檢測技術(shù)為主要監(jiān)測技術(shù)，國家強(qiáng)制免疫畜禽疫病的免疫效果評價及抗病能力的評估都以ELISA檢測技術(shù)為主要評估技術(shù)，同時ELISA檢測技術(shù)具有操作簡單、靈敏性和特異性良好、檢測樣品數(shù)量多的優(yōu)點(diǎn)，在畜牧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用具有廣闊的前景。