老年2型糖尿病患者下肢血管病變和血清維生素E水平的關系

高佳 羅鑭

[摘要] 目的 探討老年2型糖尿病患者的血清維生素E水平與其下肢血管病變的關系。方法 選擇2017年2月—2018年6月該院收治的170例2型糖尿病患者，其中130例T2DM患者以及對照組40例。根據彩色多普勒超聲結果，將T2DM患者分為單純T2DM不合并下肢血管病變組40例，以及T2DM合并下肢血管病變組90例（再分為輕度、中度、重度3個亞組）。采用高效液相色譜法（HPLC）測定血清中維生素E水平。結果 ①T2DM伴下肢血管病變組的血清維生素E水平顯著低于單純T2DM無下肢血管病變組及非T2DM對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。單純T2DM無下肢血管病變組的血清維生素E水平也低于非T2DM對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。②T2DM伴下肢血管病變組中3個亞組相比，重度病變組血清維生素E水平低于中度組和輕度組， 中度組維生素E水平低于輕度組，差異有統計學意義（P<0.05）。③T2DM組血清維生素E水平與hs-CRP呈負相關。 結論 老年T2DM患者的血清維生素E水平下降，hs-CRP升高，其幅度與T2DM合并下肢血管病變的程度相關。血清維生素E水平降低可能是T2DM下肢血管病變發生和發展的因素。

[關鍵詞] 老年;2型糖尿病;下肢血管病變;血清維生素E

[中圖分類號] R587.1? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1672-4062（2020）10（a）-0034-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between serum vitamin E level in elderly patients with type 2 diabetes and the vascular disease of the lower extremities. Methods Selected 170 cases patients with type 2 diabetes admitted to the hospital from February 2017 to June 2018， including 130 cases patients with T2DM and 40 cases patients in the control group. According to the results of color Doppler ultrasound， patients with T2DM were divided into T2DM alone without lower extremity vascular disease group of 40 cases， and T2DM combined with lower extremity vascular disease group of 90 cases （subdivided into three subgroups of mild， moderate， and severe）. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to determine the level of vitamin E in serum. Results 1.The serum vitamin E level of the T2DM group with lower extremity vascular disease was significantly lower than that of the T2DM group without lower extremity vascular disease and the non-T2DM control group， the difference was statistically significant（P<0.05）. The serum vitamin E level of the T2DM group without lower limb vascular disease was also lower than that of the non-T2DM control group， the difference was statistically significant（P<0.05）. 2.Compared with the three subgroups in the T2DM with lower extremity vascular disease group， the serum vitamin E level of the severe disease group was lower than the moderate group and the mild group， and the vitamin E level of the moderate group was lower than the mild group. 3.Serum vitamin E level in T2DM group was negatively correlated with hs-CRP， the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The serum vitamin E level of elderly patients with T2DM decreased， and the hs-CRP increased， the magnitude of which was related to the degree of T2DM combined with lower extremity vascular disease. Decreased serum vitamin E level may be a factor in the occurrence and development of T2DM lower limb vascular disease.

[Key words] Elderly; Type 2 diabetes; Lower limb vascular disease; Serum vitamin E

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）并發癥很多，危害很大，下肢血管病變的危害尤其嚴重，糖尿病足大多不可逆，該類患者很可能因為大血管病變而致殘，是截肢的主要原因，嚴重威脅著2型糖尿病患者的生活質量。研究表明，血糖的控制并沒有顯著減少2型糖尿病慢性并發癥的發生率，除了血液中的葡萄糖，還有其他因素，對此起到了一定的影響作用[1]。2型糖尿病下肢血管病變的病理基礎是動脈粥樣硬化。動脈粥樣硬化產生的可能的機制是損傷反應學說。該學說認為，動脈粥樣硬化是一種由多種細胞因子釋放而引起的慢性炎癥性疾病[2]。近來研究發現，2型糖尿病及其大血管的AS均屬慢性炎癥性病變[3]。近來的研究顯示，高敏C反應蛋白（hypersensitivity C reactive protein，hs-CRP）與動脈粥樣硬化及其進展存在緊密關聯[4-5]，且對大血管病變的發生起到了一定的促進作用[6]。該研究對2017年2月—2018年6月在該院收治170例的2型糖尿病患者進行下肢動脈血管的B超檢查，并對血清中維生素E及hs-CRP的水平進行檢測，從而探討老年2型糖尿病患者下肢血管病變和血清維生素E及hs-CRP水平的關系，為2型糖尿病及其大血管病變的預防和治療提供新的思路，現報道如下。

1? 對象與方法

1.1? 研究對象

該研究的患者為該院收治的2型糖尿病患者，共選取了200例患者作為研究對象，由于缺乏理解或依從性差而導致30例被試者中途退出，剩余170例研究對象，其中130例2型糖尿病患者，40例對照組（NC組）。

納入標準：為排除血壓對血清維生素E的影響，選擇的各組研究對象血壓水平正常。排除標準：伴隨有其他下肢血管疾病、風濕類疾病、感染、肝腎功能異常、惡性腫瘤、6個月內有手術、外傷史、腦卒中。

2型糖尿病組：該研究選擇了130例2型糖尿病患者作為研究對象，診斷依據按照1999年WHO的診斷和分型標準：①2型糖尿病癥狀加任意時間血漿葡萄糖水平≥11.1 mmol/L（200 mg/dL）;②空腹血漿葡萄糖≥7.0 mmol/L（126 mg/dL）;③口服葡萄糖耐量試驗中，2 h葡萄糖水平≥11.1 mmol/L（200 mg/dL）。

患者中男女分別為70例和60例，患者的年齡為70～90歲，病程5～15年。

將全部2型糖尿病患者依據有無下肢血管病變而劃分為單純2型糖尿病組（A組）和合并下肢血管病變組（B組），兩組分別為40例和90例。

對照組（NC組）：為該院收治的2型糖尿病患者，此組中男女分別為22例和18例，年齡為75～94歲，病程5～14年。

告知研究對象相關實驗情況，得到患者及家屬同意，且簽署知情同意書，該研究經倫理委員會同意。

1.2? 方法

一般檢查。入選患者均被了解基本信息、相關病情信息和生活習慣等，對患者的身高、體重進行檢測，且計算出吸煙率、體重指數。吸煙率=吸煙人數/總人數。體質指數（body mass index，BMI）=體重/身高2（kg/m2）。

對所有患者的下肢動脈形態和血流狀況進行彩超檢查。按照下肢血管超聲檢查的結果分4種，根據嚴重程度標準評分如下：①內膜中層厚度：不厚（<1 mm）0分;輕度增厚（1～1.2 mm）1分;中重度增厚（>1.2 mm）2分。②硬化程度：沒有硬化0分;輕度硬化1分;中重度硬化癥（檢測到很強的回聲）2分。③斑塊：沒有斑塊0分;有一個斑塊1分;有很多斑塊2分;彌漫性分布3分。④狹窄：正常0分;輕度狹窄1分;中重度狹窄（狹窄50%～75%）2分;閉塞（無血流量）3分。疾病的嚴重程度的評分：0分為正常;低于10分的為輕度;10～19分為中度;高于19分的為重度。

根據超聲檢查結果對患者如下分組：①A組（單純2型糖尿病組）：超聲檢查下肢血管未發現以上異常，則評0分;②B組（2型糖尿病并發下肢血管病變組）：超聲檢查發現以上4種病變之一。進一步依據超聲檢查結果而分為3個亞組：<10分為輕度組、10～19分為中度組、高于19分為重度組。

實驗室檢查：標本的采集：所有受試者采血的前一天接受正常飲食，晚上22：00開始禁食，次日清晨8：00空腹抽靜脈血。

血清維生素E測定、藥品、試劑與儀器、維生素E、甲醇，蒸餾水，無水乙醇，對全部試劑經過微孔濾膜過濾處理。

高效液相色譜儀（Aglient1200SL）包括：脫氣機（G13692A）、自動進樣器（ALS SL，G1329B）、泵（Bin Pump SL，G1312B）、柱溫箱（TCC SL，G1486B）、紫外檢測器（VWD SL，G1339C）;真空干燥機（DZF-250）;旋渦振蕩器（新康醫療器械 XK96-A）;離心機（菲恰爾 TDL-513）;HP8453型分光光度計（欣康醫藥公司）。

色譜條件：依利特RP18色譜柱（3.9 mm×250 mm，5 μm），柱溫：30℃; 流速：1.2 mL/min;流動相：甲醇：水（95：5）;檢測波長：在7.01～12 min采用280 nm波長、在0～7 min在325 nm波長條件下測定;進樣量：10 μL。

血漿樣品的處理方法：量取200 μL血漿加入3.5 mg/L內部標準溶液20 μL和200 μL水溶液渦旋攪拌0.5 min，5 000 r/min離心10 min，加入400 μL無水乙醇和800 μL正己烷于溶液后將混合物渦旋攪拌3 min，殘渣用100 μL甲醇溶解，10 000 r/min離心5 min，吸取正己烷層400 μL加入1 mL EP管中，45℃真空蒸干，吸取上清液20 μL進樣。在整個操作過程中避免光照。

1.3? 統計方法

采用SPSS 22.0統計學軟件處理數據，組間差異進行t檢驗，計量數據以（x±s）表示;計數數據行χ2檢驗以頻數和百分比（%）表示。對正態分布的維生素E水平及hs-CRP水平之間的關系進行Pearson相關性分析，其余非正態分布的臨床指標之間進行Spearman相關性分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1? 對照組與2型糖尿病各組間臨床指標比較

與對照組相比，兩個病變組患者的維生素E表達量顯著下降，差異有統計學意義（P<0.05），FBG、HbA1C、TC等指標則顯著升高，差異有統計學意義（P<0.05）;和對照組相比，合并組患者的相關年齡、吸煙量、FIB、血清hs-CRP等指標都明顯更高，差異有統計學意義（P<0.05）;合并組的年齡、吸煙量、血清hs-CRP均明顯高于單純2型糖尿病組，差異有統計學意義（P<0.05），維生素E水平則低于后者，差異有統計學意義（P<0.05）。

將年齡、病程、吸煙、作為協變量進行協方差分析，取出上述因素后，3組間的血清維生素E及hs-CRP也同樣，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2? 合并下肢血管病變患者3個亞組及對照組各臨床指標比較

合并有下肢血管病變組中3個亞組患者的年齡、TC和血清hs-CRP均明顯高于對照組（P<0.01），血清維生素E均明顯低于對照組，差異有統計學意義（P<0.01）。輕度組和中度組的FIB以及輕度組的BMI、TG等相關指標都顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。相比輕度組，中重組吸煙量和血清hs-CRP均顯著升高，差異有統計學意義（P<0.05），血清維生素E均顯著下降，差異有統計學意義（P<0.05）;重度組年齡、吸煙量和血清hs-CRP均明顯高于中度組，差異有統計學意義（P<0.01），血清維生素E明顯低于中度組，差異有統計學意義（P<0.01）;重度組的年齡和病程指標都明顯高于輕度組，差異有統計學意義（P<0.05），而中度組和輕度組間，差異無統計學意義（P>0.05）。

將年齡、病程、吸煙量、BMI、FBG、HbA1c、TC、TG、FIB、ALB/Cr作為協變量進行協方差分析，消除以上因素影響后，血清維生素E及hs-CRP在各組間差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3? 下肢血管病變的危險因素之間的相關性比較

對維生素E水平及hs-CRP水平之間的關系進行Pearson相關性分析，其他臨床指標進行Spearman相關性分析，差異有統計學意義（P<0.05），見表3。

分析下肢血管病變的危險因素之間的相關性，所得結果表明：下肢血管病變水平和患者年齡（r=0.433，P<0.01）、病程（r=0.295，P<0.01）、吸煙量（r=0.622，P<0.01、FIB（r=0.264，P<0.05）、CRP（r=0.417，P<0.01）呈正相關;與維生素E（r=-0.555，P<0.01）呈負相關，和其他因素無影響關系。

全部患者維生素E、hs-CRP和其他指標的相關性檢測結果表明：血清維生素E水平和患者年齡（r=-0.338，P<0.01）、FIB（r=-0.332，P<0.01）、CRP（r=-0.380，P<0.01）等存在負相關關系，與其它因素無影響關系;血清hs-CRP水平與年齡（r=0.379，P<0.01）、FIB（r=0.275，P<0.01）、ALB/Cr（r=0.187，P<0.05）呈正相關，而和其他的因素則無相關性。

將不相關的因素予以排除，接著進行偏相關分析，所得結果表明，下肢血管病變的主要影響因素為年齡（r=0.344，P<0.01）、吸煙量（r=0.675，P<0.01）、hs-CRP（r=0.399，P<0.01）、維生素E（r=-0.534，P<0.01）。維生素E與hs-CRP的偏相關系數為-0.402（P<0.05）。

3? 討論

該研究的結果顯示，無論是否合并下肢血管疾病，2型糖尿病組的維生素E水平均顯著低于對照組（P<0.05）。血管病變程度和血清維生素E水平之間也存在一定相關性，前者越嚴重，后者下降越顯著。從而得出血清維生素E的降低可能與2型糖尿病患者下肢血管疾病的發生發展有關系。2型糖尿病患者血清維生素E水平是低于健康人的。高血糖導致氧化應激反應的加強是其可能的原因，從而降低維生素E。低水平的維生素E可能加重中老年2型糖尿病患者的氧化應激水平。

該研究結果表明，和對照組以及單純病變組相比，2型糖尿病下肢血管病變患者的血清維生素E水平更低，血清維生素E水平與下肢血管病變的嚴重程度是呈負相關的。2型糖尿病患者很可能由于血流異常，糖代謝失常等因素的影響而出現內皮損傷，進一步誘導細胞活化，從而導致維生素E分泌減少，IV型膠原多肽鏈結構最豐富的血管壁細胞外基質破壞，從而導致血管壁損傷。AS是2型糖尿病大血管病變的主要病理基礎。維生素E通過抗氧化作用改善2型糖尿病患者的氧化應激水平。維生素E在改善脂質過氧化、抑制晚期糖基化終產物生成、保護DNA免受氧化損傷等方面起重要作用。因此，維生素E可能是減緩動脈粥樣硬化進展和穩定不穩定斑塊的一個因素。合并AS的2型糖尿病患者維生素E含量較低，發生嚴重心腦血管并發癥的危險性較高。

該研究中的相關分析表明，下肢血管病變的程度與年齡、2型糖尿病病程、吸煙量、FIB與hs-CRP呈正相關，與維生素E呈負相關，這表明延緩2型糖尿病大血管病變的方法可以是戒煙、用藥物抑制血管炎癥、降低FIB等。研究維生素E和hs-CRP與2型糖尿病大血管病變的關系，可以為尋找更有效的早期診斷提供新的途徑。補充維生素E也可能是主要的2型糖尿病血管病變的預防和治療的一個有利的措施。然而，由于這項研究是一項橫斷面研究，因此，補充維生素E是否能預防或延緩2型糖尿病的進展，仍有待進一步研究明確。

該研究的創新性在于，以前有關于維生素E水平與2型糖尿病血管病變的研究，大部分都是動物研究[7-10]，人體研究較少，該研究不僅僅選取人為研究對象，而且隨著社會老齡化加劇，老年人越來越多，該實驗人群選用老年人，此為該研究之創新點。

2型糖尿病下肢動脈粥樣硬化是多種因素相互影響、相互促進的結果。目前，該研究已有的理論知識還不能完全解釋2型糖尿病患者下肢動脈硬化的確切機制。因此，影響下肢動脈硬化的因素及治療仍需進一步研究。

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（收稿日期：2020-07-01）