廣東省水產飼料中真菌毒素的地域和季節性分布特征

陳明山 曹濤 楊曉夏 林燕翠 畢思遠

摘要：選擇湛江、珠海、汕頭、汕尾、韶關5個代表性區域，從2019年4月至2020年3月每月采樣1次采集樣本，每個樣本量為300～500 g，總共采集120份樣本，獲得廣東省代表性區域不同季節的水產飼料中真菌毒素的種類及產毒情況，探明了不同環境和不同基質條件下水產飼料中高發真菌毒素種類，為水產養殖人員和質量監控人員提供方向性參考依據。

關鍵詞：水產飼料;真菌毒素;地域;季節;分布特征

中圖分類號：S963? ? 文獻標識碼：A

目前國際社會越來越重視真菌毒素對動物及人類的危害，早在1995年國際食品法典委員會就已經制定了《食品和飼料中污染物和毒素通用準則》，歐盟在2005年發布了黃曲霉毒素的指導文件[1]。國際標準化組織（International Organization for Standardization，ISO）、國際分析化學協會（Association of Official Agricultural Chemists，AOAC）及歐洲標準化委員會（European Committee for Standardization，CEN）都相繼制定了一系列真菌毒素的限量和檢測方法標準。我國也已經對食品和飼料中真菌毒素制定了一些相關標準，但總體上講，與發達國家相比在研究水平上還存在差距，安全限量不夠完善，監控盲區還較多[2]。尤其是對于毒素易高發且水產品市場龐大的南方地區，水產飼料中真菌毒素污染現狀的認知缺乏，監控管理目標不明確。有專家認為為確保我國農產品及飼料安全，應當每隔2～3年進行一次全國范圍的真菌毒素污染狀況的普查，制定符合我國安全要求的真菌毒素限量標準[3]。

廣東作為我國飼料第一大省，連續14年來產量穩居榜首。2018年全國水產飼料2202.9萬噸，廣東省水產飼料總產量約為531萬噸[4，5]。從分區域飼料產量來看，珠三角是廣東飼料產量最大的區域，占比高達60%以上，其次是粵西，粵北和粵東。調查廣東省水產飼料中真菌毒素污染情況可為廣東省水產飼料中真菌毒素的防控提供方向性依據[6]。根據廣東省水產飼料生產及養殖區域特點，本實驗選取2019年4月至2020年3月間廣東省5個代表性地區的水產配合飼料樣品作為研究對象，對其中的黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素M1，嘔吐毒素，T-2毒素，HT-2毒素，赭曲霉毒素A及玉米赤霉烯酮7種真菌毒素進行定性定量分析[7，8]。

1? 樣本采集與保存

在廣東省水產養殖地和水產飼料主要生產地，按照GB/T 14699.1-2005/ ISO6497：2002《飼料采集》要求采樣。根據廣東省水產飼料生產區域分布特征，選擇湛江、珠海、汕頭、汕尾、韶關5個代表性區域采集樣本（圖1），從 2019年4月至2020年3月每月采樣1次，每個樣本量為300～500 g，總共采集120份樣本，采集樣本在測定前置于-18℃冰箱凍存[9]。

2? 檢測方法

采集樣本用本研究建立的水產飼料中黃曲霉毒素B1、M1，嘔吐毒素，T-2毒素，HT-2毒素，赭曲霉毒素A，玉米赤霉烯酮的液相色譜-串聯質譜同時檢測方法進行檢測，方法詳程見文獻[7]。

3? 結果分析

采集的120份水產配合飼料樣本中黃曲霉毒素B1、M1，嘔吐毒素，T-2毒素，HT-2毒素，赭曲霉毒素A，玉米赤霉烯酮的檢測統計結果中（表1），限量標準參照GB 13078-2017《飼料衛生標準》，其中黃曲霉毒素M1，HT-2毒素在標準中并未規定限量，所以不做判定。T-2毒素標準中只規定了植物性飼料原料及豬、禽配合飼料的限量，并未規定水產配合飼料中的限量，所以也不做判定。所有采集的樣品中黃曲霉毒素B1的檢出率及超標率都是最高的，其次為嘔吐毒素，說明這兩種毒素在廣東省水產飼料中為主要污染毒素種類，尤其是黃曲霉毒素B1，檢出率高達41.7%。陽性樣本中平均含量最高的為嘔吐毒素，其值為982 μg/kg，其次為玉米赤霉烯酮，值為108 μg/kg，但兩者超標率卻并不高，這與標準限值較寬泛有關。T-2毒素及HT-2毒素在此次采集的樣本中檢出率并不高，可見廣東省水產飼料中這兩種毒素污染情況并不算嚴重，但檢出的陽性樣本中其平均值為19.4 μg/kg，僅次于黃曲霉毒素B1的陽性樣本平均值，而養殖水產動物往往體型較禽畜類小，毒素不耐受性可能更高，所以制定水產飼料中的相關限量標準顯得更為重要。在樣本的檢出毒素種類來看，在同個樣本中檢出兩種或兩種以上毒素的樣本占比為28.3%，說明被污染的同種飼料中極可能存在多種真菌毒素同時污染的現象，多種真菌毒素對于養殖動物的協同作用不可忽略，我國限量標準在這方面并未體現。

從5個代表性區域采集的水產飼料中7種真菌毒素的檢出率來看（圖2），7種真菌毒素除了黃曲霉毒素M1，其余6種均在5個代表性地區采集的樣品中不同程度的檢出。汕尾的黃曲霉毒素B1和M1檢出率均最高，其次是湛江，這兩地均為沿海地帶，氣候溫暖潮濕，為黃曲霉毒素產生提供了有利條件。嘔吐毒素檢出率最高的地區為湛江，可能與采集的樣本中植物性原料已被污染有關。T-2毒素檢出率最高的地區為韶關，這可能與當地晝夜溫差及季節性更顯著有關。赭曲霉毒素A的地域性差異并不太顯著。玉米赤霉烯酮檢出率最高地區為珠海。

將采集樣本檢測數據分為四個季度統計結果（圖3）可以看到，大部分毒素檢出率較高時期都為4月到9月，這段時期正值廣東省的梅雨高發季，飼料原料及成本飼料霉變的可能性更大，這就使得飼料中毒素檢出率較高，尤其是黃曲霉毒素，季節性高發較明顯。但并不是所有監測的目標毒素檢出率最高都處于這個時期，如T-2毒素，它的檢出率最高時期為1月到3月，這可能與T-2毒素產生條件較苛刻有關，也可能跟飼料廠家所用原料污染狀況有關。

4? 結論

在所采集的120份廣東省不同地區，不同季節的水產飼料樣本中，7種目標真菌毒素有不同程度的檢出。黃曲霉毒素B1和嘔吐毒素為廣東省水產飼料中真菌毒素污染的主要毒素種類。在檢出的陽性樣本中平均值最高的為嘔吐毒素，其次為玉米赤霉烯酮，但兩者超標率均在5%以下。我國《飼料衛生標準》中缺少水產配合飼料中黃曲霉毒素M1，T-2毒素及HT-2毒素的限量指標。兩種及以上真菌毒素同時檢出率為28.3%，多種真菌毒素對于水產養殖動物的協同作用不可忽略。不同區域檢出率最高的毒素種類有差異，這與當地氣候和飼料用原料情況可能均相關[10]。從不同季度統計結果來看，廣東省梅雨季節飼料中真菌毒素污染情況較其它月份更為嚴重[11]。無論是飼料生產企業在飼料用原料的品質監控上還是水產養殖戶在飼料買回后投喂前的儲藏階段，在這個時期對于飼料霉變情況及其中真菌毒素污染情況都需更加謹慎[12]。

參考文獻

[1] 孫偉. 霉菌毒素-飼料領域的一大問題[J]. 國外畜牧學（豬與禽）. 2009，29（5）：30-33.

[2] 陳云良. 糧食中真菌毒素檢測技術研究進展[J]. 食品安全導刊. 2016，（12）：52.

[3] Marin S， Ramos AJ， Cano-Sancho G， et al. Mycotoxins： occurrence，? toxicology， and exposure assessment [J]. Food Chem Toxicol， 2013，60：218-237.

[4] http：//longshang. cjyun. org/p/30170. html.

[5] http：//www.feedtrade.com.cn/news/china/ 2019-12-10/2031986. html.

[6] 畢思遠，王雅玲，王小博，等. 水產飼料中真菌毒素污染現狀及風險分析[J]. 安徽農業科學， 2017，45（21）：92-95+98.

[7] 施琦，楊嘉麗，王雅玲，等. 液相色譜-串聯質譜法測定蝦飼料中的7種真菌毒素[J]. 分析測試學報，2019，3：334-338.

[8] 施琦，劉陽，王雅玲，等. 液相色譜-串聯質譜法檢測對蝦中T-2毒素的不確定度評定[J]. 食品安全質量檢測學報，2016，7（6）：2328-2333.

[9] 王小博，王雅玲，王潤東，等. 我國南粵地區霉變水產飼料真菌毒素污染現狀及毒性評價[J]. 浙江農業學報，2016，28（6）：951-958.

[10] 謝曉鵬，易衛，莊智明，等. 飼料中的霉菌毒素及其防制措施[J]. 中國畜牧獸醫. 2013（5）：101-105.

[11]施琦. T-2毒素的自然發生與降解及其在對蝦中的蓄積規律[D]. 廣東海洋大學：食品質量與安全，2013.

[12] 李雅楠. 論我國食源性動物飼料質量監管制度的完善[D]. 綿陽：西南科技大學，2013.