老年心力衰竭病人血漿腦鈉肽、熱休克蛋白70、過氧化物酶水平變化及其診斷價值

左紅巖，張澤勛，王 磊，于海洋

心力衰竭是臨床上常見的心血管疾病，屬于危重癥之一。心力衰竭是由慢性原發性心肌疾病和長期心室壓力及心室容量負荷過重，導致心肌收縮力減弱而不能維持心排血量，是各種心血管疾病的終末階段[1]。其發病機制尚不明確，但其隨年齡的增長，發病率逐漸升高，已成為21世紀全球流行性疾病，對人類的身體健康和生命安全帶來了巨大的威脅[2]。目前，臨床上通過彩色普勒超聲收集心肌收縮、舒張等相關資料進行判斷，這無疑增加誤診率和漏診率，使病人錯過最佳的治療時間。因此，可通過檢測生化指標，進一步對病人病癥嚴重程度進行評估、分析。血漿腦鈉肽(BNP)主要來源于心室，是一種多肽類激素，是由心室細胞受到牽拉后釋放，具有較強的利鈉、利尿以及抗心肌纖維的作用[3]。熱休克蛋白70(HSP70)也稱為應激蛋白，是一組具有分子結構、生化性質、免疫結構高度保守的蛋白[4]。過氧化物酶(MPO)是由內皮細胞產生，能夠通過促進氧化應激和炎癥反應進而加重心室重構[5]。本研究旨在探討血漿BNP、HSP70、MPO檢測對老年心力衰竭的診斷價值，為心力衰竭臨床診斷提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月—2019年4月在任丘市中醫院治療的老年心力衰竭病人250例，根據病人入院時紐約心臟病協會(NYHA)心功能分級分為Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組。Ⅰ級+Ⅱ級組80例，男43例，女37例；年齡62～78(65.6±3.2)歲；其中有心力衰竭家族史46例，冠心病22例，心肌病10例。Ⅲ級組80例，男40例，女40例；年齡60～77(65.8±3.1)歲；其中有心力衰竭家族史48例，冠心病21例，心肌病11例。Ⅳ級組90例，男45例，女45例；年齡61～77(64.3±2.8)歲；其中有心力衰竭家族史57例，冠心病25例，心肌病10例。選取同時期在我院體檢健康的志愿者100名作為對照組，男50名，女50名；年齡61～72(66.2±2.7)歲；其中有心力衰竭家族史56例。4組研究對象性別、年齡等基本資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入標準 伴有充血性心力衰竭癥狀，并排除心臟瓣膜病、縮窄性心包炎和其他非心臟疾病；左心室收縮功能異常和左心室舒張功能異常等；病人及其家屬簽署知情同意書。

1.3 排除標準 慢性阻塞性肺氣腫；肺心病；肺動脈高壓者；嚴重肝腎功能不全；腫瘤；慢性疾病終末期。

1.4 方法

1.4.1 臨床資料收集 統計4組研究對象的性別、年齡、吸煙、家族史、冠心病、心肌病等臨床資料。

1.4.2 BNP、HSP70、MPO水平檢測 采集研究對象清晨靜脈血，置入一次性的抗凝管中保存，3 000 r/min轉速離心機離心10 min后，分離上清，在-80 ℃冰箱中保存。采用免疫化學發光法對BNP水平進行檢測，采用酶聯免疫吸附法對HSP70、MPO水平進行檢測，具體方法：取50 mmol/L碳酸鹽包緩沖液對HSP70、MPO進行稀釋，且加入聚苯乙烯的反應孔中，加蓋處理后，在4 ℃下放置24 h，次日洗滌3次后，拋干，在每孔中均加入稀釋液(pH值為7.4，0.02 mol/L Tris-HCl緩沖液)稀釋待測標本0.1 mL，加入陽性、陰性對照標本，在42 ℃下放置60 min，將液體移除并洗滌3次后，拋干，在每孔中加入HSP70、MPO抗體0.1 mL，再次置留60 min，將液體移除并洗滌3次，拋干，并在每孔中加入底物液(0.1 mol/L的Na2HPO4，0.05 mol/L的枸櫞酸)混勻，且加入0.1 mL鄰苯二胺，遮光20 min，再次加入2 mol/L的H2SO40.05 mL放置各孔內，終止反應。使用酶標儀檢測A450，分析HSP70、MPO水平。

1.4.3 診斷效能 靈敏度=真陽性例數/(真陽性例數+假陰性例數)×100%；特異度=真陰性例數/(真陰性例數+假陽性例數)×100%；準確率=(真陽性例數+真陰性例數)/總例數×100%。

2 結 果

2.1 4組不同時間點BNP表達水平比較 對照組各時間點BNP表達水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組第1天、第2天、第3天、第5天BNP表達水平逐漸升高，差異有統計學意義(P<0.05)。Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組各時間點BNP表達水平均高于對照組(P<0.05)；Ⅲ級組、Ⅳ級組各時間點BNP表達水平均高于Ⅰ級+Ⅱ級組(P<0.05)；Ⅳ級組各時間點BNP表達水平均高于Ⅲ級組(P<0.05)。詳見表1。

表1 4組不同時間點BNP表達水平比較(±s) 單位：pg/mL

2.2 4組不同時間點HSP70水平比較 對照組各時間點HSP70表達水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組第1天、第2天、第3天、第5天HSP70表達水平逐漸升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組各時間點HSP70表達水平均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；Ⅲ級組、Ⅳ級組各時間點HSP70表達水平均高于Ⅰ級+Ⅱ級組，差異均有統計學意義(P<0.05)；Ⅳ級組各時間點HSP70表達水平均高于Ⅲ級組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 4組不同時間點HSP70水平比較(±s) 單位：ng/L

2.3 4組不同時間點MPO水平比較 對照組各時間點MPO表達水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組第1天、第2天、第3天、第5天MPO表達水平逐漸升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組各時間點MPO表達水平均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；Ⅲ級組、Ⅳ級組各時間點MPO表達水平均高于Ⅰ級+Ⅱ級組，差異均有統計學意義(P<0.05)；Ⅳ級組各時間點MPO表達水平均高于Ⅲ級組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 4組不同時間點MPO水平比較(±s) 單位：μg/L

2.4 BNP、HSP70、MPO檢測對老年心力衰竭的診斷價值 BNP、HSP70、MPO聯合檢測敏感度、特異度、準確率分別為95.5%、86.0%、93.6%，均高于BNP、HSP70、MPO單項檢測。詳見表4。

表4 BNP、HSP70、MPO檢測對老年心力衰竭的診斷價值 單位：%

3 討 論

慢性心力衰竭是一種發病機制復雜的疾病，主要是以心功能不全、外周血流異常為臨床表現的綜合征，具有并發癥多、病死率高、難以治愈等特點[6]。韋洪弟等[7]研究認為，對于老年性慢性心力衰竭病人應及時對危險因素進行分析并采取相應的預防措施，以期有效降低老年性慢性心力衰竭發病率。慢性心力衰竭的形成主要是由各種功能性疾病導致心室結構改變，致使射血能力受到損害，進而使心臟排血量下降[8]。當各個器官血供缺乏時，機體功能急劇下降，主要表現為疲倦乏力、呼吸困難、體力活動受限等。有研究表明，老年心力衰竭病人的原發病常多種并存，呼吸道感染可加重心力衰竭程度[9]。楊鵬會等[10]研究指出，老年性慢性心力衰竭的預防工作應該重視家庭管控內容(服藥、飲食、運動、宣教以及攝水量等)，從而減少慢性心力衰竭發作次數。

BNP主要用于心力衰竭的診斷，是預后評價的重要標志物，不僅是急慢性心力衰竭診斷的重要指標，而且在心力衰竭病人的預防篩查、預后評估、危險分層中也發揮著重要作用[11]。劉琦等[12]研究表明，血漿pro-BNP和C反應蛋白(CRP)水平明顯升高的老年急性腦梗死急性期病人認知功能更差，預后不佳。BNP對有效篩查、早期發現心力衰竭高風險人群具有重要作用[13]。本研究結果顯示，BNP水平隨著心功能分級的增加而升高，且第1天、第2天、第3天、第5天BNP表達水平逐漸升高。

HSP70是一種非核糖體結合性分子伴侶，它的表達在應激狀態下處于上調狀態，當機體處于高溫狀態下時，能夠通過激活HSP70起到保護作用。劉佼磊等[14]研究指出，血清HSP70、BNP水平與慢性充血性心力衰竭心功能密切相關，隨心力衰竭嚴重程度的增加而升高，且HSP70、BNP之間具有相關性，對心力衰竭的臨床診斷與病情評估具有重要價值。HSP70普遍存在于細胞質、內質網、細胞核等部位，對多種細胞均具有保護作用[15-16]。本研究結果顯示，Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組HSP70水平高于對照組，且隨著時間和心功能分級的增加而升高。

MPO是一種由單位膜包裹的囊泡，主要存在于肝細胞和腎細胞中。MPO能夠催化過氧化氫，促進內皮功能的損傷，加速過氧化反應，參與心血管疾病的進展[17]。劉麗紅等[18]研究表明，MPO檢測可以有效評估慢性心力衰竭的嚴重程度，尤其在輕度慢性心力衰竭的診斷中具有重要意義，為慢性心力衰竭的早期診斷和治療提供依據。有研究表明，血清MPO濃度在老年心力衰竭病人中升高，可能參與心力衰竭的發生、發展過程，MPO的檢測有助于慢性心力衰竭病情的判斷[19]。本研究結果顯示，Ⅰ級+Ⅱ級組、Ⅲ級組、Ⅳ級組MPO水平高于對照組，且隨時間和心功能等級增加而升高，與胡堅等[20]的研究結果一致。生物標志物診斷疾病具有標本易獲取、檢測快捷、對病人產生的創傷小等優點，但單一指標的檢測診斷老年心力衰竭的靈敏度和特異度均較低，準確率不能滿足臨床需求。本研究結果顯示，BNP、HSP70、MPO聯合檢測的敏感度、特異度、準確率均高于單項檢測，說明BNP、HSP70、MPO聯合檢測能提高對老年心力衰竭的診斷效能。

綜上所述，老年心力衰竭中BNP、HSP70、MPO水平升高，BNP、HSP70、MPO聯合檢驗診斷價值較高，對臨床上老年心力衰竭的診治具有重要意義。