腦脊液細胞形態學檢驗中國專家共識（2020）

許紹強,周道銀,吳 茅,張時民,黃道連,樊愛琳,段愛軍

君安醫學細胞平臺專家委員會 組 稿 閆立志 執 筆

參加共識討論的專家（按姓氏拼音排序）：

柏世玉1， 曹 科2， 竇心靈3， 丁邦勝4， 段愛軍5， 樊愛琳6， 高菊興7， 顧劍飛8， 高建軍9， 高海燕10，何 勇11，黃 俊12，黃道連13，胡 晶14，蔣錦文15，金 鑫16，盧興國17，李相磊18，劉超群19，梁 勤20，林慧君21，繆 峰22，潘 巍23，茹進偉24，孫宏華25，吳 茅26，王敏敏27，王 哲28，許紹強29，夏萬寶30，邢銘芬31，許銀懷32，岳保紅33，閆立志34，張軍格35，張時民36，張建富37，張春瑩38，曾強武39，趙成艷40，朱鳳嬌41，莊順紅42，周玉利43，周道銀44，周 麟45，鄭智弦46，鄭 瑞47

（1．山東省泰安市中心醫院，山東泰安 271000； 2.深圳市兒童醫院，廣東深圳 518026；3.酒泉市人民醫院，甘肅酒泉 735000；4.安徽省立醫院，合肥 230001；5.河南信合醫院，河南信陽 465200；6.空軍軍醫大學附屬西京醫院，西安 710032；7.臨沂市人民醫院，山東臨沂 276002；8.復旦大學附屬華山醫院，上海 200040；9.邯鄲市第一醫院，河北邯鄲 056002；10.哈爾濱醫科大學附屬第二醫院，哈爾濱 150001；11.保靖縣人民醫院，湖南保靖 416500；12.成都市第三人民醫院，成都 610031；13.南方醫科大學附屬中山市博愛醫院，廣東中山 528400；14.重慶醫科大學檢驗醫學院，重慶 400016；15.東陽市人民醫院，浙江東陽 322100；16.浙江省立同德醫院，杭州 310012；17.浙江大學醫學院附屬第二醫院，杭州 310009；18.開封市中心醫院，河南開封475000；19. 浙江中醫藥大學附屬金華中醫院，浙江金華321017； 20.甘肅省中醫院，蘭州 730050；21.浙江省人民醫院，杭州 310014；22.原山東省寄生蟲病防治研究所，山東濟寧 272000；23.海鹽縣人民醫院，浙江海鹽 314300；24.樂昌市人民醫院，廣東樂昌 512200； 25.中山大學附屬第七醫院，廣東深圳 518000；26.浙江省人民醫院，杭州 310014；27.杭州市第一人民醫院，杭州 310006；28.保定第一醫院，河北保定 071000；29.廣東三九腦科醫院，廣州 510510；30.上海市松江區中心醫院，上海 201600；31.湖州市南潯區人民醫院，浙江湖州 313009；32.濮陽市疾病預防控制中心，河南濮陽 457000；33.鄭州大學第一附屬醫院，鄭州 450052；34.內蒙古包鋼醫院，內蒙古包頭 014010；35.象山縣紅十字臺胞醫院，浙江象山 315731；36.北京協和醫院，北京100730；37.江蘇省人民醫院，南京 210029；38.四川大學華西醫院，成都 610041；39.貴州中醫藥大學第一附屬醫院，貴陽 550001；40.大連醫科大學附屬第二醫院，遼寧大連 116000；41.浙大一院三門灣分院，浙江三門317100；42.金華市中心醫院，浙江金華 321000；43.杭州市第一人民醫院，杭州 310006；44.上海長海醫院，上海 200433； 45.諸暨市中醫醫院，浙江諸暨 311800；46.梧州市紅十字會醫院，廣西梧州 543000；47.浙江省臺州醫院，浙江臨海317000 。）

腦脊液是充滿腦室、蛛網膜下腔和脊髓中央管內的一種無色透明液體。腦脊液細胞形態學檢驗對中樞神經系統感染性疾病、腦膜癌病、中樞神經系統白血病、中樞神經系統淋巴瘤及腦血管病等疾病的診斷、鑒別診斷、療效觀察和預后評估等有重要的參考價值[1-2]。為進一步推廣腦脊液細胞形態學檢驗，使其操作規范化、標準化，經國內多位從事該領域研究的君安醫學細胞平臺專家共同商討，制定出腦脊液細胞形態學檢驗專家共識。

1 檢驗目的

檢查患者腦脊液中各種細胞數量、形態和比例的變化，分析腦脊液細胞學反應類型，結合患者臨床表現、影像檢查和實驗室相關檢查結果等綜合分析，做出細胞學診斷,為中樞神經系統疾病的診斷、鑒別診斷、治療效果和預后評估提供檢驗診斷依據。

2 標本采集

腦脊液標本主要通過腰椎穿刺術獲得。為避免或減少血液混入對腦脊液細胞計數及分類造成的影響，一般采用第三管腦脊液用于細胞計數及細胞形態學檢查[3-5]，標本量不少于2ml 為宜。推薦使用腰穿包內帶蓋的無菌塑料試管作為采集容器，避免使用真空采血試管或痰杯等容器送檢。

3 標本送檢

原則上，腦脊液標本采集后應立即送檢，一般不超過1h[3-5]，室溫保存。如標本不能及時送檢，可置4 ～8℃冰箱暫時保存，2h 內送檢。

4 標本接收

標本送達檢驗科后，工作人員核對標本相關信息，檢查采集容器是否符合要求，是否有滲漏，標本量是否足夠。

標本接收后應及時進行檢驗，久置可致細胞破壞，影響細胞計數及分類[3-5]；對于部分不合格標本(如標本容器選擇錯誤、標本量小于1ml、送檢不及時等情況），可執行讓步接收和讓步檢驗，及時與臨床進行溝通，并在報告單上備注說明標本狀況對檢驗結果的影響。

5 檢驗程序

5.1 理學檢查 包括腦脊液外觀、透明度、球蛋白定性等[3,5,8,10]。

5.2 細胞計數 包括細胞總數、有核細胞計數及紅細胞計數等，計數結果以**×106/L 單位報告[3,5,8,10]。

5.3 制片 推薦采用細胞玻片離心法進行細胞及其他有形成分的收集[1-2,4-5]。每次制片取混勻后的腦脊液約500μl（細胞數較多時，可適當減少用量），離心速度800r/min，離心時間8 ～10min。試管離心沉淀后取沉淀物涂片的方法不適用于腦脊液細胞學檢查。

5.4 染色 瑞-姫染色為腦脊液細胞形態學檢驗的常規染色方法[1-2,4-5]，必要時加做其它染色法，如墨汁染色、革蘭氏染色、抗酸染色、普魯士藍染色等。

5.5 閱片 低倍鏡下快速瀏覽全片，結合常規細胞計數結果，判斷涂片細胞收集效果是否滿意。如收集效果不滿意，應重新制片。低倍鏡下觀察有無異常細胞或病原成分，發現異常成分時轉油鏡下進一步確認和識別[1-2]。

5.6 細胞分類 在油鏡下進行有核細胞分類，結果以**%形式表示[1-2]。如全片有核細胞數不足50 個，可以“全片可見有核細胞多少個，其中**細胞多少個”的形式進行描述。

6 報告

細胞學報告推薦采用圖文報告形式，內容包括常規、細胞學和實驗室提示三部分。

6.1 常規部分 包括顏色、透明度、球蛋白定性、細胞總數、有核細胞計數、紅細胞計數及有核細胞分類等[3,5,8,10]。

6.2 細胞學部分 包括圖像和形態學描述。用圖像采集系統在鏡下選擇2 ～4 幅有代表性的圖片進行報告。對細胞學表現進行必要的形態描述，包括細胞分布、細胞大小、胞核大小、核形、核染色質特點、核仁大小與數量、胞質顏色及內容物等。同時報告其他異常成分，如細菌、真菌及菌絲、寄生蟲、結晶等[1-2,9]。

6.3 實驗室提示 根據細胞學表現，結合患者臨床表現、影像檢查及實驗室檢查相關結果綜合分析，向臨床提供合理性提示和建議[1-2]。

7 涂片保存

報告發出后，對涂片進行分類歸檔，妥善保管，保存時限按各實驗室標準操作規程進行處置，一般保存3 ～5年。

8 生物安全防護

8.1 標本的采集、運送必須符合生物安全要求，防止溢出。如標本溢出后，應立即對污染的環境和設備進行消毒處理。

8.2 檢驗人員在處理標本時，需做好個人防護，嚴格執行生物安全管理程序，對有明確傳染性的標本按級別進行防護。

8.3 廢棄標本及其它相關的廢棄物，嚴格執行醫療廢物處理流程。

9 臨床意義[1-10]

9.1 常見細胞及臨床意義

9.1.1 紅細胞： 正常腦脊液中不存在紅細胞。腦脊液中出現紅細胞，見于各種原因引起的出血，如腦出血（病理性）、蛛網膜下腔出血（病理性）及腰穿損傷出血（非病理性）等。

9.1.2 淋巴細胞 ： 正常腦脊液中有少量的淋巴細胞，約占有核細胞總數的60%～70%。受抗原刺激后，淋巴細胞形態和功能可發生改變，按形態學分為小淋巴細胞、大淋巴細胞、激活淋巴細胞等。

9.1.3 漿細胞：正常腦脊液中不存在漿細胞。漿細胞的出現，提示體液免疫反應的存在。

9.1.4 單核細胞 ：正常腦脊液中有少量的單核細胞，形態與外周血中單核細胞相似，約占有核細胞總數的30%～40%，與淋巴細胞的比例為4∶6 或3∶7。疾病狀態下，單核細胞受到抗原或各種理化因素的刺激時，形態會發生變化，表現為胞體、胞核增大，胞膜不規整，可有瘤狀突起，胞質著色加深，胞質出現多個空泡，稱為激活單核細胞。

9.1.5 中性粒細胞：正常腦脊液中不存在中性粒細胞，但外周血中的中性粒細胞可因腰椎穿刺損傷隨紅細胞帶入，應予識別。中性粒細胞的出現提示機體存在炎癥反應，常見于各種中樞神經系統感染，無診斷特異性；也可見于顱腦外傷、顱腦術后、腫瘤、腦出血、蛛網膜下腔出血等。

9.1.6 嗜酸性粒細胞：正常腦脊液中不存在嗜酸性粒細胞。嗜酸性粒細胞的數量或比例明顯增多時，提示機體存在過敏反應或寄生蟲感染的可能。

9.1.7 嗜堿性粒細胞：正常腦脊液中不存在嗜堿性粒細胞，它的出現提示存在過敏反應，可見于各種炎癥、異物反應、寄生蟲感染等，無診斷特異性。

9.1.8 吞噬細胞：正常腦脊液中不存在吞噬細胞。紅細胞吞噬細胞、含鐵血黃素吞噬細胞及膽紅素吞噬細胞的出現提示陳舊性出血。吞噬細胞吞噬功能強大，可吞噬各種異物，包括變性的白細胞、吞噬細胞和病原體等。

9.1.9 脫落細胞：各種原因導致腦室中的室管膜細胞、脈絡叢細胞及蛛網膜下腔中的蛛網膜細胞脫落時，可在腦脊液中偶然發現，無診斷特異性。

9.1.10 腫瘤細胞：腦脊液中的腫瘤細胞來源于中樞神經系統原發性腫瘤和繼發性腫瘤。前者可見于惡性程度較高的髓母細胞瘤、膠質瘤、生殖細胞瘤、室管膜瘤和腦膜瘤等；后者常見于肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胃癌、白血病及淋巴瘤等向中樞神經系統轉移。

9.2 常見細胞學表現及臨床意義

9.2.1 正常腦脊液細胞學表現：外觀呈無色透明，白細胞數不高于5×106/L，由淋巴細胞和單核細胞組成，兩者比值為7:3 或6:4，細胞形態規整，無明顯的細胞激活表現。

9.2.2 淋巴細胞反應型：有核細胞計數可正常或顯著升高，鏡下可見淋巴細胞比例明顯增多，可見激活淋巴細胞、漿細胞及少量單核細胞和中性粒細胞等。臨床意義：常見于病毒性腦膜炎，也可見于其它中樞神經系統感染性疾病、免疫性疾病和腫瘤。

9.2.3 中性粒細胞反應型：有核細胞數中度至顯著升高，鏡下可見大量的中性粒細胞，可伴少量淋巴細胞、單核細胞或漿細胞，有時可見病原菌。臨床意義：提示急性炎性反應，見于細菌性腦膜炎、結核性腦膜炎滲出期，也可見于腦出血、蛛網膜下腔出血及顱腦手術后等非急性炎性反應。

9.2.4 嗜酸性粒細胞-漿細胞反應型：有核細胞數可正常或輕中度升高，鏡下可見嗜酸性粒細胞和漿細胞比例明顯升高，常伴少量淋巴細胞和單核細胞等。臨床意義：常見于腦寄生蟲感染，也可見于結核性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎、顱腦手術后及蛛網膜下腔出血病患者。

9.2.5 淋巴-單核細胞反應型：有核細胞數基本正常或輕度增高，鏡下可見少量淋巴細胞、單核細胞，部分淋巴細胞及單核細胞可見激活表現。臨床意義：多見于疾病的恢復期，需與先前的細胞學表現進行比較分析。

9.2.6 淋巴-中性粒細胞反應型：有核細胞數中度至顯著升高，鏡下可見中性粒細胞及淋巴細胞明顯增多，偶見單核細胞或漿細胞等。臨床意義：提示炎性反應。多見于中樞神經系統細菌感染治療后、結核性腦膜炎、真菌感染和顱腦術后等，需結合病史、患者臨床癥狀及體征和實驗室相關檢查結果綜合考慮。

9.2.7 混合細胞反應型：有核細胞數中度至顯著升高，鏡下可見中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞等多種細胞同時存在，以中性粒細胞和淋巴細胞為主，也可伴少量漿細胞、嗜酸性粒細胞的出現。臨床意義：提示炎性反應，與淋巴-中性粒細胞反應型臨床意義基本一致。多見于中樞神經系統細菌感染治療后、結核性腦膜炎、真菌感染和顱腦術后等，需結合病史、患者臨床癥狀及體征和實驗室相關檢查結果綜合考慮。部分結核性腦膜炎患者抗結核治療后，在相當長一段時間內細胞學可表現為混合細胞反應型，這一特點對診斷結核性腦膜炎具有一定的參考價值。