不同產地苦蕎的質量評價研究

賓婕 張郴 晏通 胡建林

【摘?要】?目的：對云南及四川地區的苦蕎質量進行綜合評價，為苦蕎質量監控提供理論依據。方法：收集云南及四川地區的苦蕎樣品16份，采用藥典方法對蘆丁、槲皮素、肌醇、水分、浸出物、重金屬、砷鹽及農藥殘留量進行測定。結果：16份苦蕎樣品的蘆丁含量在1.02%～2.55%，槲皮素含量在0.12%～0.89%，肌醇含量在0.15%～0.51%，水分含量在7.38%～9.94%，浸出物含量在6.28%～18.22%，重金屬及砷鹽均符合限量要求，2種農藥均未檢出。結論：不同產地苦蕎有效成分含量有一定差異，有害物質殘留均符合規定，規定本品水分不得過10%，水溶性浸出物不得少于10%，醇溶性浸出物不得少于5%。

【關鍵詞】?苦蕎;含量測定;重金屬;農藥殘留

【中圖分類號】R282.5?【文獻標志碼】 A?【文章編號】1007-8517（2020）19-0043-04

Abstract：Abjective To evaluate the quality of buckwheat in Yunnan and Sichuan，provide a theoretical basis for the quality control of buckwheat. Methods Collecte 16 samples of buckwheat from Yunnan and Sichuan，Determine the contents of rutin， quercetin， inositol， water， extractives， heavy metal， arsenic salt and pesticide residues by pharmacopoeia method. [WTHZ]Results [WTBZ] In the 16 buckwheat samples，The content of rutin ranged from 1.02% to 2.55%，quercetin ranged from 0.12% to 0.89%，inositol ranged from 0.15% to 0.51%，water content ranged from 7.38% to 9.94%，extractives is between 6.28% and 18.22%，heavy metals and arsenic salts meet the limit requirements，none of the two pesticides were detected.Conclusion The contents of active components in buckwheat from different regions were different， and the harmful substances remained were in accordance with the regulations， which stipulated that the water content of buckwheat should not exceed 10%， the water-soluble extract should not be less than 10%， and the alcohol-soluble extract should not be less than 5%.

Key?words：Buckwheat; Content Determination; Heavy Metals; Pesticide Residue

苦蕎[Fagopyrum tartaricum（Linn）Gaench]屬蓼科蕎麥屬雙子葉植物，多產于云貴高原、黃土高原兩地[1]。其根、莖、葉、花、種子及籽殼中都含有大量黃酮類化合物，如蘆丁、槲皮素、肌醇。傳統醫學和現代醫學都證實苦蕎具有降血糖、降血脂、降尿糖、防便秘等功效[2-3]，被權威專家稱為“三降食品”和“21 世紀人類的健康食品”。因此苦蕎中蘆丁、槲皮素及肌醇含量是評價苦蕎功能性優劣的重要指標之一。此外，苦蕎中蛋白質含量也較高，有極高的營養和醫藥價值[4]。蕎麥蛋白除能顯著降低血液膽固醇濃度，其效果優于大豆蛋白質[5]，還具有抗衰老、抑制大腸癌的發生等作用。隨著其臨床研究和應用越來越廣泛，制訂苦蕎的質量標準迫在眉睫。由于水分過多會導致霉變，引入安全性問題，且影響食藥價值。有效成分的含量多少也直接影響療效。且有專家提出：重金屬、農藥殘留量檢查是中藥材走向世界，創立綠色中藥名牌產品的中藥標志之一[6]。為此，本試驗對苦蕎中有效成分進行測定，及對水分，浸出物，重金屬、砷鹽和農藥殘留進行了檢查，旨在為制訂苦蕎的質量標準提供依據。

1?儀器與材料

1.1?儀器?LC-2010型高效液相色譜儀（包括四元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱、紫外檢測器和蒸發光散射檢測器，日本島津），ODS柱（4.6 mm×150 mm，5μm，島津）， Luna C18柱（4.6 mm×150 mm， 3μm，Phenomenex公司），SK3200H超聲提取器（上海儀器制造廠），CP-224S電子天平（德國賽多利斯）。

1.2?材料?甲醇（色譜純，美國TEDIA天地試劑公司），乙腈（色譜純，美國Mallinckrodt Baker公司），水（娃哈哈飲用純凈水），其余試劑均為分析純。蘆丁（批號：09072231）、槲皮素（批號：09120411）對照品購自上海同田生物技術有限公司，肌醇對照品（純度>98%，鼎瑞化工（上海）有限公司）。苦蕎樣品分別來自云南和四川。

2?方法與結果

為了對苦蕎的內在質量有個全面的認識，分別對產自于云南及四川的16個樣品進行了系統性研究，方便對我們的生產使用提供一定的參考依據。

2.1?蘆丁、槲皮素、肌醇的含量測定

2.1.1?色譜條件

2.1.1.1?蘆丁與槲皮素?島津ODS柱（4.6 mm×150 mm， 5 μm），以乙腈–水（含2%的冰醋酸）為流動相，洗脫梯度為：0～18 min，乙腈濃度17%～40%，流速：1 mL/min，柱溫：25 ℃，檢測波長：360 nm。

2.1.1.2?肌醇?HPLC：甲醇- 水（含0.1%的冰醋酸）為流動相， 洗脫梯度為：0～5 min，甲醇濃度10%～30%，色譜柱：Luna C18柱（4.6 mm×150 mm， 3μm），流速：1 mL/min，進樣量：6 μL，室溫操作。ELSD： 漂移0;管溫度5 ℃，載氣壓力40 psi。

2.1.2?對照品溶液的制備

2.1.2.1?蘆丁與槲皮素?精密稱取蘆丁對照品4.6 mg，槲皮素對照品4.0 mg，分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，再分別取1 mL至10 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得蘆丁和槲皮素對照品溶液濃度分別為0.046 mg/mL和0.04 mg/mL。

2.1.2.2?肌醇?精密稱取肌醇對照品6.7 mg置于25 mL容量瓶中，用超純水溶解并定容至刻度，搖勻，再精密移取0.5 mL至10 mL的容量瓶中，用超純水定容至刻度，搖勻，即得對照品溶液濃度為13.4 μg/mL。進樣前取適量溶液用0.22 μm微孔濾膜過濾。

2.1.3?供試品溶液的配制

2.1.3.1?蘆丁供試品溶液的制備?取苦蕎粉末（過60目篩）約100 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加入80%乙醇5 mL，在常溫下超聲（59 KHz）提取30 min，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進樣前取適量溶液用0.45 μm微孔濾膜過濾。

2.1.3.2?槲皮素供試品溶液的制備?取苦蕎粉末（過60目篩）約100 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加入50%乙醇4 mL，在常溫下超聲（59KHz）提取30 min，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進樣前取適量溶液用0.45 μm微孔濾膜過濾。

2.1.3.3 肌醇供試品溶液的制備?取苦蕎粉末（過60目篩）約100 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加入40%甲醇溶液4 mL，在常溫下超聲提取20 min，用相應的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進樣前取適量溶液用0.22 μm微孔濾膜過濾。

分別取10 μL進高效液相色譜儀，記錄峰面積，由線性方程計算各自含量，結果見表1。

2.1.4?線性關系考察

2.1.4.1?蘆丁與槲皮素?分別精密吸取2.1.1項下的蘆丁和槲皮素對照品溶液0.5、1、5、10、15、20、25 μL和0.5、1、5、10、15 μL， 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，測定其峰面積，以進樣量X（μg）為橫坐標，色譜峰面積Y為縱坐標，繪制標準曲線，蘆丁和槲皮素的回歸方程和相關系數分別為：Y = 1703415X+9229.6，r=0.9996;Y=3833824 X-11994.2，r= 0.9999。

2.1.4.2?肌醇?精密吸取2.1.2項下的肌醇對照品溶液2、4、6、8、10 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖， 測定其峰面積，以進樣量X（μg）為橫坐標，色譜峰面積Y為縱坐標，繪制標準曲線，得：Y=156739X+43.2，r=0.9997。

2.1.5?樣品含量測定?取不同來源的苦蕎粉末適量，精密稱定，分別按2.2項下方法制備供試品溶液，按1項下色譜條件進行測定，分別記錄蘆丁、槲皮素及肌醇的峰面積，由線性方程計算各自含量，測定結果見表1。

2.2?水分的測定?按照《中國藥典》（2020年版）中水分測定法（四部通則0832）第二法[7]，根據減失的重量，計算苦蕎樣品含水量（%），結果見表1。

2.3?浸出物的測定?按照《中國藥典》（2020年版）中浸出物測定法（四部通則2201）[7]，分別計算苦蕎樣品中水溶性浸出物及醇溶性浸出物的含量（%），結果見表1。

2.4?重金屬、砷鹽殘留?按照《中國藥典》（2020年版）中重金屬檢查法（四部通則0821） [7]第二法檢查重金屬;按砷鹽檢查法（四部通則0822）[7]第二法檢查砷鹽，檢測結果見表1。

2.5?農藥殘留?本試驗結合蕎麥生長期的病害特點和針對性的用藥，發現吡蟲啉和多菌靈是種植蕎麥最常用的農藥，故本試驗對吡蟲啉和多菌靈進行殘留量檢查，用液-質聯用方法進行檢測。液相條件：Waters ACQUITY?UPLC -MS/MS（API 3200），色譜柱為ACQUITY?UPLC ODS柱（2.1 mm× 100 mm，7 μm），以乙腈-水為流動相梯度洗脫：0～2 min，乙腈濃度為15%，2～6 min，乙腈濃度15%～90%，柱溫30 ℃，流速0.3 mL/min，進樣1 μL。質譜條件：氣體為高純氮氣，離子源：電噴霧離子源，掃描方式：正離子掃描，檢測方式：多重反應監測，電噴霧電壓：5500 V，霧化氣壓力：0.414 MPa，輔助加熱氣壓力：0.345 MPa，氣簾氣壓力：0.069 MPa，離子源溫度：600 ℃。

對照品和供試品的定性結果見圖1，檢測結果見表1。

3?討論

研究考察了16個產地苦蕎樣品的有效成分，其中蘆丁含量最高，在1.02%～2.55%，肌醇含量最低，在0.15%～0.51%;且不同產地苦蕎中蘆丁、槲皮素及肌醇含量有一定差異，說明產地的氣候、土壤特性等生態因子及產地加工方式對藥材質量影響很大。同產地的苦蕎，因加工方式不同含量也有明顯差異。根據測定情況和一般養護經驗，規定本品水分不得過10%。浸出物含量反映了植物體內生物活性物質的積累情況，與藥材質量密切相關[8]。按照測定結果適當下浮來設定指標限度比較符合實際情況，規定本品水溶性浸出物不得少于10%，醇溶性浸出物不得少于5%。

按照國際市場對無公害綠色藥材的要求，對不同產地的苦蕎進行了重金屬、砷鹽及農藥殘留檢測，結果表明，苦蕎樣品符合《藥用植物及制劑進出口綠色行業標準》[9]（中華人民共和國對外貿易經濟合作部）規定，及中國藥品生物制品檢定所《中藥中鉛、鎘、砷、汞測定方法起草說明》[10]中提出的四元素的限量標準，即鉛不高于5 ppm，鎘不高于0.5 ppm，砷不高于2 ppm，汞不高于0.2 ppm。

本實險對云南及四川地區苦蕎的蘆丁、槲皮素、肌醇含量、水分、浸出物、重金屬、農殘進行測定，為科學評價苦蕎內在質量積累了科學資料，提供了實驗數據。

參考文獻

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（收稿日期：2020-05-09?編輯：劉?斌）