熱滅活乳雙歧桿菌BL-99緩解小鼠結(jié)腸炎及調(diào)節(jié)腸道菌群的功能研究

趙雯，劉偉賢，巴根納，樊啟程，孫超，王妮妮，洪維鍊

（內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司，呼和浩特010110）

0 引 言

腸道不僅是哺乳動(dòng)物最大的消化吸收器官，也是機(jī)體最重要的防御屏障。正常腸道具有將腸腔內(nèi)物質(zhì)與機(jī)體內(nèi)環(huán)境隔離的功能，可以防止致病性抗原侵襲，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，是機(jī)體防御的第一道防線[1]。腸道中定植著1 000 多種細(xì)菌，包括益生菌、致病菌、真菌、病毒等，通常情況下，腸道微生態(tài)系統(tǒng)與機(jī)體保持著一種平衡狀態(tài)，但若機(jī)體處于應(yīng)激等不良狀態(tài)[2]或一次性接觸到大量病原菌[3]，這種平衡關(guān)系則會(huì)被打破，損傷超過機(jī)體的自我修復(fù)水平，最終引起腸道炎癥產(chǎn)生[4]。結(jié)腸炎是炎癥性腸病的一種，以反復(fù)發(fā)作的腸道慢性炎癥為主要表現(xiàn)，其發(fā)病機(jī)制目前仍不明確，但研究表明UC 的發(fā)病與腸道菌群的失調(diào)密切相關(guān)[5-7]。

雙歧桿菌（Bifidobacterium）是革蘭氏陽(yáng)性菌，廣泛分布于腸道、糞便、口腔等環(huán)境中[8]。雙歧桿菌是人體腸道中數(shù)量眾多的一種有益菌，作為腸道健康的指示菌，其豐度受到各種因素的影響[9]。研究發(fā)現(xiàn)，雙歧桿菌具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、抑制致病菌的黏附和增強(qiáng)腸道屏障等有益功能[10-12]。已有研究證實(shí)，雙歧桿菌CCFM683 可以通過改善腸道組織學(xué)損傷，保護(hù)結(jié)腸粘膜的完整性，并顯著降低炎性因子的表達(dá)來緩解DSS 誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎[13]。目前我國(guó)益生菌功能性的研究多局限于活菌，對(duì)于滅活益生菌的研究還比較少，而國(guó)外尤其在日本，以滅活雙歧桿菌為主的益生菌制品產(chǎn)業(yè)形成了一定的規(guī)模[14]。研究表明，滅活雙歧桿菌可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌抗炎因子，可能會(huì)增加其抗炎作用；還有研究表明，滅活的雙歧桿菌具有與活菌相同或相近的免疫學(xué)活性，兩者均可提高小鼠腸液中sIgA 水平[15]。

本研究以滅活乳雙歧桿菌BL-99 為干預(yù)物，探究BL-99 是否對(duì)患病小鼠有炎癥緩解作用以及對(duì)健康的小鼠具有益生作用。因此，本研究構(gòu)建了結(jié)腸炎小鼠模型組，探究滅活乳雙歧桿菌BL-99 對(duì)正常小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)作用，旨在了解滅活雙歧桿菌的抗炎機(jī)制及調(diào)節(jié)腸道菌群的功能作用。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 試驗(yàn)菌株及動(dòng)物

乳雙歧桿菌BL-99 菌粉，由內(nèi)蒙古乳業(yè)技術(shù)研究院有限責(zé)任公司提供；健康BABL/c 雄性小鼠112 只，購(gòu)自北京華阜康生物科技有限責(zé)任公司，飼養(yǎng)于中國(guó)疾病預(yù)防控制中心動(dòng)物房。

1.1.2 試劑與設(shè)備

ELISA 試劑盒；DSS，美國(guó)MP；一次性離心管，由泰州市蘇醫(yī)醫(yī)療器械有限公司提供；一次性培養(yǎng)皿，由青島金典生化器材有限公司提供；厭氧產(chǎn)氣袋，由日本三菱公司提供；電子天平；恒溫培養(yǎng)箱；密封培養(yǎng)罐；酶標(biāo)儀；分光光度計(jì)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 滅活菌懸液的配制

根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求人體需求量及樣品規(guī)格，參考20 g小鼠與70 kg 成人體表面積比例參數(shù)0.0026，以0.4 mL/20 g 為小鼠灌胃體積。取833.33 mg 乳雙歧桿菌BL-99 菌粉溶解到 50 mL 無(wú)菌PBS 溶液中，得到1×109菌懸液，然后采用10 倍的梯度稀釋得到所需中、低梯度的樣品。配制完成后，100 ℃水浴加熱滅活20 min，冷藏備用。

1.2.2 動(dòng)物分組及模型的構(gòu)建

健康BABL/c 雄性小鼠112 只（n=14 只/組），鼠齡6～8 周，體重20～22 g ，維持室溫（25±2 ℃），相對(duì)濕度（55±2）%，12 h/12 h 晝夜交替光照，自由進(jìn)食和飲水。每組分兩籠飼養(yǎng)，每籠7 只，使用苦味酸編號(hào)，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d。具體分組及樣品量見表1。除對(duì)照組外，編號(hào)為2-5 的分組為結(jié)腸炎小鼠實(shí)驗(yàn)組，需要進(jìn)行DSS 誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型的建立，具體方法為在實(shí)驗(yàn)過程第13 天，配制5.0%的DSS 水溶液替代飲水，自由飲用7 d，正常組飲用蒸餾水，并每日觀察小鼠體征變化。編號(hào)為6-8的分組為菌株調(diào)節(jié)正常小鼠的腸道菌群實(shí)驗(yàn)組。兩組均在適應(yīng)性培養(yǎng)5 d 后，以灌胃方式灌胃小鼠，灌胃體積為0.4 mL/20 g的滅活乳雙歧桿菌BL-99，灌胃周期為14 d。

1.2.3 樣品采集與處理

每天觀察小鼠活動(dòng)，耗食量及大便性狀，并定期稱量小鼠的體重。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，結(jié)腸炎組的小鼠采用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，離心分離血清。分離小鼠結(jié)腸，以PBS 沖洗多次后，測(cè)量長(zhǎng)度，剪切2/3 存于離心管中，-80 ℃保存。1/3 儲(chǔ)存于10%福爾馬林溶液中固定備用。剝離完整脾臟，稱重，計(jì)算脾臟指數(shù)。腸道菌群組在灌胃前（6 d）與灌胃后（19 d）使用無(wú)菌醫(yī)用膠帶及鑷子無(wú)菌條件下采集每組小鼠糞便，每只2～4 粒，存放于滅菌離心管中，編號(hào)，-80 ℃冷凍條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 動(dòng)物模型分組

1.2.4 結(jié)腸病理組織HE 染色及評(píng)分

參考Martin[16]的研究方法，將結(jié)腸放入福爾馬林溶液固定后，依次經(jīng)過脫水、浸蠟、包埋、切片、撈片和烤片，脫蠟復(fù)水等步驟處理后，進(jìn)行HE 染色，最后在光學(xué)顯微鏡下觀察結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)。

采用Fedorak 組織學(xué)積分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)評(píng)分[17]。組織學(xué)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如表2所示。

表2 組織學(xué)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

1.2.5 免疫細(xì)胞因子檢測(cè)

對(duì)結(jié)腸炎小鼠的血清和結(jié)腸中的TNF-α、IL-6、IL-10 采用酶聯(lián)免疫測(cè)定法，按照ELISA 試劑盒的操作說明書進(jìn)行測(cè)定。

1.2.6 腸道菌群多樣性的檢測(cè)

取-80 ℃冷凍條件下保存的腸道菌群組小鼠糞便，采用糞便總DNA 提取試劑盒提取總DNA。腸道菌群多樣性是基于IIIumina HiSEQ 測(cè)序平臺(tái)，利用雙末端測(cè)序的方法，構(gòu)建小片段文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序。通過對(duì)Reads 拼接過濾，OTUs 聚類，進(jìn)行物種注釋 he 豐度分析，可以解釋樣品的物種構(gòu)成，并進(jìn)一步進(jìn)行多樣性分析和顯著性物種差異分析等等，挖掘樣品之間的差異。

1.2.7 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)利用Excel 和SPSS 18.0 軟件處理，采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以單因素方差分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 DSS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎的特征觀察

在實(shí)驗(yàn)的0～5 d，各組小鼠毛色光滑，精神活躍，反應(yīng)靈活，正常進(jìn)食，無(wú)腹瀉及血便等情況，大便呈球形或條形；DSS 組與高、中、低劑量組小鼠均經(jīng)過5%的DSS 誘導(dǎo)7 d 后形成了實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型。造模期間的前3 天，小鼠飲水正常，體重基本正常，但出現(xiàn)慵懶、厭食，毛色開始暗淡，DSS 組情況較為嚴(yán)重。造模第3天，DSS 組與高、中、低劑量組小鼠均出現(xiàn)腹瀉，DSS 組小鼠開始便血，而高、中、低劑量組小鼠出現(xiàn)血便的時(shí)間與DSS 組比較推遲1～2 d。且隨著造模時(shí)間加長(zhǎng)，血便癥狀加劇，造模結(jié)束小鼠體重及活動(dòng)量明顯減少，灌胃滅活乳雙歧桿菌BL-99 的高、中、低劑量組相比較DSS 組情況較為好轉(zhuǎn)，毛色逐漸恢復(fù)光澤，活動(dòng)量逐漸增加。正常對(duì)照組無(wú)上述癥狀出現(xiàn)，活動(dòng)如常，進(jìn)食量逐漸增加，大便正常，體重增加。

2.2 乳雙歧桿菌BL-99對(duì)小鼠常規(guī)指標(biāo)的影響

滅活乳雙歧桿菌BL-99 作用于DSS 誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎的體重變化結(jié)果如圖1 所示。在灌胃小鼠的第5 天、第12 天和第19 天，分別對(duì)每組小鼠進(jìn)行體重測(cè)量。在第5 天時(shí)，小鼠體重的各組間比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；表明實(shí)驗(yàn)開始時(shí)小鼠狀態(tài)一致，可排除小鼠體重不同造成的實(shí)驗(yàn)差異；給予7 d 的滅活乳雙歧桿菌BL-99 后，各組小鼠體重均有所增加；而在5%DSS 代替飲水7 d 后，除對(duì)照組外小鼠體重均顯著降低（P＜0.05），這與Zhou[18]的結(jié)果相一致，而對(duì)照組體重?zé)o顯著性變化，表示小鼠結(jié)腸炎造模成功。與DSS組相比，灌胃滅活乳雙歧桿菌BL-99 的高、中、低劑量組的小鼠體重有所上升，但無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

測(cè)量各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，造模后，DSS 組和高、中、低劑量組小鼠的結(jié)腸長(zhǎng)度均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），說明5%DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎會(huì)導(dǎo)致小鼠腸道損傷，長(zhǎng)度縮短[19]。高、中、低劑量的滅活BL-99 菌懸液灌胃后，各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度有所增加，但與DSS 組比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），說明滅活BL-99 菌懸液短期的灌胃對(duì)小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度有所緩解，但沒有形成統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。同時(shí)低劑量組的滅活BL-99菌懸液對(duì)小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度的恢復(fù)有更大的影響。

圖1 乳雙歧桿菌BL-99對(duì)結(jié)腸炎小鼠常規(guī)指標(biāo)的影響

2.3 小鼠脾臟重量及指數(shù)

胸腺和脾臟是重要的免疫器官，其臟器指數(shù)可在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱。脾臟中有豐富的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，脾臟的重量與其功能及免疫細(xì)胞數(shù)量有關(guān)[21]。由表4 可以看出，與對(duì)照組比較，DSS 組和滅活高、中劑量組小鼠的脾臟指數(shù)均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），各組之間的差異不顯著，這是因?yàn)镈SS 誘導(dǎo)作用下，脾臟中的淋巴細(xì)胞和免疫細(xì)胞發(fā)揮其免疫作用，相關(guān)細(xì)胞大量增殖，同時(shí)由于小鼠的體重降低，從而引起小鼠脾臟指數(shù)升高。動(dòng)物模型組給予滅活乳雙歧桿菌BL-99 灌胃后，高、中、低劑量組與DSS 組無(wú)顯著性差異（P＞0.05），說明經(jīng)炎癥造模后，各組小鼠機(jī)體均產(chǎn)生了炎癥反應(yīng)，而滅活低劑量組在脾臟指數(shù)上具有降低的趨勢(shì)，且與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P＞0.05），可能具有減少機(jī)體炎性反應(yīng)的功能。

表3 小鼠脾臟重量/指數(shù)

2.4 乳雙歧桿菌BL-99改善結(jié)腸組織病理學(xué)結(jié)構(gòu)

從圖2 的組織學(xué)觀察可以看出，對(duì)照組小鼠具有完整的結(jié)腸上皮細(xì)胞，并可看到清晰的隱窩結(jié)構(gòu)和杯狀細(xì)胞；DSS 誘導(dǎo)形成的模型組結(jié)腸炎小鼠組織不能看到完整的結(jié)腸上皮細(xì)胞，同時(shí)出現(xiàn)隱窩不完全、杯狀細(xì)胞損壞的現(xiàn)象，損壞面積均在50%以上，部分小鼠隱窩完全消失，杯狀被完全破壞[21]。另外還可以觀察到小鼠炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，如中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等。小鼠經(jīng)滅活的BL-99 灌胃后DSS 造模，出現(xiàn)了炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度降低、病變深度主要在黏膜下層，基底隱窩破壞較少，切片病變范圍也較小，其中高劑量組炎癥反應(yīng)較為嚴(yán)重，其病變范圍較大，約在50%左右，中、高劑量組病變范圍較為局限，大部分在0～25%范圍內(nèi)。結(jié)果表明滅活乳雙歧桿菌BL099 可以在一定程度上修復(fù)腸道細(xì)胞，減輕DSS 模型小鼠的結(jié)腸炎癥程度，維護(hù)腸道屏障的完整性。

采用Fedorak 組織學(xué)積分標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)果如圖2 所示，與DSS 組比較，滅活BL-99 低、中、高劑量組的組織學(xué)傷損評(píng)分均顯著低于DSS組（P＜0.05），說明滅活乳雙歧桿菌BL-99 具有減輕小鼠結(jié)腸炎癥癥狀的作用。BL-99 高劑量組的評(píng)分雖然與低、中劑量組相比較高，但與DSS 組比較仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且結(jié)腸組織病理學(xué)評(píng)分結(jié)果與結(jié)腸HE 染色結(jié)果相一致。

2.5 結(jié)腸免疫細(xì)胞因子的表達(dá)

圖2 結(jié)腸組織的HE染色及結(jié)腸組織損傷評(píng)分

IL-6 為一種多功能的關(guān)鍵細(xì)胞因子，能夠調(diào)節(jié)其他細(xì)胞因子的表達(dá)[22]。TL-6 能刺激B 細(xì)胞的分化，誘導(dǎo)免疫球蛋白的分泌。臨床發(fā)現(xiàn)，UC 患者中IL-6 水平隨著患者的癥狀改變而改變，當(dāng)患者炎癥反應(yīng)減緩時(shí)，可以同時(shí)觀察到中IL-6 水平的緩慢減少[23]。而TNF-α是一種涉及到系統(tǒng)性炎癥的細(xì)胞因子，主要由巨噬細(xì)胞分泌，廣泛分布在外周血循環(huán)中。在病理改變下，TNF-α大量分泌，以致對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害作用[24]。DSS 誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的過程中，IL-6、TNF-α作為促炎因子，其表達(dá)水平的高低與結(jié)腸研中炎癥程度的深淺有著密切的關(guān)系[25]。如圖3 所示，DSS 組小鼠結(jié)腸IL-6、TNF-α顯著升高，說明DSS 誘導(dǎo)小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生大量的炎性細(xì)胞因子。而灌胃滅活BL-99 高、中、低劑量組的小鼠結(jié)腸IL-6、TNF-α與DSS組比較均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，其中低劑量組的IL-6 和TNF-α與DSS 組相比顯著下降（P＜0.05），說明滅活乳雙歧桿菌BL-99 灌胃過程中，益生菌可直接對(duì)腸道炎癥反應(yīng)產(chǎn)生相關(guān)的抑制作用，抑制炎性因子的分泌。

已有研究證實(shí)，缺乏IL-10 的小鼠表現(xiàn)出嚴(yán)重的腸道炎癥，且IL-10 在動(dòng)物結(jié)腸炎模型中表現(xiàn)良好的治療效果[26]。本研究中，DSS 組IL-10 與對(duì)照組比較雖無(wú)顯著性差異，但在數(shù)值上出現(xiàn)了上升趨勢(shì)，這可能是由動(dòng)物機(jī)體自身免疫反應(yīng)為導(dǎo)致的。灌胃滅活BL-99 低、高劑量組的小鼠結(jié)腸抗炎因子IL-10 含量均與對(duì)照組相比顯著增高（P＜0.05），說明灌胃滅活BL-99 可以促進(jìn)結(jié)腸炎中IL-10 的產(chǎn)生，增強(qiáng)抗炎作用，緩解DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎癥狀。

2.6 腸道菌群的變化

2.6.1 小鼠腸道微生態(tài)菌群Alpha多樣性指數(shù)

圖3 結(jié)腸炎小鼠的免疫細(xì)胞因子的表達(dá)

Alpha 多樣性反應(yīng)的是單個(gè)樣品物種豐度及物種多樣性，對(duì)菌群豐度指數(shù)OTU、ACE、Chao，物種多樣性指數(shù) Shannon 和 Simpson 進(jìn)行分析比較[27]，由圖 4 可發(fā)現(xiàn)灌胃滅活BL-99 前，各組動(dòng)物菌群豐度指數(shù)ACE、Chao，物種多樣性指數(shù) Shannon 和 Simpson 均無(wú)顯著性差異（P＞0.05），說明灌胃前各組小鼠腸道菌群相對(duì)豐度與多樣性無(wú)顯著性差異，各組小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)趨于一致；灌胃后，滅活BL-99 高、低、中劑量組的小鼠腸道菌群OTU、ACE、Chao 和Simpson 與對(duì)照組相比沒有顯著性差異（P＞0.05），這可能是由于滅活的乳雙歧桿菌在腸道內(nèi)發(fā)揮功能的主要是其含有的小分子功能肽、維生素、游離氨基酸等，不能在腸道內(nèi)進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖導(dǎo)致的。滅活BL-99 低、中劑量組的小鼠腸道菌群Shannon 指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），說明與對(duì)照組比較，滅活的中、低劑量BL-99 灌胃后的小鼠腸道中菌群的多樣性增加。

分析灌胃滅活BL-99 的低、中、高劑量組的小鼠腸道菌群，OTU、ACE、Chao 均呈現(xiàn)出增加的趨勢(shì)，且可檢測(cè)到物種種類增加，說明灌胃后小鼠腸道菌群物種豐度增加。

圖4 腸道菌群Alpha多樣性指數(shù)

2.6.2 小鼠腸道微生態(tài)菌群門水平的組成與分布

由圖5 所示，與對(duì)照組比較，灌胃滅活BL-99 前低、中、高劑量組腸道菌群相對(duì)豐度均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；灌胃低劑量的BL-99 可以導(dǎo)致小鼠腸道菌群的變形菌門的相對(duì)豐度顯著降低，厚壁菌門的相對(duì)豐度顯著增高（P＜0.05）；灌胃中劑量的BL-99 可以導(dǎo)致小鼠腸道菌群中擬桿菌門的相對(duì)豐度顯著降低，厚壁菌門的相對(duì)豐度顯著增高（P＜0.05）；高劑量BL-99 組小鼠腸道菌群擬桿菌門、變形菌門的相對(duì)豐度降低，厚壁菌門的相對(duì)豐度增高（P＜0.05）；灌胃滅活BL-99 后，小鼠腸道菌群擬桿菌門和變形菌門的相對(duì)豐度總體呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，而厚壁菌門的相對(duì)豐度顯著升高（P＜0.05），主要原因?yàn)橐嫔殡p歧桿菌BL-99 為放線菌門，通過灌胃在腸道中定植，增加腸道菌群中厚壁菌門的含量，同時(shí)益生菌的增加，一定程度上限制了腸道擬桿菌門中條件致病菌和變形菌門中腸桿菌的增殖，在門水平上起到調(diào)節(jié)腸道菌群的作用。

2.6.3 灌胃前后小鼠腸道微生態(tài)菌群在屬水平上的分析

如圖6 所示，在屬水平上，灌胃滅活BL-99 前各組小鼠腸道菌群相對(duì)豐度與對(duì)照組比較，差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。灌胃后，與對(duì)照組比較，BL-99 低劑量組小鼠腸道菌群中梭菌屬、腸球菌屬的相對(duì)豐度降低，雙歧桿菌屬的相對(duì)豐度顯著增高（P＜0.05）；BL-99 中劑量組小鼠腸道菌群梭菌屬、腸球菌屬相對(duì)豐度降低，雙歧桿菌屬相對(duì)豐度增高（P＜0.05）；BL-99 高劑量組小鼠腸道菌群梭菌屬擬桿菌屬、梭菌屬、腸桿菌屬、腸球菌屬的相對(duì)豐度降低，雙歧桿菌屬相對(duì)豐度增高（P＜0.05）。綜合以上結(jié)果表明，滅活BL-99 可降低腸道菌群中擬桿菌屬、梭菌屬、腸桿菌屬、腸球菌屬含量，增加雙歧桿菌屬的含量。

同時(shí)比較圖5 和圖6 可以得知，益生菌增加腸道菌群的作用在屬和門兩個(gè)等級(jí)上均呈現(xiàn)相關(guān)性。原因在于益生菌BL-99 為雙歧桿菌，雙歧桿菌屬在腸道內(nèi)的增加導(dǎo)致雙歧桿菌科的菌群增加，從而引起放線菌綱和放線菌門菌群的增加，同時(shí)雙歧桿菌屬于腸道益生菌，促進(jìn)了厚壁菌門的增長(zhǎng)。因此，BL-99 雙歧桿菌可以增加腸道內(nèi)雙歧桿菌屬的相對(duì)豐度，降低擬桿菌屬、梭菌屬、腸桿菌屬和腸球菌屬相對(duì)豐度，具有調(diào)節(jié)腸道菌群功效。

3 結(jié) 論

由于腸道微生物可以吸收宿主自身難以消化吸收的成分及分泌到腸腔中的物質(zhì)，所以腸道微生物的組成會(huì)隨著機(jī)體攝入的食物成分的改變而改變。因此，膳食結(jié)構(gòu)是影響腸道菌群結(jié)構(gòu)和功能的重要因素，不當(dāng)?shù)娘嬍硶?huì)擾亂腸道微生物和宿主之間的穩(wěn)態(tài)平衡，造成腸道菌群失調(diào)進(jìn)而誘發(fā)多種腸道疾病。攝入益生菌添加食品可調(diào)節(jié)腸道微生物群結(jié)構(gòu)，從而達(dá)到效預(yù)防甚至是治療相關(guān)疾病的效果。攝入一定量的滅活益生菌、益生菌細(xì)胞碎片及益生菌代謝產(chǎn)物，也同樣具有很好的復(fù)合免疫作用，可以抑制致病菌增殖，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，有益于宿主健康。滅活乳雙歧桿菌BL-99 灌胃小鼠后，在一定程度上降低結(jié)腸組織傷損評(píng)分，改善了腸道損傷的程度；并通過降低炎性細(xì)胞因子IL-6、TNF-α 的含量，增加抗炎因子IL-10 含量緩解結(jié)腸炎。綜合以上結(jié)果，滅活BL-99雙歧桿菌具有減輕DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎癥癥狀的功效。同時(shí)滅活的BL-99 雙歧桿菌對(duì)正常小鼠腸道菌群具有調(diào)節(jié)作用，滅活的乳雙歧桿菌BL-99 能夠增加雙歧桿菌屬和乳桿菌屬菌群含量，顯著促進(jìn)雙歧桿菌和乳酸菌的生長(zhǎng)，具有調(diào)節(jié)腸道菌群的功效，對(duì)健康小鼠的腸道也具有增益的效果。