參加全國雞新城疫抗體水平檢測技能大賽體會

（寶雞職業技術學院，陜西 寶雞 721301）

1 賽前籌劃，積極備賽

1.1 校企合作，與時俱進

掌握技術要領單憑教師自己的領悟是不夠的，還需要企業專家、養雞場技術人員及動物疫病預防控制中心的專家參與，共同研究國標、技能大賽評分標準及操作規范，做到操作規范、正確、實用。

1.2 精心組織，重在選拔

參加比賽要取得好成績，選拔參賽選手非常重要。俗話說興趣是最好的老師，此賽項的訓練要求學生有毅力、有耐力，并且有體力，此外還要綜合學生的專業知識、心理素質及應變能力考量。在新生入學之初，通過給學生展示往屆參賽學生風采以及獲獎學生的工作情況，讓學生了解到參賽與不參賽對找工作難易程度及工資待遇等方面的影響，使他們對技能大賽產生強烈欲望，為選拔優秀學生創造條件。

1.3 優化實訓條件，積極備賽

訓練期間要不斷優化自身的實訓條件，使實訓條件與環境接近甚至與比賽條件一致，避免學生在比賽過程中對儀器及環境不夠熟悉，從而影響水平的正常發揮。

1.4 有條不紊，團隊協作

在本賽項的訓練過程中，拔高兩人的默契度非常重要。所以，要盡量根據每個參賽學生的特點合理分工，發揮個人優勢，而且要反復進行配合訓練，做到操作熟練，配合默契 。

2 規范操作，保質保量

2.1 對照標準 ，嚴格訓練

該競賽項目是以國家職業標準 《動物疫病防治員》(高級)規定的知識和技能要求為基礎，以中華人民共和國國家標準 (GB／T16550-2008)“新城疫診斷技術”為依據，操作規范與要求參考 GB／T16550-2008進行。所以，研究賽項規程及國家標準，按照國家標準及評分標準要求進行嚴格訓練，這樣才能夠使學生的技能操作標準化。

2.2 選擇試驗器材，擺放整齊合理

在訓練過程中，不論從所用的器材還是從訓練環境條件的設置上，最好能與競賽規程及所承辦院校提供的器材和放置位置一致，重復多次練習，熟能生巧，這樣才能夠確保選手在比賽中不失誤。所以，在平時的教學和訓練中，教師除了注重關鍵技術的訓練，還要讓學生參與到材料準備的過程中，從而培養學生發現問題、解決問題的能力。

2.3 儀器使用規范，正確熟練

2.3.1 普通托盤天平的使用。在天平的配平過程中，游碼始終放在標尺左端的零刻度處[1]。把標有“配平”字樣與50 mL重量大致相同的小燒杯放到托盤中心位置，杯口分別朝向天平外側，通過調節平衡螺母使天平平衡，不用時天平應處于休止狀態。

2.3.2 普通離心機的使用。先檢查離心機，離心管液體最多不能超過12 mL。在調平過程中，套管和離心管，包括離心管蓋一起放在天平上平衡后對位放入離心機。離心機運轉時1名選手看守，避免出現異常。離心機使用完畢后數據歸零，拔下電源，整理好電線。

2.3.3 微量振蕩器的使用。使用微量振蕩器前，將振幅旋鈕調至最低，接上電源，打開電源開關，順時針調節振幅調節旋鈕，檢查振蕩器工作是否正常。如果振蕩器能正常工作，將振幅旋鈕調至最低，關閉電源。將加好樣品的反應板固定在振蕩器上，打開開關，將振幅旋鈕調至所需振幅。振蕩時間充足后取下振蕩物，將振幅調至最低，關閉電源。

2.3.4 微量移液器的使用。微量移液器的選擇直接影響檢測的精確性。一般情況下，可根據自己所加入加樣板中液體的量來選擇移液器，需要注意的是一定要選擇量程與自己所移液體體積最接近的移液器。選擇體積時，不要直接選擇所移液體的體積，要將旋鈕轉到比所需體積大一檔的檔位，然后再反向調節到所需擋位[2]；裝配移液器吸頭時，切記不要上下反復撞擊槍頭，一定是要將移液器垂直插入吸頭，左右旋轉上緊即可。吸液時垂直吸液，先進行吸頭預潤濕[3]，然后按下第1檔，將吸頭尖端垂直浸入液面3 mm以下，緩慢釋放按鈕，待液體進入吸嘴。放液時將移液器傾斜，先按到第1檔，打出大部分液體，再按到第2檔，將剩余的液體全部排出。應做到“慢吸快打”，即在吸液時要慢、穩、準，放液時對準孔后速度要快，這樣可以避免打完后吸頭里存留液體，保證加入液體的體積一致。旋動調節鍵時動作一定要輕、慢，不能聲音太大。移液器用完后一定要調到最大體積檔位，放到移液器架上。

2.4 采血方法規范、熟練，采血量適宜

采血過程由2位參賽者配合完成。助手一手抓住雞的雙翅根部，另一手抓住雞雙腿關節部位，將雞側臥保定。采血者站在對側，展開采血側翅膀，一手固定采血部位，一手用酒精棉球消毒采血部位，再用干棉球擦干。用已吸入3.8%枸櫞酸鈉的禽用采血器向翅靜脈叢刺入，刺入方向是從翅根向翅尖，也就是說與血液回流方向相反刺入，吸取血液。采血完畢后助手一手用干棉球按壓采血部位止血5 min，采血者立刻將抗凝劑和血液輕輕搖勻，防止血液凝固。

2.5 血凝試驗

加樣時將液體加在V型板的底部，并注意不要濺出。倍比稀釋時注意使用第一檔混勻，全部排空后重新吸取液體放到下一孔。需要注意的是血凝要加3排，每排第一空加完抗原后要更換槍頭。再進行混勻稀釋時補加生理鹽水和紅細胞時應由后往前懸滴加入，避免造成各個孔間液體相互污染，導致試驗結果出現誤差。抗原懸液使用前一定要充分混勻，紅細胞懸液要邊搖邊加，保證每孔中加入的濃度一致[4]。結果判定應當按照國際標準規定的要求，在生理鹽水對照孔的紅細胞呈明顯鈕扣狀沉到孔底時及時判定結果，判定過早則血凝價易判高，判定過晚則紅細胞從病毒表面脫落造成錯判，結果不再有意義。

2.6 血凝抑制試驗

稀釋血清時要注意避免產生氣泡，以免影響結果的準確性。四單位病毒液和紅細胞懸液加樣時應由后往前懸滴加入，避免移液器吸頭與孔內液體接觸，保證結果的準確性。血清加樣前要混勻，四單位病毒和紅細胞懸液要邊搖勻邊加樣，保證每孔加的樣品量和濃度一致[5]。操作時間和結果判定要嚴格按照國際標準規定的要求，在生理鹽水對照孔紅細胞呈明顯鈕扣狀沉淀到孔底時判定結果，并且陽性對照和陰性對照成立。判定過早則血凝抑制價易判低，反之則易判高。

3 提高選手心理素質，體現操作的藝術美

該項目比賽不僅要測出雞血清中的抗體效價，而且要給評委和觀眾展現出操作的藝術美。例如，離心時一人應站在離心機前面，目視離心機，以防出現事故；不進行操作時身體一定要坐直，不能東倒西歪或東張西望，更不能聊天，應該用肢體語言交流，心里想著下一步的操作等。

3.1 心理素質訓練

心理因素在比賽中起著重要的作用，很大程度上影響參賽學生操作水平的正常發揮[6]。針對學生在賽前和比賽場上會出現緊張和焦慮的情緒，必須進行有針對性的訓練。首先指導教師應隨時了解每名參賽學生產生緊張和焦慮的原因，有的放矢地做好心理輔導；其次讓選手當老師，給其他班級上實驗課；最后通過組織多次比賽，請學院領導、教師和行業企業專家當評委，以及用錄像機拍攝操作全過程等，盡可能模擬比賽現場，制造緊張氣氛，提高學生的心理素質，使參賽學生在比賽中能夠鎮定自若地處于最佳狀態，發揮出最好的水平。

3.2 應變能力訓練

在模擬競賽和真正比賽中會出現一些小差錯，例如吸頭盒打不開蓋或采血前沒有準備干酒精棉球等。比賽前應當多設計情境。首先，教會學生如何避免此類事情的發生；其次，訓練學生遇到問題時應冷靜處理，例如吸頭盒打不開蓋，另一名學生馬上打開，做到二人配合等。平時訓練時讓每名學生都能獨立完成全程操作，做到心中有數，這樣才能更好地配合。

4 總結

在訓練過程中用評分標準來衡量，國標是準則，熟練是目的，細節是關鍵。要掌握這項操作的要領，提高檢測結果的準確性，在比賽中取得較好的成績，在每個環節的操作過程中都有一些細節需要注意。

4.1 儀器標識

在儀器標識的過程中，對離心管蓋也要做好標識。

4.2 采血

采血時盡量做到一針見血，進針時針頭斜面朝上，先從血管側面刺穿皮膚，然后挑起皮膚穿透血管壁，沿血管走向平行進針，采血量控制在3 mL左右。拔針時為了避免血液滴出，可將針管稍微向后退一下，同時一手用干棉球壓住進針點，一手迅速拔針。

4.3 天平的使用

在配平過程中為了避免溶血發生，盡量做到血液管始終比生理鹽水管重，在配的過程中只向生理鹽水管中加而不向血液管中加，更不能從管中吸出。

4.4 1%紅細胞配制

在紅細胞洗滌過程中，注入生理鹽水及反復吹吸混勻力度不能過大，避免溶血；配置1%紅細胞時，提前加好生理鹽水，將足量的紅細胞分點加入生理鹽水中，盡量將槍頭吹吸干凈，否則影響實驗結果。

4.5 血凝實驗

判定血凝實驗結果時，往往會出現兩個相近結果不好確定的現象，這時為了驗證血凝實驗結果的準確性，可以通過回歸實驗來檢驗。