XpertMTB/RIF 聯(lián)合T-SPOT-TB檢測(cè)對(duì)菌陰肺結(jié)核的診斷價(jià)值

李娜 閻少波

[摘要] 目的 探討XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測(cè)技術(shù)對(duì)菌陰肺結(jié)核的診斷價(jià)值。方法 方便選取2017年5月—2019年2月間該院收治的懷疑為肺結(jié)核、痰涂片陰性的對(duì)象276例作為研究對(duì)象，均進(jìn)行Xpert MTB/RIF聯(lián)合T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)。結(jié)果 最終確診菌陰肺結(jié)核204例、非結(jié)核72例。血清T‐SPOT-TB靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率分別為70.59%、83.33%、92.31%、50.00%、73.91%，Xpert MTB/RIF則為40.68%、100.00%、100.00%、37.30%、56.16%，聯(lián)合則為80.39%、83.33%、93.18%、60.00%、81.16%。聯(lián)合診斷靈敏度與陰性預(yù)測(cè)值、符合率顯著高于Xpert MTB/RIF（P<0.05），Xpert MTB/RIF特異度顯著高于血清T‐SPOT-TB（P<0.05），血清T‐SPOT-TB陰性預(yù)測(cè)值低于聯(lián)合，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測(cè)技術(shù)是一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的方法，且能夠提高菌陰（即痰涂陰培陰）肺結(jié)核患者發(fā)現(xiàn)率及早期診斷率。

[關(guān)鍵詞] 涂陰;肺結(jié)核;XpertMTB/RIF;T-SPOT-TB;診斷;靈敏度

[中圖分類(lèi)號(hào)] R4? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2020）06（c）-0062-03

The Diagnostic Value of XpertMTB / RIF Combined with T-SPOT-TB Detection for Bacterial Negative Tuberculosis

LI Na， YAN Shao-bo

First Pulmonary Ward， Yantai Pulmonary Hospital， Yantai， Shandong Province， 264001 China

[Abstract] Objective To explore the diagnostic value of XpertMTB / RIF combined with T-SPOT-TB detection technology for bacterial negative tuberculosis. Methods From May 2017 to February 2019， 276 patients with suspected pulmonary tuberculosis and negative sputum smears who were admitted to the hospital were conveniently selected as the research subjects. All were performed with Xpert MTB / RIF combined T cell spot test. Results 204 cases of bacillary tuberculosis and 72 cases of non-tuberculosis were finally diagnosed. Serum T-SPOT-TB sensitivity， specificity， positive predictive value， negative predictive value， coincidence rate were 70.59%， 83.33%， 92.31%， 50.00%， 73.91%， Xpert MTB / RIF was 40.68%， 100.00%， 100.00%， 37.30%， 56.16%， the joint is 80.39%， 83.33%， 93.18%， 60.00%， 81.16%. The combined diagnostic sensitivity， negative predictive value， and coincidence rate were significantly higher than Xpert MTB/RIF（P<0.05）， and the specificity of Xpert MTB / RIF was significantly higher than serum T-SPOT-TB （P<0.05）， The negative predictive value of serum T-SPOT-TB was lower than the combination （P<0.05）， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion XpertMTB / RIF combined with T-SPOT-TB detection technology is a simple， fast， and accurate method， and can improve the detection rate and early diagnosis rate of patients with tuberculosis of yin （ie， phlegm smearing yin and peiyin）， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Smear negative; Tuberculosis; XpertMTB / RIF; T-SPOT-TB; Diagnosis; Sensitivity

目前我國(guó)仍是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家，2010年全國(guó)結(jié)核病第5次流調(diào)顯示菌陽(yáng)肺結(jié)核患者在逐漸下降，無(wú)癥狀菌陰結(jié)核比例在升高，菌陰肺結(jié)核約占所有肺結(jié)核的60%左右[1]。早期發(fā)現(xiàn)痰涂片陰性肺結(jié)核及耐多藥結(jié)核病，并盡快開(kāi)展肺結(jié)核規(guī)范化療，對(duì)結(jié)核患者尤其菌陰肺結(jié)核患者的早診斷、早治療對(duì)有效地控制結(jié)核病傳播有重要的公共衛(wèi)生和社會(huì)意義。盡管新的診斷方法不斷涌現(xiàn)，但能提供快速、準(zhǔn)確的診斷技術(shù)卻是很少。XpertMTB/RIF技術(shù)是由美國(guó)的Cepheid公司研發(fā)的一項(xiàng)基于MTB核酸擴(kuò)增為基礎(chǔ)的全自動(dòng)分子診斷方法[2]。目前痰Xpert MTB/RIF及血T-SPOT-TB的聯(lián)合應(yīng)用尚不廣泛，Xpert MTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB快速診菌陰肺結(jié)核（涂陰培陰）目前更是少有報(bào)道。該課題方便選取2017年5月—2019年2月該院收治的懷疑為肺結(jié)核、痰涂片陰性的276例患者作為研究對(duì)象，將Xpert MTB/RIF及T-SPOT-TB聯(lián)合檢查，與傳統(tǒng)的結(jié)核菌培養(yǎng)相比，評(píng)價(jià)其對(duì)菌陰肺結(jié)核的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取醫(yī)院收治的懷疑為肺結(jié)核、痰涂片陰性的276例患者作為研究對(duì)象，根據(jù)臨床診斷結(jié)果，將患者分為菌陰肺結(jié)核組和非結(jié)核組，包括菌陰組204例患者和非結(jié)核組72例患者，菌陰組204例患者中男134例、女70例，年齡（53.7±13.9）歲。合并矽肺1例，合并糖尿病9例;合并慢性乙型肝炎2例;合并慢性阻塞性肺病3例。非結(jié)核組72例患者中男45例、女27例，年齡（55.0±13.6）歲。合并糖尿病3例;合并慢性乙型肝炎1例;合并慢性阻塞性肺病1例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①懷疑為肺結(jié)核，采用PPD皮試、X線檢查等懷疑為肺結(jié)核;②擬診依據(jù)臨床特點(diǎn)（例如咳嗽、咯血、發(fā)熱、乏力、消瘦、夜間盜汗）、影像學(xué)特點(diǎn)（例如結(jié)節(jié)、肺炎、空洞、胸膜炎）等（肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)WS288-2008），最終經(jīng)診斷性抗結(jié)核治療有效明確診斷;③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：痰涂片及痰培養(yǎng)陽(yáng)性患者。最終276例患者進(jìn)入該研究，兩組性別（χ2=0.237，P=0.626）、年齡（t=0.680，P=0.274）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。該研究經(jīng)該院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并經(jīng)入選患者或家屬知情同意。

1.2? 方法

1.2.1? T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)? 所有患者均予以結(jié)核感染 T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)，使用診斷試劑盒，嚴(yán)格按操作流程進(jìn)行，判斷標(biāo)準(zhǔn)：檢測(cè)孔數(shù)與陰性孔之差為 6 及以上，即為陽(yáng)性（陰性孔為 0～5 個(gè)），檢測(cè)孔斑點(diǎn)數(shù)為陰性孔兩倍及以上，即為陽(yáng)性（陰性孔為6及以上）。此次采取分層法，分層 1 ：陰性孔為 0～5 個(gè)，檢測(cè)孔數(shù)與陰性孔之差為 6 及以上，陰性孔為 6 個(gè)及以上，檢測(cè)孔斑點(diǎn)數(shù)為陰性孔兩倍及以上。分層 2 ：陰性孔與抗原 B 或 A 計(jì)數(shù)之差﹥ 20。分層 3 ：陰性孔數(shù)分別與抗原 B 及 A 計(jì)數(shù)之差均超過(guò) 20。

1.2.2? GeneXpert/RIF檢測(cè)? 取1 mL痰液標(biāo)檢測(cè)放入前處理管，加入相當(dāng)于痰液標(biāo)本體積兩倍的SR痰標(biāo)本處理液，將處理管放置在漩渦振蕩器震蕩20 s，直至無(wú)可見(jiàn)的塊狀標(biāo)本，靜置15 min，以無(wú)菌吸管吸取2 mL液化后眼部，緩緩轉(zhuǎn)入到Cartridge反應(yīng)試劑盒中，將其轉(zhuǎn)移到檢測(cè)模塊中，儀器進(jìn)行自動(dòng)化檢測(cè)。檢測(cè)的原理：堿處理-中和離心沉淀法處理提取于DNA，加入抗原試劑A、B處理后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增、雜交，判斷陽(yáng)性以及耐藥情況。

1.3? 觀察指標(biāo)

觀察患者Xpert MTB/RIF、血清T‐SPOT-TB及Xpert MTB/RIF聯(lián)合血清T‐SPOT-TB的肺結(jié)核檢出結(jié)果，比較三者對(duì)肺結(jié)核的檢出率。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

以SPPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用率%表示，比較采用χ2檢驗(yàn)， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 不同檢測(cè)方法診斷肺結(jié)核的結(jié)果對(duì)比

276例，其中為菌陰肺結(jié)核204例、非結(jié)核72例。血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF、聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2? 不同檢測(cè)方法診斷菌陰肺結(jié)核的效用對(duì)比

菌陰肺結(jié)核204例、非結(jié)核72例。血清T‐SPOT-TB靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率分別為70.59%、83.33%、92.31%、50.00%、73.91%，Xpert MTB/RIF則為40.68%、100.00%、100.00%、37.30%、56.16%，聯(lián)合則為80.39%、83.33%、93.18%、60.00%、81.16%。聯(lián)合診斷靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值與符合率均顯著高于Xpert MTB/RIF;血清T‐SPOT-TB特異度低于Xpert MTB/RIF;血清T‐SPOT-TB陰性預(yù)測(cè)值低于聯(lián)合，診斷效能差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3? 討論

肺結(jié)核是常見(jiàn)的呼吸道傳染病，我國(guó)是結(jié)核病的高發(fā)國(guó)家，2015年估算新發(fā)肺結(jié)核病例91.8萬(wàn)[3]。近年來(lái)，因人口老齡化、地區(qū)發(fā)展差異、環(huán)境變化及HIV感染等，肺結(jié)核發(fā)生率呈波動(dòng)上升趨勢(shì)，肺結(jié)核的預(yù)后與診斷時(shí)間關(guān)系密切，及早診斷治療非常關(guān)鍵[4]。痰涂片檢查是診斷肺結(jié)核的常用方法，但是涂陽(yáng)性率較低，約30%～40%，從而導(dǎo)致延遲診斷、預(yù)后不佳[5]。Xpert MTB/RIF及T-SPOT.TB是兩種新型的診斷技術(shù)，對(duì)菌陰肺結(jié)核診斷的診斷效能顯著提高。該次研究顯示，相較于單獨(dú)應(yīng)用，血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF聯(lián)合應(yīng)用的均衡性有所提升，其中特異度無(wú)明顯的改善，但是靈敏度、符合率和陰性預(yù)測(cè)值明顯上升，可以在很大程度上減少漏診，同時(shí)又不增加誤診，利于菌陰肺結(jié)核早期診斷。目前有關(guān)于血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF診斷涂陰肺結(jié)核的效用研究較多[6]。該文結(jié)果示，T‐SPOT-TB在診斷菌陰肺結(jié)核的敏感性和特異性分別為70.59%、83.33%，與有關(guān)報(bào)道[7-8]的T‐SPOT-TB對(duì)結(jié)核病的診斷敏感性、特異性均在85%以上的結(jié)論大致相仿。有報(bào)道顯示，以臨床診斷為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，Xpert MTB/RIF在涂陰肺結(jié)核的檢出率在42.74%～58.1%[9]，靈敏度可達(dá)73%[10-11]，然而該研究Xpert MTB/RIF檢出率為30.07%（83/276），靈敏度僅40.68%，顯著低于上述研究結(jié)果，分析其原因，可能與該文納入標(biāo)準(zhǔn)非常嚴(yán)格有關(guān)（在以臨床診斷為標(biāo)準(zhǔn)的涂陰肺結(jié)核基礎(chǔ)上，又排除了培陽(yáng)病例，即僅納入涂陰培陰的臨床診斷病例）。單就該研究結(jié)果分析，T‐SPOT-TB與Xpert MTB/RIF聯(lián)合診斷靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值與符合率均顯著高于單用Xpert MTB/RIF;Xpert MTB/RIF特異度顯著高于血清T‐SPOT-TB（P<0.05）;血清T‐SPOT-TB陰性預(yù)測(cè)值低于聯(lián)合（P<0.05），提示XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測(cè)技術(shù)可顯著提高菌陰肺結(jié)核的診斷符合率（P<0.05） ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測(cè)技術(shù)是一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的方法，兩種技術(shù)檢測(cè)的原理不同，理論上可以聯(lián)合，不僅能明顯提高診斷的效用，還可以彌補(bǔ)兩種技術(shù)單獨(dú)使用的缺陷，將菌陰（即痰涂陰培陰）肺結(jié)核患者發(fā)現(xiàn)率及確診率提高40%左右，并顯著縮短其診斷時(shí)間，提前菌陰肺結(jié)核的開(kāi)始治療時(shí)間，更加積極有效地治愈現(xiàn)癥肺結(jié)核患者，減少結(jié)核病的傳播。

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（收稿日期：2020-03-23）

[作者簡(jiǎn)介] 李娜（1983-），女，河南扶溝人，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：結(jié)核病的診斷與治療。