潰結靈口服、青蒲方保留灌腸聯合美沙拉秦緩釋顆粒治療潰瘍性結腸炎臨床觀察※

陸喜榮 徐進康 陶鳴浩 楊 煒 胡 蕓

(南京中醫藥大學附屬昆山市中醫醫院脾胃肝膽科，江蘇 昆山 215300)

潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis,UC)是一種累及直結腸黏膜和黏膜下層的特發性炎癥，主要臨床表現為中下腹部脹痛，解赤白膿血便，往往伴有肛門燒灼感及里急后重感[1]。目前，現代醫學對UC的療效不甚理想[2]，且UC病情容易反復，需要長期服藥，增加了患者的痛苦。中醫藥對UC的治療積累了豐富的經驗，治病求本，標本兼治。江蘇省名中醫徐進康教授認為，UC活動期病機以腸道濕熱為標，脾胃虛弱為本。2017-01—2019-05，我們采用潰結靈口服、青蒲方保留灌腸聯合美沙拉秦緩釋顆粒治療UC患者40例，并與美沙拉秦緩釋顆粒治療40例患者對照，觀察對白細胞介素6(IL-6)的表達及其基因甲基化的影響，結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 全部80例均為我院脾胃肝膽科門診UC患者，按照隨機數字表法分為2組。治療組40例，男22例，女18例；年齡22～69歲，平均(39.17±7.81)歲；病程2～26個月，平均(9.17±3.52)個月。對照組40例，男21例，女19例；年齡20～67歲，平均(38.95±6.42)歲；病程2～24個月，平均(8.97±3.84)個月。2組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 病例選擇

1.2.1 西醫診斷標準 參照《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見(2012年，廣州)》[3]診斷標準，并結合患者臨床表現、腸鏡檢查及腸黏膜組織學檢查確診。

1.2.2 中醫辨證標準 參照《潰瘍性結腸炎中西醫結合診療指南(草案)》[4]，辨證為大腸濕熱、脾氣虛弱證，主要表現：腹瀉，黏液膿血便，腹痛，腹脹，里急后重，肛門灼痛，納差食少，肢體倦怠。舌質紅，邊有齒痕，苔薄黃或黃膩，脈滑數或脈沉細。

1.2.3 納入標準 符合UC西醫診斷標準及中醫辨證標準；入選年齡18～70歲；UC分期為活動期，嚴重程度為輕、中度[3]；本研究經我院醫學倫理委員會審批通過；患者知情同意，均簽署知情同意書。

1.2.4 排除標準 病情程度為重度；發生并發癥如腸道局部狹窄、腸道梗阻、腸穿孔、中毒性結腸擴張；妊娠期、哺乳期婦女；合并心、肝、肺、腎等影響其生存的嚴重疾病。

1.2.5 剔除標準 患者自行要求退出本研究或者失訪；患者不能按時服用藥物或按時檢查；在研究觀察期間，患者出現其他危重疾病，不能完成本研究。

1.3 治療方法

1.3.1 對照組 予美沙拉秦緩釋顆粒(上海愛的發制藥有限公司，國藥準字H20143164)1.0 g，每日4次口服，4周為1個療程。

1.3.2 治療組 在對照組治療基礎上予潰結靈口服聯合青蒲方保留灌腸。①潰結靈藥物組成：白頭翁30 g，馬齒莧15 g，黃連6 g，黃芩10 g，白術15 g，檳榔15 g，枳殼10 g，木香10 g，白芍20 g，陳皮10 g，厚樸10 g，白扁豆30 g，建曲10 g，薏苡仁30 g，冬瓜子10 g，升麻3 g。日1劑，水煎2次取汁400 mL，分早、晚2次口服。②青蒲方藥物組成：青黛3 g，蒲公英30 g，白頭翁30 g，馬齒莧30 g，赤芍30 g，黃柏炭10 g，黃連10 g。日1劑，濃煎取汁100 mL，冷卻至37 ℃左右，晚餐后30 min行保留灌腸，灌腸時患者臀高頭低位，灌腸過程中取旋轉體位：右側臥位—俯臥位—左側臥位，每種體位時間為10 min，30 min灌腸完畢取側臥位、俯臥位、仰臥位，每15 min變換1次體位，保持1 h以上，以后取自由體位。

1.3.3 療程 2組均4周為1個療程，共治療1個療程。

1.4 觀察指標

1.4.1 癥狀評分 2組治療前后均參照《中藥新藥臨床研究指導原則(試行)》[6]對主要癥狀進行評分，腹瀉、膿血便、腹痛、腹脹癥狀由輕到重，分別記2、4、6分，無癥狀記0分，肛門灼熱、里急后重根據有、無，分別記1、0分。

1.4.2 C反應蛋白(CRP)、紅細胞沉降率(ESR)及糞鈣衛蛋白檢測 2組治療前后均清晨空腹取靜脈血，采用電化學發光法檢測CRP、ESR，試劑盒購自上海澳普生物醫藥有限公司。取早晨糞便20 g行糞鈣衛蛋白檢測，采用酶聯免疫吸附法，試劑盒購自瑞士Buhlmann公司。

1.4.3 腸黏膜組織及血清IL-6檢測 治療前后查腸鏡，取病變腸黏膜組織2塊，回盲部、乙狀結腸、直腸黏膜組織各2塊，采用免疫組化法檢測腸黏膜組織IL-6表達，試劑盒購自上海澳普生物醫藥有限公司。血清IL-6水平采用酶聯免疫吸附法，試劑盒購自上海澳普生物醫藥有限公司。

1.4.4 IL-6基因啟動子區CpG位點甲基化檢測 加入蛋白酶K消化腸黏膜組織碎塊，沉淀DNA后使用酶標儀測定DNA樣本濃度。用亞硫酸氫鹽修飾DNA樣本，使未甲基化的胞嘧啶(C)全部轉化為尿嘧啶(U)，使用甲基化特異性聚合酶鏈式反應(MSP)引物進行聚合酶鏈式反應(PCR)擴增(引物序列見表1)，將PCR產物與緩沖液混勻后加入瓊脂糖凝膠中，電泳成像并保存。

表1 MSP檢測IL-6啟動子區CpG位點甲基化引物序列

1.5 療效標準 完全緩解：癥狀消失，腸鏡檢查見結腸黏膜大致正常；有效：癥狀基本消失，腸鏡檢查見黏膜輕度炎癥或假息肉形成；無效：癥狀、腸鏡和病理檢查結果均無改善[5]。

2 結 果

2.1 2組治療前后癥狀評分比較 見表2。

表2 2組治療前后癥狀評分比較 分，

由表2可見，治療后治療組各項癥狀評分均較本組治療前降低(P<0.05)，對照組腹瀉、膿血便、腹脹、肛門灼熱及里急后重評分均降低(P<0.05)，且治療后治療組腹瀉、膿血便、腹痛、里急后重評分均低于對照組(P<0.05)。

2.2 2組治療前后CRP、ESR及糞鈣衛蛋白比較 見表3。

表3 2組治療前后CRP、ESR及糞鈣衛蛋白比較

由表3可見，治療后2組CRP、ESR及糞鈣衛蛋白均較本組治療前降低(P<0.05)，且治療后治療組均低于對照組(P<0.05)。

2.3 2組治療前后腸黏膜組織及血清IL-6表達比較 見表4。

表4 2組治療前后腸黏膜組織及血清IL-6表達比較

由表4可見，治療后2組腸黏膜組織及血清IL-6表達均較本組治療前降低(P<0.05)，且治療后治療組均低于對照組(P<0.05)。

2.4 2組療效比較 見表5。

表5 2組療效比較 例

由表5可見，2組總有效率比較差異有統計學意義(P<0.05)，治療組療效優于對照組。

2.5 2組治療前后腸黏膜組織IL-6基因啟動子區CpG位點甲基化結果比較 見表6。

表6 2組治療前后腸黏膜組織IL-6基因啟動子區CpG位點甲基化結果比較 個

由表6可見，治療后2組腸黏膜組織IL-6啟動子區CpG位點甲基化水平均較本組治療前升高(P<0.05)，且治療后治療組甲基化水平高于對照組(P<0.05)。

3 討 論

近年來，隨著人們飲食結構的改變，UC發病率逐年上升，嚴重困擾患者的生活，且部分存在癌變的可能，給患者造成較大的心理負擔[7-8]。目前，西醫治療UC主要以口服5-氨基水楊酸(如美沙拉秦)、免疫抑制劑、糖皮質激素和生物制劑為主，但需要長期服用，極易出現耐藥及較多副作用，停藥容易復發，給患者造成了嚴重的思想及經濟負擔。中醫藥可以標本兼治，發揮整體優勢，在治療UC方面療效較顯著[9-10]。

UC屬中醫學“久痢”范疇。徐進康教授認為，UC活動期的病機為患者感受濕熱外邪，或嗜食肥甘厚味及不潔食物，濕熱疫毒內侵人體，滯于脾胃，積于腸腑，使氣血滯留，腸道不能正常傳導，大腸脈絡受損，肉腐化膿，故出現黏液膿血便；濕熱疫毒之邪使腸腑氣機阻滯，腸道不能正常傳送糟粕，不通則痛，不通則脹，故出現腹痛、腹脹；濕熱下注于肛門，肛門滯而不通，則出現肛門灼熱、里急后重感?；颊唛L期腹瀉，黏液血便，病勢遷延不愈，導致中焦脾胃受損，水谷精微運化失司，出現脾胃虛弱，正虛邪戀，清濁不分，傳導運化失調，則加重腹瀉、黏液血便、里急后重之感，使病情更加遷延難愈，周而往復，虛則更虛，實則更實。故徐教授認為，UC活動期病機以腸道濕熱為標，脾胃虛弱為本，故擬經驗方潰結靈治療，方中白頭翁、馬齒莧清熱解毒，涼血止血止?。稽S連、黃芩清熱燥濕，清除濕熱疫毒之邪；木香、厚樸、檳榔、枳殼行氣除滯；升麻提升中氣，調氣則后重自除，緩解里急后重感；行血則便膿自愈，白芍養陰活血，減少膿血便；白術、陳皮、建曲、白扁豆、薏苡仁、冬瓜子健脾益氣化濕，以治病求本，使患者脾胃功能恢復，運化得健。諸藥合用，共奏清熱化濕、健脾益氣之功效。現代藥理研究顯示，白頭翁提取物可以抑制中性粒細胞彈性蛋白酶的釋放，從而抑制UC患者炎癥介質級聯反應，達到黏膜愈合的療效[11]；馬齒莧提取物馬齒莧生物堿具有明顯的抗炎作用，可減輕UC患者腸道黏膜的損害[12]；白術可以修復腸黏膜受損的細胞，減輕結腸黏膜損傷，減少上皮細胞凋亡，促進腸黏膜細胞的再生[13]。

中藥保留灌腸亦是治療UC的一種有效手段[14]。腸鏡顯示，大部分UC患者結直腸黏膜充血、水腫、糜爛甚，結合中醫理論分析，腸鏡病變處當屬于濕熱之象，故使用清熱化濕之青蒲方保留灌腸。方中青黛、蒲公英、白頭翁清熱解毒瀉火；馬齒莧清熱涼血化濕；黃連燥濕清熱；赤芍活血化瘀；黃柏炭除清熱外，還能收澀止血。諸藥直接作用于腸道黏膜潰瘍、糜爛面，清熱解毒之效更加明顯。現代藥理研究表明，青黛可以降低UC患者的炎癥因子水平，從而減輕對腸黏膜的損傷，促進腸黏膜修復[15]。采用旋轉體位進行灌腸治療，可以促進灌腸液與腸道黏膜面充分接觸，防止部分腸道黏膜得不到藥物治療。

本研究結果顯示，潰結靈口服聯合青蒲方保留灌腸治療UC效果明顯，總有效率92.5%，優于對照組(P<0.05)，在緩解各癥狀方面均比治療前有明顯好轉，緩解腹瀉、膿血便、腹痛、里急后重優于對照組(P<0.05)。潰結靈方中健脾益氣藥物治病求本，使患者脾胃功能恢復，運化得健，故可減少腹瀉，且療效持久。清熱藥可以快速清熱化濕，去除病因，同時加用白芍、赤芍活血行氣，行血則便膿自愈，通過清熱行血可迅速減少膿血便，緩解腹痛，促進疾病的恢復。西醫治療里急后重效果不明顯，選用木香、枳殼、升麻調氣則后重自除，癥狀迎刃而解。

血清CRP、ESR可以反映UC患者腸道的炎癥情況。糞便鈣衛蛋白是一種腸道炎癥細胞活化的標志，可以明確腸道是否有炎癥[16]。本研究結果顯示，治療后2組CRP、ESR及糞鈣衛蛋白均降低(P<0.05)，且治療后治療組低于對照組(P<0.05)。說明潰結靈口服聯合青蒲方保留灌腸可以較好地改善UC腸道炎癥。

IL-6是UC發病中重要的炎癥因子，在病情的發展與預后評估中起到重要作用。有研究證實，UC患者血液中IL-6的表達高于健康人，并且與結腸黏膜壞死程度有顯著相關性[17]。另有研究表明，UC小鼠的腸黏膜IL-6表達高于正常小鼠[18]。同時DNA甲基化在UC患者的發病機制中起十分重要的作用。本研究顯示，UC患者IL-6基因啟動子區的甲基化水平較健康人顯著降低，血清和腸黏膜IL-6水平升高[19]，說明IL-6基因啟動子區的甲基化水平降低促進IL-6的高表達，最終影響UC的進展。本研究結果顯示，治療組腸黏膜組織中IL-6甲基化水平提高，腸黏膜組織及血清IL-6表達降低，與對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05)。

綜上所述，潰結靈口服、青蒲方保留灌腸聯合美沙拉秦緩釋顆粒治療UC有效率高，能夠較快較好地減輕各臨床癥狀，控制腸道炎癥，值得臨床推廣。提高腸道黏膜組織IL-6甲基化水平，降低腸黏膜及血清IL-6表達為其治療UC的作用機制之一。在下一步的研究中，進一步挖掘中醫藥的治療優勢，明確潰結靈口服聯合青蒲方保留灌腸對重度UC是否也有一定的治療作用。