C-myc過表達促進宮頸上皮內瘤變的Meta分析

熊敏涵，秦恩杰，袁煒，孟沙，沐超，成瑩，胡新榮

·調查與研究·

C-myc過表達促進宮頸上皮內瘤變的Meta分析

熊敏涵，秦恩杰，袁煒，孟沙，沐超，成瑩，胡新榮

523000 東莞，廣東醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理教研室

宮頸癌（cervical cancer，CC）是我國最常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，對女性健康造成了巨大的威脅。據報道，近年來我國每年新發(fā)宮頸癌患者 10 萬余人，宮頸癌患者的死亡率為 2.60/10 萬[1]。隨著對宮頸癌發(fā)病機制研究的進一步深化，發(fā)現(xiàn)宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展與原癌基因的表達失衡、細胞生長周期的調節(jié)紊亂等因素存在密切關系[2]。宮頸上皮內瘤變（cervical intra-epithelial neoplasia，CIN）與宮頸癌密切相關，其中，宮頸 CIN II ~ CIN III 具有發(fā)展為宮頸癌的潛在風險。進行宮頸癌致病機制的研究，積極尋找可靠的診治靶點，對于提高宮頸癌患者的生存率、改善患者預后具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標準

1.1.1 研究類型 國內外公開發(fā)表的、并提供原始數(shù)據的 C-myc 蛋白在 CINs 中表達差異的病例-對照研究，文種限中、英文。C-myc 蛋白檢測方法為鏈菌素親生物素-過氧化物酶免疫組織化學法（SP 法，陽性界定值 > 10%）。

1.1.2 納入標準 ①全部受試者取材前都未經放療或化療；②病例診斷標準明確，研究方法相似，且為病例-對照研究；③全部受試者不界定種族和國籍。

1.1.3 排除標準 ①無相應對照組及對照來源；②非 SP 法或陽性判定標準不一致；③相同作者重復報道；④綜述和摘要。

1.2 檢索策略

檢索自數(shù)據庫建庫到 2019 年 10 月期間 CNKI、PubMed、Embase、 Medline、CBMdisc、維普及萬方等數(shù)據庫，并輔以文獻追溯的方法。中文檢索詞包括宮頸上皮內瘤變、病例對照研究。英文檢索詞包括 C-myc；cervical intraepithelial neoplasias；case-control study。

1.3 文獻篩選與資料提取

文獻的篩選、提取由兩位研究人員獨立進行，最終根據納入與排除標準決定文獻是否被納入。提取內容包括：文題、編號、作者姓名、發(fā)表年限、納入病例年齡范圍、樣本大小、CINs 中 C-myc 表達陽性例數(shù)等。

1.4 統(tǒng)計學處理

首先通過 RevMan5.3 對各個納入研究進行程序性操作分析。其中效應量的選擇經查找相關資料，選定優(yōu)勢比（OR）和 95% 可信區(qū)間（95%CI）。先對所納原始數(shù)據行異質性檢驗（χ2檢驗，α = 0.1）。采用值及2進行異質性檢驗，若> 0.10，各研究間不存在異質性，若< 0.10，研究間存在異質性。2代表研究間的異質性水平，可分為4 級：0 ~ 40% 表示各研究間存在輕度異質性；40% ~ 60% 表示各研究間存在中度異質性；60% ~ 75% 表示各研究間異質性較大；75% ~ 100% 表示各研究間存在非常大的異質性。根據 Cochrane 建議，推薦2不宜大于 40%，其異質性可以接受，采用固定效應模型進行分析；反之異質性較大，采用隨機效應模型，需通過敏感性分析，尋找到異質性原因，以消除其影響。

2 結果

2.1 文獻檢索結果

初步檢索 345 篇相關文獻，經嚴格標準篩選后，共納入 10篇[3-12]文獻，共1744 例受試者，包含正常宮頸（NC 組） 302 例和 CINs 968 例（其中 CIN I 337 例、CIN II303 例、CIN III 328 例），宮頸癌組 474 例。文獻篩選流程見圖 1。

2.2 納入研究的基本特征和方法學質量評價

其中 10 個研究報道了 NC 組、 CIN I級、CIN II級、CIN III級、宮頸癌組中 C-myc 的蛋白表達情況[3-12]。納入研究相關信息和 NOS 評分見表 1。

2.3 Meta 分析結果

2.3.1 CIN 組與 NC 組 共 10 個研究報道了 CIN 組（968 例）與 NC 組（302 例）中 C-myc 蛋白表達情況[3-12]。森林圖顯示2= 55%，= 0.02，各組間存在中度異質性，符合隨機效應模型條件，可知關于 C-myc 蛋白表達陽性率，CIN 組大于 NC 組[OR = 10.74，（4.34，26.55），< 0.00001]（圖 2）。

2.3.2 宮頸癌組與 CIN 組 共 10 個研究報道了宮頸癌組（474 例）與 CIN 組（968 例）中 C-myc 蛋白表達情況[3-12]。森林圖顯示2= 66%，= 0.002，各組間存在高度異質性，符合隨機效應模型條件，可知關于 C-myc 蛋白表達陽性率，宮頸癌組大于 CIN 組[OR = 7.79，95%CI（4.51，13.45），< 0.00001]（圖 3）。

圖 1 文獻篩選流程與結果

表 1 納入研究基本特征和 NOS 評分

2.3.3 CIN I與 NC 組 共 10 個研究報道了 CIN I組（337 例）與 NC 組（302 例）中 C-myc 的蛋白表達情況[3-12]。森林圖顯示2= 33%，= 0.14，各組間無異質性，符合固定效應模型條件，可知關于 C-myc 表達陽性率，CIN I組大于 NC 組[OR = 5.83，95%CI（3.26，10.44），< 0.00001]（圖 4）。

2.3.4 CIN II組與 CIN I組 共 10 個研究報道了 CIN II 組（303 例）與CIN I組（337 例）中 C-myc 的蛋白表達情況[3-12]。森林圖顯示2= 32%，= 0.15，各組間無異質性，符合固定效應模型條件，可知關于 C-myc 表達陽性率，CIN II組大于 CIN I組[OR = 2.24，95%CI（1.55，3.24），< 0.0001]（圖 5）。

2.3.5 CIN III組與 CIN II組 共 10 個研究報道了 CIN III組（328 例）與 CIN II組（303 例）中 C-myc 的蛋白表達情況[3-12]。森林圖顯示，2= 27%，= 0.20，各組間無異質性，符合固定效應模型條件，可知關于 C-myc 表達陽性率，CIN III組大于 CIN II組[OR = 3.48，95%CI（2.40，5.06），< 0.00001]（圖 6）。

圖 2 CIN 組與 NC 組 C-myc 蛋白表達的 Meta 分析

圖 3 宮頸癌組與 CIN 組 C-myc 蛋白表達的 Meta 分析

圖 4 CIN I 與 NC 組 C-myc 蛋白表達的 Meta 分析

2.3.6 宮頸癌組與 CIN III組 共 10 個研究報道了宮頸癌組（474 例）與CIN III組（328 例）中 C-myc 的蛋白表達情況[3-12]。森林圖顯示2= 72%，= 0.0002，各組間存在高度異質性，符合隨機效應模型條件，可知關于 C-myc 表達陽性率，宮頸癌組大于 CIN III組[OR = 2.95，95%CI（1.38，6.33），= 0.005]（圖 7）。

2.3.7 敏感性分析 為探究各研究間的異質性是否由單個研究引起的，本研究就具有中高度異質性的 CIN 組與 NC 組、宮頸癌組與CIN 組、宮頸癌組與CIN III組的研究進行敏感性分析，通過逐個剔除單個研究對合并效應進行分析，見表 2 ~ 4。

CIN 組與 NC 組中納入所有研究的 C-myc 蛋白表達的合并效應為OR = 10.74，95%CI（4.34，26.55），2=

55%，< 0.00001。表 2 中顯示剔除劉海青[5]的研究后，OR = 7.96，95%CI（3.92，16.14），2= 26%，< 0.00001，異質性顯著降低。剔除其他單個研究后，OR 為9.46 ~ 13.22，2為 48% ~ 61%，< 0.00001，異質性變化不明顯。

圖 5 CIN II 組與 CIN I 組 C-myc 蛋白表達的 Meta 分析

圖 6 CIN III 組與 CIN I 組 C-myc 蛋白表達的 Meta 分析

圖 7 宮頸癌組與 CIN III 組 C-myc 蛋白表達的 Meta 分析

宮頸癌組與 CIN 組中納入所有研究的 C-myc 蛋白表達的合并效應為OR = 7.79，95%CI（4.51，13.45），2= 66%，< 0.00001。表 3 中顯示剔除車愛文[8]的研究后，OR = 6.40，95%CI（4.03，10.17），2= 50%，< 0.00001，異質性降低較明顯。剔除其他單個研究后，OR 為7.17 ~ 8.81，2為 61% ~ 69%，< 0.00001，異質性變化不明顯。

宮頸癌組與 CIN III組中納入所有研究的 C-myc 蛋白表達的合并效應為OR = 2.95，95%CI（1.38，6.33），2= 72%，= 0.0002。表 4 中顯示剔除車愛文[8]的研究后，OR = 2.20，95%CI（1.19，4.09），2= 54%，= 0.01，異質性降低較明顯。剔除其他單個研究后，OR 為 2.51 ~ 8.56，2為 68% ~ 75%，為 0.003 ~ 0.02，異質性變化不明顯。

表 2 剔除單個研究后 CIN 組與 NC 組的合并效應

表 3 剔除單個研究后宮頸癌組與 CIN 組的合并效應

表 4 剔除單個研究后 CIN III 組與宮頸癌組的合并效應

3 討論

宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居女性惡性腫瘤第二位。隨著宮頸癌病因學的研究發(fā)展，發(fā)現(xiàn)它的發(fā)生和發(fā)展是一個長期的、多因素相關的復雜病理過程[13-14]。

研究報道，由 CINs 各級別轉歸至宮頸癌的發(fā)生率分別為 15%、30% 和 45%[15]。但是由什么原因促使 CINs 進展還未可知。因此，找到一個相關 CINs 進展的分子標志，對進展型 CINs 的早期診斷及早期治療并中斷宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展尤為重要。

C-myc 基因位于 8 號染色體長臂 24 區(qū)域（8q24），全長 6 ~ 7 kb，含有3 個外顯子[16]。C-myc 作為癌干細胞重編程因子，促進癌細胞無限增殖及增加惡性程度[17-18]，C-myc 的表達預示癌干細胞特性的形成[19]，可作為預測子宮頸疾病進展的標志物。

本次系統(tǒng)評價顯示，C-myc 基因在 NC 組中相對低表達，在 CIN I~ CIN II 相對中等表達，在 CIN III及宮頸癌中相對高表達，與一些學者的獨立研究報道的結果[3-5, 7-12]一致，提示 C-myc 異常表達可增加正常宮頸向癌前病變發(fā)生的可能，并且在不同級別的 CINs 中，C-myc 表達趨勢同 CINs 嚴重程度相符合，表明 C-myc 可以促進 CINs 的進展。然而，在以往的相關報道中，C-myc 表達趨勢并不都同 CINs 嚴重程度相符合。例如，施浩帆等[6]認為 CIN 組和 NC 組相比，C-myc 陽性表達無顯著差異，可能與獲取的樣本來自同一醫(yī)院等相關。

本研究結果在較大數(shù)據層面支持 C-myc 蛋白表達在 NC 組、CINs組、宮頸癌組以及 CINs 各個級別比較中差異均具有統(tǒng)計學意義。綜上所述，C-myc 過表達促進了CINs 的發(fā)生和發(fā)展，檢測 C-myc 的表達有助于 CINs 的診斷及進展型 CINs 的預測。

本次研究雖已有較為全面的研究方法，但不排除存在一定的局限性：①只收集了公開發(fā)表的相關中文文獻，沒有查找到數(shù)據信息符合的英文文獻，且文獻數(shù)量偏少，不能排除發(fā)表偏倚的影響；②各研究使用的組織標本的處理方法、免疫組化操作及評價方法等因素可能會影響原始數(shù)據的一致性。因此，需要開展更多高質量的研究來進一步證實 C-myc 的表達有助于 CINs 的診斷及進展型 CINs 的預測。

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10.3969/j.issn.1673-713X.2020.06.015

國家自然科學基金（81572566）

胡新榮，Email：huxinrong@gdmu.edu.cn

2020-03-25