顯微鏡觀察血涂片之實(shí)驗(yàn)改進(jìn)

王 潔 閆 潔

（石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 新疆石河子 832030）

血涂片標(biāo)本的觀察是生物學(xué)七年級(jí)下冊(cè)“流動(dòng)的組織——血液”的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。因?yàn)槿搜灰撰@得，且經(jīng)過瑞氏染液染色后顯微鏡視野下紅細(xì)胞數(shù)量約占血細(xì)胞數(shù)量98%，所以認(rèn)識(shí)血細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及不同種類的血細(xì)胞在血液中的含量的難度增加，消磨了學(xué)生的耐心和興趣，影響教學(xué)效果。因此，教師在進(jìn)行“流動(dòng)的組織——血液”的教學(xué)時(shí)，往往會(huì)安排學(xué)生用顯微鏡觀察人血的永久涂片或者采用iPad移動(dòng)終端等現(xiàn)代信息技術(shù)向?qū)W生展示血細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。這種教學(xué)模式雖然大大提高了教學(xué)效率，但不利于培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作和探究能力，與新課標(biāo)倡導(dǎo)的核心素養(yǎng)背道而馳。因此，為了契合倡導(dǎo)的教育理念，筆者對(duì)該實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行了改進(jìn)，顯著縮短了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的時(shí)間，使實(shí)驗(yàn)更易觀察和實(shí)施。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

（1）試劑：羊血、生理鹽水（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液）、瑞氏染液。

（3）器材：載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

（1）試劑配制（教師準(zhǔn)備）：采集羊血血樣放于有抗凝劑（肝素）的試管內(nèi)；配制瑞氏染液。

（2）血涂片的制作（學(xué)生操作）：用吸管吸取羊血血樣，滴取直徑約3 mm的血液分別于2片潔凈的載玻片上；將血膜均勻推開并自然晾干；一片載玻片滴加瑞氏染液使其能夠覆蓋血膜，蓋上蓋玻片觀察紅細(xì)胞形態(tài)；一片載玻片先滴加生理鹽水使其能充分覆蓋血膜；進(jìn)而滴加適量瑞氏染液。使生理鹽水與瑞氏染液混合均勻，靜置10～15 min。用蒸餾水沖去染液，吸水紙吸干后鏡檢。

2 實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)

為了使血膜薄且連續(xù)，操作者在推片時(shí)可以先使蓋玻片與血滴有一定的距離，并使推片與載玻片呈約45°，進(jìn)而漸漸地靠近血滴，輕輕觸及血滴并勻速推進(jìn)，使血液沿載玻片端展開。

滴加生理鹽水后，靜止幾秒后就可以滴加瑞氏染液。若時(shí)間過長(zhǎng)載玻片上的血膜容易脫落。此外，生理鹽水也可以由蒸餾水替代，但是實(shí)驗(yàn)效果沒有滴加生理鹽水的效果好。

用蒸餾水沖洗染液時(shí)要注意沖洗的水流不能太大、太迅速，否則會(huì)將血膜破壞或沖洗干凈。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

因?yàn)镹aCl溶液覆蓋血膜后，在血膜外形成了一層液態(tài)膜。所以瑞氏染液與紅細(xì)胞被液態(tài)膜阻隔，避免了紅細(xì)胞與瑞氏染液的直接接觸，而帶相對(duì)較多電荷的白細(xì)胞受影響較小。因此，未經(jīng)染色的紅細(xì)胞顏色非常淺，呈現(xiàn)草綠色或淡黃色，只能隱約看見其輪廓。經(jīng)過染色之后紅細(xì)胞呈兩面凹的橘紅色圓盤狀。嗜酸性白細(xì)胞胞質(zhì)常被染成粉紅色，細(xì)胞核被染成紫紅色；嗜堿性白細(xì)胞胞質(zhì)常被染成蘭紫色；嗜中性白細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)被染成淡紅色，細(xì)胞核為藍(lán)紫色；淋巴細(xì)胞核大圓形，染成紫藍(lán)色；單核細(xì)胞的顏色比淋巴細(xì)胞淡；血小板為不規(guī)則碎塊，有細(xì)小的紫蘭色顆粒。

3.2 實(shí)驗(yàn)改進(jìn)后的優(yōu)勢(shì)

對(duì)于學(xué)生來說，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象更易觀察，不必再花大量的時(shí)間和精力尋找顯微鏡視野下不同類型的血細(xì)胞，而是一目了然。這樣不僅縮短了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的時(shí)間，而且強(qiáng)化了學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作的耐心和實(shí)驗(yàn)觀察探究的興趣。

對(duì)于教師來說，改進(jìn)后的實(shí)驗(yàn)材料——羊血更容易獲得，提高了實(shí)驗(yàn)的可行性，也更易開展實(shí)驗(yàn)教學(xué)培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)探究能力。

3 總結(jié)

新方法在顯微鏡下觀察血涂片時(shí)，紅細(xì)胞顏色非常淺，呈現(xiàn)草綠色或淡黃色，紅細(xì)胞幾乎看不見，只能隱約看見其輪廓。而鋪在載玻片上的白細(xì)胞則染色比較好，與直接滴加瑞氏染液時(shí)沒有明顯的區(qū)別。因此，學(xué)生能夠快速找到不同類型的血細(xì)胞并對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察。該操作方法明顯降低了血細(xì)胞的分類時(shí)間，增強(qiáng)了學(xué)生實(shí)驗(yàn)探究的興趣，提高了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效率和可行性。