周 羽 李 鋒 劉顯君 董 玲 李 昊 李巖濤 張險峰 張 林
(1 東北農業大學,哈爾濱 150030;2 黑龍江省種業技術服務中心,哈爾濱 150008)
玉米是我國主要糧食作物和重要的工業生產原料,其產量的高低關系國民經濟的發展。玉米(Zea maysL.)是原產中南美洲的喜溫作物,對低溫抗性較弱,溫度低于10~15℃時易遭受冷害[1]。作為我國玉米種植區之一,東北受地理位置、氣候等多種因素限制,低溫冷害已經成為影響玉米生長發育的主要非生物脅迫[2],萌發期遭遇低溫冷害會導致出苗時間延長甚至死亡,出苗率降低,抑制幼苗的正常生長發育,降低產量。
青貯玉米是一類擁有較高應用價值的飼料型玉米,但在北方地區易遭受低溫冷害而影響其生長發育和產量。玉米生長發育各時期均可能遭遇冷害,但萌發期是整個生長周期中最敏感的時期之一,據報道[3-8],發芽率(GR)、發芽指數(GI)、根長(RL)、芽長(SL)等指標均可用于評價玉米萌發期耐低溫性強弱。此外,處理組與對照組之比即相對值也可作為衡量指標[4]。為提高青貯玉米萌發期的低溫抗性,以東北農業大學玉米研究所前期選育的25 份青貯玉米自交系為材料,在萌發期進行耐低溫性鑒定,評價其抗性,以期為選育出耐低溫青貯玉米新品種提供參考。
1.1 試驗材料25 份玉米自交系:P138、東101、LX347、CA87、DNC34、DN4206、DN101、L288、DN2VK、DN8792、DN6082、XL326、DN3417、東0752、DN3517、DN6088、LX247、LX350、齊319、LX128、LX896、DN6794、LX897、DN8467、東1524。
1.2 試驗方法取狀態良好的玉米種子,于1%次氯酸鈉溶液中浸泡5min 進行消毒,去離子水沖洗3 次[9]。采用實驗室前期建立的玉米萌發期耐低溫性評價體系,分別設置處理組(10℃)和對照組(25℃),進行室內萌發期耐低溫性鑒定。每份材料選取50 粒種子,重復3 次。
水中浸泡6h 后取出種子并置于發芽紙(13cm×19cm)上,處理組采用BD-PRXD-450 人工氣候箱于10℃處理30d 后轉至15℃處理7d(濕度65%±5%、光照0lx);對照組采用MGC-250P 人工氣候箱于25℃培養6d(濕度65%±5%、光照0lx)[10]。
以胚芽鞘長度超1cm 作為發芽的判斷標準[10]。處理組10℃第30d 計算GR,15℃第7 天測量SL,并用Epson Perfection V800 根系掃描儀掃描RL、根表面積(RSA)、根平均直徑(RAD)、根體積(RV),計算SVI;對照組第6 天測量上述指標。
1.3 數據處理各指標測量及計算方式詳見表1。

表1 不同指標的測量或計算方式
為降低因材料遺傳背景帶來的差異,以相對值為指標來評價玉米自交系萌發期的耐低溫性強弱,具體計算公式如下:相對值=低溫測定值/常溫測定值
2.1 方差分析利用SPSS 26.0 對25 份玉米自交系 的RGI、RGR、RSL、RSVI、RVI、RRL、RTL 7 個指標進行單因素ANOVA 方差分析。結果表明(表2),組間僅RRL 差異不顯著,RSL 差異顯著,其余5 個指標均達極顯著水平。說明上述5 個指標在組合間存在由自交系內在遺傳因素決定的真實遺傳差異,可用作進一步分析。

表2 不同玉米自交系7 個耐低溫指標的方差分析
2.2 性狀相關性分析對25 份玉米自交系的7 個耐低溫性指標進行相關性分析。結果表明(表3),各指標均存在相關性,其中RGI 與RRL 顯著相關,其余指標間均呈極顯著相關。因此可認為除RRL外的6 個指標更適宜用于評價玉米自交系萌發期耐低溫性。

表3 不同玉米自交系7 個指標的相關性
由表4 可知,對照除LX247、DN8467 和東1524 外的22 個自交系發芽率均超過80%,說明試驗材料發芽能力較強;在10℃條件下,各自交系發芽率較對照(25℃)均出現下降。從相對發芽率看,CA87 耐低溫性最強,DNC34 次之,而DN8467 最弱;從相對發芽指數來看,DN6088 的耐低溫性最強,東101、DNC34、DN3517 次之,DN8467 和東1524 耐低溫性最弱。
2.3 聚類分析以RGR、RGI 和RVI 為基礎對25份玉米自交系進行系統聚類分析,結果表明,當半偏復相關系數的平方值為2.5 時可將其分為以下5 類(圖1):5 份高度耐低溫材料為P138、東101、LX347、CA87 和DNC34;6 份中度耐低溫材料為DN4206、DN101、L288、DN2VK、DN8792 和DN6082;5 份中性材料為XL326、DN3417、東0752、DN3517 和DN6088;5 份中度敏感材料為LX247、LX350、齊319、LX128 及LX896;4 份高度敏感材料為DN6794、LX897、DN8467、東1524,與表4 結論一致。
通過玉米萌發期低溫發芽試驗,借助方差分析、相關性分析、聚類分析等多種手段對25 份玉米自交系進行耐低溫性鑒定及評價,發現P138、東101、LX347、CA87 和DNC34 共5 份高度耐低溫材料;DN4206、DN101、L288、DN2VK、DN8792及DN6082 等對低溫也有一定抗性,均可用于農業生產,為提高玉米對低溫的耐受程度提供良好的種質資源。

表4 低溫脅迫下玉米自交系部分耐低溫指標的變化

圖1 25 份玉米自交系耐冷性等級劃分