孕婦血清IgG抗A抗B水平檢測用于早期診斷JZ〗ABO-HDN的臨床價值分析

陳 蕾 羅 明 柳月霞

河南省南陽市第二人民醫院產一科 473000

流行病學研究表明，ABO新生兒溶血病(Neonatal hemolytic disease，ABO-HDN)的發病率可超過938/萬新生兒[1]。在多胎妊娠、母體血型為O型血的孕產婦中，ABO-HDN的發病率可進一步上升[2]。臨床上ABO-HDN的發生，能夠導致新生兒病理性黃疸的發生，并能夠增加患兒核黃疸的發生風險。對于ABO-HDN的早期診斷具有重要的意義，雖然新生兒血清膽紅素水平能夠在ABO-HDN的早期診斷過程中發揮一定的篩查作用。但單純依靠膽紅素水平鑒別或者早期篩查ABO-HDN的局限性較為明顯，其干擾因素較多，診斷的一致性率較差。血清IgG抗A(B)水平是體內紅細胞膜上抗原簇誘導機體產生的抗體，其能夠通過胎盤血管進入母體，形成免疫性復合物，進而誘導紅細胞膜的破壞和溶解，加劇黃疸病情的進展[3-4]。為了揭示IgG抗A(B)水平的表達與ABO-HDN的病情關系，從而為臨床上ABO-HDN患者的早期篩查或者診斷提供參考，本次研究選取2017年6月—2018年6月在我院就診的孕婦1 120例，探討了IgG抗A(B)水平診斷ABO-HDN的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年6月—2018年6月在我院就診的孕婦1 120例，年齡20～36歲，平均年齡(28.20±4.56)歲；孕周28～39周，中位孕周30.50周。納入標準：(1)孕婦血型為O型，其丈夫為A型、B型或AB型；(2)夫妻血型均為RhD陽性；(3)孕周≥28周；(4)血清不規則抗體陰性；(5)孕婦及家屬知情同意。排除標準：(1)合并有珠蛋白生存障礙、肝炎、腎功能不全、血液系統疾病等；(2)有嚴重妊娠并發癥。

1.2 實驗方法 采集孕產婦的孕16～24周空腹靜脈血，首先進行ABO血型及RH血型的鑒定，1 500r/min離心10min后，采集上清液5μl進行抗體的檢測。37℃水浴10min，采用生理鹽水進行稀釋，使得其稀釋的濃度分布為1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512，在人抗球蛋白卡中加入對象或者伴侶的外周血紅細胞懸浮液體1ml，37℃孵育2h，1 000r/min離心10min，取上清液，1 500r/min離心10min，以出現凝集的最高稀釋濃度作為抗體的效價，對于其中抗體效價>1∶128需要進行抗體稀釋、游離抗體及抗人球蛋白實驗，其中2項或者2項以上陽性可診斷為ABO-HDN。

1.3 統計學方法 數據分析采用SPSS19.0軟件，計數資料比較使用χ2趨勢檢驗或χ2檢驗，預測價值采用受試者工作特征(ROC)曲線進行分析，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清IgG抗A(B)抗體效價情況 1 120例孕婦中，IgG抗A(B)抗體效價≤1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、≥1∶512分別有224例、287例、230例、201例和178例，分別占20.00%、25.63%、20.54%、17.95%和15.89%。

2.2 不同母嬰血型與血清IgG抗A(B)抗體分布 母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體效價≤1∶32比例明顯低于O-B組和O-AB組(P<0.05)；母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體效價1∶256比例高于O-B組(P<0.05)；母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體效價≥1∶512比例高于O-B組和O-AB組(P<0.05)。見表1。

表1 不同母嬰血型與血清IgG抗A(B)抗體分布[n(%)]

2.3 不同血清IgG抗A(B)抗體效價孕婦ABO-HDN發生情況 隨血清IgG抗A(B)抗體效價升高，ABO-HDN發生率明顯升高(P<0.05)，IgG抗A(B)抗體效價達到≥1∶512時，ABO-HDN發生率達到44.94%，見表2。

表2 不同血清IgG抗A(B)抗體效價孕婦ABO-HDN發生情況[n(%)]

2.4 血清IgG抗A(B)抗體效價預測ABO-HDN發生價值 血清IgG抗A(B)抗體效價預測ABO-HDN發生的ROC曲線下面積為0.801，95%CI為0.773～0.830，P<0.05，當效價≥1∶128時，其預測靈敏度和特異度分別為92.70%和54.20%，見圖1。

圖1 ROC曲線

3 討論

妊娠過程中母體紅細胞膜成分誘導的自身細胞免疫抗體的形成，能夠在再次妊娠過程中通過胎盤進入胎兒體內，誘導母體免疫性復合物的形成，造成胎兒組織器官的損害[5]。在紅細胞膜表面抗原簇表位較多的孕產婦中，ABO-HDN的發生率可進一步上升[6]。長期的臨床觀察發現，ABO-HDN患者發生腦癱或者癡呆的風險可超過3%以上，同時在未經早期干預或者退黃治療的患兒中，遠期中樞神經系統的損害更為明顯[7]。雖然通過對出生后的新生兒靜脈血進行游離皮散實驗的檢測，能夠為ABO-HDN的診斷提供依據，但并無早期的篩查價值。如部分臨床分析認為，出生后及時進行早期的溶血實驗的確診及臨床干預，遠期ABO-HDN新生兒的臨床結局惡化的風險仍然較高[8]。本次研究通過對于孕期或者出生前母體血清中相關抗體指標的分析，具有下列幾個方面的現實意義：(1)通過對于IgG抗A(B)水平的分析，能夠揭示ABO-HDN的發病機理；(2)通過對于IgG抗A(B)水平的分析，能夠為孕期具有相關高危因素的孕產婦提供可靠的篩查性指標，從而在孕期較早進行臨床干預。

IgG抗A(B)水平是A型紅細胞或者B型紅細胞膜表面抗原決定簇誘導形成的抗體，其通過糖蛋白配體進而可以誘導母體紅細胞膜的聚集，通過糖蛋白成分能夠提高紅細胞膜的沉降率。相關基礎方面的研究也表明，IgG抗A(B)抗體對于母體紅細胞膜的破壞，能夠導致母體紅細胞膜通透性的改變，促進血紅蛋白的降解和膽紅素的形成[9-10]。相關研究已經探討了IgG抗A(B)水平的表達與新生兒溶血的關系，認為在發生新生兒溶血的相關母體外周血中，IgG抗A(B)水平明顯的上升[11]，但對于依靠IgG抗A(B)效價水平診斷ABO-HDN的滴度臨界值仍然缺乏一致的認識。

在所有的入組孕婦中，分析發現IgG抗A(B)抗體效價的分布較為一致，其多數的抗體效價分布在15%～20%。對于不同類型的母嬰血型中相關抗體指標進行了分析，發現母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體低濃度效價比例明顯低于其他各組，而血清IgG抗A(B)抗體高濃度效價比例明顯高于其他各組，差異較為明顯，提示了母嬰血型O-A的孕產婦，其A型抗原決定簇誘導的高效價的抗體形成更為顯著，這主要由于A型紅細胞膜上相關抗原決定簇的抗原表位較多、決定簇的分布較為密集有關。毛中華等[12]研究者也發現了與本次研究相一致的結論，其發現在母嬰血型O-A組的孕產婦中，其IgG抗A(B)抗體效價或者濃度可平均上升40%，同時隨著分娩或者妊娠次數的增加，IgG抗A(B)抗體的濃度可進一步上升。在血清IgG抗A(B)抗體效價上升的過程中，可以發現ABO-HDN的發病率也明顯的上升，提示血清IgG抗A(B)抗體效價水平與新生兒溶血的發生密切相關，通過分析其原因，考慮與IgG抗A(B)抗體效價的下列幾個方面的病理意義有關[13-15]：(1)血清IgG抗A(B)抗體效價越高，孕產婦妊娠晚期或者出生后新生兒體內的母體來源的異常抗體濃度越高，進而加劇了血紅蛋白的分解和膽紅素的形成；(2)血清IgG抗A(B)抗體效價越高，出生后新生兒體內的紅細胞膜的穩定性越差，溶血的發生率也越高。診斷學分析可見，血清IgG抗A(B)抗體效價>1∶128時，其診斷ABO-HDN的靈敏度較高，但仍然存在一定的漏診和誤診的可能，臨床上對于孕期血清IgG抗A(B)抗體效價>1∶128的孕產婦可以早期使用藥物干預，進而改善出生后新生兒的臨床結局。

綜上所述，孕婦血清IgG抗A(B)水平與ABO-HDN的發生密切相關，母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體水平較高，同時IgG抗A(B)水平在早期診斷ABO-HDN中有較好的應用價值，值得臨床使用。