啤酒花中不同比例β-酸同系物的抗氧化及抑菌活性

楊靜文，劉澤暢，陳 培，杜偉棟，范效蘭，石 銘，劉玉梅*

（新疆大學化工學院，新疆 烏魯木齊 830046）

啤酒花（Humulus lupulus.L）又名蛇麻花，是桑科大麻亞科葎草屬植物，其球果是重要的啤酒原料，可賦予啤酒抑菌、防腐和增強泡持性等功效，同時為啤酒提供令人愉悅的苦味和香氣特征[1]。此外，啤酒花還具有較強的生理活性，國內外對于啤酒花藥用價值的研究歷史悠久[2]，臨床證實其具有良好的鎮靜和促進睡眠的特性[3]；德國草藥委員會于1984年將啤酒花列為治療焦慮和睡眠障礙等的有效植物[4]。我國明代《本草綱目》中就記載了啤酒花具有良好的食療作用，認為其具有防治癆病、化痰止咳等功效。

啤酒花的主要成分包括軟/硬樹脂、精油、蛋白質、多酚、蠟質、纖維素和氨基酸等；其中軟樹脂是啤酒花中最主要的苦味組分[5]，主要由α-酸和β-酸組成[6]。α-酸是啤酒花中最主要的成分，也是衡量啤酒花品種和品質的重要依據。α-酸根據酰基側鏈的不同，主要存在3 種同系物，分別為合葎草酮、正葎草酮和加葎草酮。在麥汁煮沸過程中，α-酸會異構化為水溶性更強的異α-酸，其對啤酒的苦味貢獻率約占80%左右。

與α-酸相同，β-酸同樣存在3 種主要同系物：合蛇麻酮、正蛇麻酮和加蛇麻酮，結構如圖1所示。

圖1 β-酸3 種主要同系物的結構Fig.1 Chemical structures of β-acid homologues

與α-酸相比，β-酸在分子結構上增加了一個異戊烯基，水溶性較差；同時由于β-酸結構中的芳香環上不存在叔醇基團，不能發生類似α-酸的異構化反應，被認為對啤酒的苦味沒有貢獻[7-8]，因此β-酸往往作為副產物從啤酒花中分離出來。但大量研究結果表明，β-酸具有抑菌、防腐、抗抑郁等生物活性，其中抑菌防腐性能主要是由于β-酸中存在的β-三酮基團具有抑菌作用，可以影響菌類細胞壁的離子通透性[9]。Larson等[10]的研究結果表明，與α-酸及其衍生物相比，β-酸及其衍生物的抑菌活性更強；Simpson等[11]的研究進一步表明β-酸對金黃色葡萄球菌的抑制作用是α-酸的兩倍。已有研究結果表明，β-酸具有廣譜抑菌性能，其在抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牛鏈球菌等革蘭氏陰/陽性菌方面均體現出良好的性能[12-13]。而抗氧化活性方面的研究也發現，β-酸對過氧化自由基和羥自由基均具有較強的清除能力[14-15]；Sbardella等[16]的研究還證實，β-酸對肉類具有較好的保鮮功效，可顯著降低肉制品的脂質過氧化。本課題組前期對啤酒花中活性成分的抗氧化活性進行研究也發現，不同品種啤酒花的β-酸提取物在抗氧化活性上存在差異性[17]，這可能正是不同品種啤酒花中β-酸3 種同系物的比例存在較大差異導致的。

盡管β-酸的3 種同系物結構類似，但在活性上存在一定的差異[18]。例如，Schulz等[19]的研究結果表明，對標準體質量（60 kg）的人而言，合蛇麻酮、正蛇麻酮和加蛇麻酮作為膳食補充劑的推薦最大日服用劑量分別為9.3、7.3 mg和2.3 mg。相較于α-酸，人們對β-酸的研究較少[20]；同時由于大量獲取β-酸同系物單體的難度較大，因此無論是從啤酒釀造還是從生理活性利用方面，人們往往將其作為一個整體進行評價，而對于β-酸同系物之間活性差異的相關研究鮮見報道。對于β-酸的制備，目前較為成熟的方法是利用α-酸與β-酸的酸性差異，通過對啤酒花浸膏進行分離來實現，然而該方法只能獲得β-酸3 種同系物的混合體；而進一步分離β-酸同系物，現行方法是利用制備型液相色譜來完成[21-22]，然而該方法儀器昂貴，且利用該方法無法獲取大量的β-酸同系物單體，因此在很大程度上限制了后續研究和實際應用。

本課題組以β-酸為研究對象已進行了一定的研究報道[17,23]。由于不同品種啤酒花所含β-酸同系物的組成差異較大，因此本研究在前期工作的基礎上，對β-酸同系物進行了初步分離，得到不同比例β-酸同系物樣品，進而采用不同的抗氧化評價方法和抑菌實驗，對β-酸同系物的活性進行比較研究，以期為啤酒花品種選育和β-酸的開發應用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 菌株、材料與試劑

金黃色葡萄球菌（26001）和大腸桿菌（44825）由烏魯木齊市疾病預防控制中心提供。

啤酒花浸膏標準品（ICE-3） 美國釀造化學家協會；啤酒花浸膏 新疆三寶樂農業科技有限公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH） 美國Sigma-Aldrich公司；蘆丁、β-胡蘿卜素中國藥品生物制品檢定所；黃嘌呤氧化酶 上海源葉生物科技有限公司；別嘌呤醇 北京恒業中遠化工有限公司；抗壞血酸 天津市博迪化工有限公司；甲醇為國產色譜純，其他試劑均為國產分析純。

LB固體培養基自行配制（10 g/L蛋白胨、10 g/L瓊脂粉、5 g/L酵母浸粉、10 g/L的NaCl），于120 ℃高壓滅菌20 min，供抑菌實驗使用。

1.2 儀器與設備

高效液相色譜儀、色譜柱為Hypersil ODS2（150 mm×4.6 mm，4.5 μm） 大連依利特分析儀器有限公司；UV-5300PC紫外-可見分光光度計 上海元析儀器有限公司；WGZ-XT濁度儀 杭州奇威儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 高效液相色譜分析條件

流動相為V（甲醇）∶V（水）∶V（體積分數85%磷酸）＝85∶15∶0.25；流速0.8 mL/min；柱溫室溫；紫外檢測器波長314 nm；進樣量10 μL，采用啤酒花浸膏國際標準對照物，通過峰面積外標法定量分析。

1.3.2β-酸樣品分離提取及初步純化

β-酸的分離提取方法參考本課題組前期研究[24]。稱取20 g啤酒花浸膏，加入10 mL無水乙醇，在50 ℃水浴中攪拌至溶液澄清透明；邊攪拌邊向其中滴加質量分數10%的KOH溶液，調節pH值至13～14；再加約200 mL蒸餾水，充分攪拌后再次以10% KOH溶液調節體系的pH值至13～14。將溶液靜置30 min，真空抽濾除去油狀物，得到澄清液體。上述過濾液在N2保護下攪拌，緩慢通入CO2，當pH值達到8.2～8.5時停止通氣，繼續攪拌約1 h，靜置30 min，真空抽濾得白色粉末狀固體即為β-酸粗提物，質量分數高于80%，于-18 ℃下保存備用。

1.3.3 不同比例β-酸同系物樣品的分離

稱取約5 g的β-酸粗提物，預實驗在考察溶劑、結晶溫度、pH值對β-酸重結晶產物中3 種同系物比例影響的基礎上，對β-酸粗提物進行了進一步的分離。獲得不同比例β-酸同系物樣品條件簡述如下：1）合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮的質量比為1∶1。向β-酸粗提物樣品中逐滴滴加體積分數90%甲醇溶液，體系保持在50 ℃至完全溶解，在室溫下（25 ℃）重結晶，重復上述過程3 次得產物1，記為S1∶1。2）合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮質量比為10∶1。向產物1中逐滴滴加體積分數90%甲醇溶液，體系保持在50 ℃至完全溶解，在4 ℃下重結晶，重復上述過程3 次得產物2，記為S10∶1。3）合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮質量比為5∶1。由產物1與產物2按質量比5∶22混合得產物3，記為S5∶1。4）合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮質量比為1∶4。在室溫下逐滴向產物1中滴加體積分數90%甲醇溶液，至樣品完全溶解，向該溶液中緩慢通入CO2（1 mL/min），至溶液pH值約為6～7左右，停止通氣，過濾得產物4，記為S1∶4。5）合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮質量比為20∶1。逐滴向β-酸粗提物中滴加正己烷，體系保持在50 ℃至β-酸完全溶解，在4 ℃下重結晶，重復上述過程3 次得產物5，記為S20∶1。

1.3.4 抗氧化活性評價

1.3.4.1 抑制黃嘌呤氧化酶活性的測定

參考文獻[25]的方法。精確移取3.75 mL磷酸鹽緩沖溶液（50 mmol/L的KH2PO4/K2HPO4，pH 7.5），一式四份。一份加入2 mL蒸餾水記作0組；一份加入1 mL的18 mU/mL黃嘌呤氧化酶和1 mL蒸餾水，記作E組；一份加入1 mL的β-酸系列樣品溶液和1 mL蒸餾水，記作S組；最后一份加入1 mL的β-酸系列樣品溶液和1 mL的18 mU/mL黃嘌呤氧化酶，記作E＋S組。將4 組體系均置于37 ℃水浴中恒溫保持15 min，水浴結束加入3 mL黃嘌呤啟動反應，混勻后立即在290 nm波長處測定其吸光度，記作0時刻，4 組體系的吸光度分別記為A0、AE0、AS0、A（E＋S）0。然后將4 組體系放入25 ℃水浴，以100 r/min振蕩反應30 min，反應結束后加入1 mL 1 mol/L鹽酸終止反應，再次測定吸光度，記作30時刻，4 組體系的吸光度分別記為A30、AE30、AS30、A（E+S）30。根據公式（1）計算不同質量濃度的β-酸系列樣品對黃嘌呤氧化酶活性的抑制率。

1.3.4.2 DPPH自由基清除能力測定

參考文獻[26]的方法，以蘆丁作為對照，分別考察不同質量濃度β-酸系列樣品的DPPH自由基清除率，按公式（2）進行計算。

式中：As為加入樣品時的吸光度；Ab為未加樣品時的吸光度。

1.3.4.3 ·OH清除能力測定

β-酸系列樣品的·OH清除能力采用鄰二氮菲/Fe2＋氧化法進行評價[27]，以蘆丁作為對照，以1 mL 體積分數0.01%的H2O2和1 mL蒸餾水代替2 mLβ-酸樣品測得未損傷管吸光度，以2 mL蒸餾水代替2 mLβ-酸樣品測得損傷管的吸光度。根據公式（3）計算不同質量濃度β-酸系列樣品·OH清除率。

式中：A2是加入樣品時溶液的吸光度；A1是以蒸餾水代替β-酸樣品時溶液的吸光度；A0是以蒸餾水代替β-酸樣品和體積分數0.01% H2O2時溶液的吸光度。

1.3.4.4 總抗氧化能力評價

β-酸系列樣品的總抗氧化能力采用β-胡蘿卜素-亞油酸乳化液法進行評價[17]，以蘆丁作為對照，根據公式（4）計算不同樣品的抗氧化指數（antioxidant activity index，AAI），評價樣品的總抗氧化能力。

式中：ASt和ACt分別表示120 min時樣品和蒸餾水（空白）的吸光度；AS0和AC0分別表示起始時樣品與空白的吸光度。

1.3.5 抑菌活性評價

1.3.5.1 菌懸液的配制

金黃色葡萄球菌和大腸桿菌懸濁液的配制參考前期工作[28]，配制濃度為108～109CFU/mL的菌懸液，備用。

1.3.5.2 最小抑菌濃度的測定

采用濾紙片法[29]和二倍稀釋法[30]，確定β-酸系列樣品的最小抑菌濃度。利用二倍稀釋法分別配制質量濃度為2.00、5.00、10.00、20.00、40.00、80.00 mg/L和160.00 mg/L不同比例β-酸同系物樣品的甲醇溶液。將5.00 μL的樣品溶液滴于直徑為6 mm的圓形濾紙片上，待溶劑揮發后間隔一定距離貼在LB培養基上。陽性對照為160.00 mg/L（與樣品最大質量濃度相同）的阿莫西林水溶液，以及75%乙醇溶液；陰性對照為甲醇和無菌水。將上述LB培養基置于培養箱中，在37 ℃下培養24 h后，以十字交叉法測量各樣品對兩個菌種的抑菌圈直徑，抑菌圈直徑大于6.5 mm時認為樣品對菌種有抑制作用。

1.4 數據處理與統計

所有實驗數據均采用Origin 8.5或Excel軟件處理，通過方差分析和鄧肯氏多重差異分析法分析顯著性，實驗數據均以平均值±標準偏差表示。抗氧化活性的研究中，比較相鄰樣品之間的半數清除率（half maximal inhibitory concentration，IC50），當P＜0.01時，即存在極顯著性差異，記為“＜＜或＞＞”；0.05＜P＜0.01時，即存在顯著性差異，記為“＜或＞”；P＞0.05時，即不存在顯著性差異，記為“≈”。

2 結果與分析

2.1 不同比例β-酸同系物樣品的分離

由于啤酒花中加蛇麻酮在β-酸中的相對含量較為恒定，同時正蛇麻酮與加蛇麻酮的分離難度較大，因此通常將正蛇麻酮和加蛇麻酮看作一個整體進行研究[31-32]。圖2為啤酒花浸膏標準品、實驗用啤酒花浸膏、β-酸粗提物，以及樣品S1∶4、S1∶1、S5∶1、S10∶1和S20∶1的液相色譜圖；其中，啤酒花浸膏標準品、實驗用啤酒花浸膏以及β-酸粗提物各組分的相對含量見表1。研究結果表明，在β-酸同系物樣品分離過程中，以體積分數90%甲醇溶液作為溶劑進行提取分離時，當結晶溫度由25 ℃降至4 ℃，β-酸粗提物重結晶后S1∶1比S10∶1中合蛇麻酮的相對含量明顯升高，證實合蛇麻酮的溶解度小于正蛇麻酮＋加蛇麻酮；當以正己烷作為溶劑進行提取分離時，β-酸粗提物重結晶后合蛇麻酮（S20∶1）的相對含量較體積分數90%甲醇提取分離樣品（S10∶1）相對含量明顯升高，由于正己烷對含有β-酸的軟樹脂具有更好的溶解度，因此該結果進一步證實合蛇麻酮的溶解度小于正蛇麻酮＋加蛇麻酮；而當在合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮質量比為1∶1的體積分數90%甲醇溶液中通入CO2至pH值約為6～7左右時，沉淀物中正蛇麻酮＋加蛇麻酮的相對含量明顯提高，結果表明該組分的酸性強于合蛇麻酮。

圖2 樣品的高效液相色譜圖Fig.2 High performance liquid chromatograms of β-acid samples

表1 酒花浸膏標準品、實驗用啤酒花浸膏和β-酸粗提物中各組分的相對含量Table 1 β-Acid composition of hops extract standard, hops extract used for this experiment and crude β-acid extract%

2.2 抗氧化活性評價

2.2.1 不同比例β-酸同系物對黃嘌呤氧化酶活性的抑制作用

黃嘌呤氧化酶是人體內核酸分解代謝中的重要組分，能催化（次）黃嘌呤產生尿酸[33]，同時代謝產物會引起氧化應激[34]，兩者都是導致痛風的重要因素[35]。目前臨床治療痛風的藥物主要有別嘌呤醇[36]、秋水仙素[37]、半胱氨酸[38]等。但這些藥物具有較強的毒副作用，因此尋找高效低毒的新型抑制劑備受關注[39]。由圖3可知，β-酸對黃嘌呤氧化酶的活性具有一定的抑制作用，隨著質量濃度的增加，所有樣品對黃嘌呤氧化酶活性抑制率呈明顯上升趨勢，且β-酸同系物的比例顯著明顯影響樣品對黃嘌呤氧化酶活性的抑制能力。由圖3可知，幾種β-酸同系物樣品抑制黃嘌呤氧化酶的IC50依次為S1∶4（0.50 mg/mL）＜S1∶1（0.53 mg/mL）＜S5∶1（0.65 mg/mL）≈S20∶1（0.63 mg/mL）＜S10∶1（0.94 mg/mL），即隨著正蛇麻酮＋加蛇麻酮比例的下降抑制能力總體逐漸減小，表明正蛇麻酮＋加蛇麻酮對黃嘌呤氧化酶活性的抑制能力高于合蛇麻酮。盡管S1∶4樣品對黃嘌呤氧化酶活性抑制能力明顯高于其他樣品，但與陽性對照品別嘌呤醇相比活性明顯較差。Mir等[40]以十六烷基三甲基溴化銨為例，研究同系物對黃嘌呤氧化酶活性的抑制作用，結果表明，同系物的分子鏈長短、分子質量會顯著影響其與黃嘌呤氧化酶的結合，進而影響其抑制活性；柳高[41]對B族維生素對小鼠尿酸水平影響的研究結果也證明B族維生素同系物之間在抑制黃嘌呤氧化酶上存在顯著性差異，上述研究均與本研究結果相似。

圖3 不同比例β-酸同系物樣品對黃嘌呤氧化酶活性的抑制率Fig.3 Inhibitory effect of β-acid homologue mixtures with different ratios on xanthine oxidase activity

2.2.2 不同比例β-酸同系物對DPPH自由基清除能力的影響

圖4 不同比例β-酸同系物樣品對DPPH自由基的清除率Fig.4 DPPH radical scavenging rates of β-acid samples with different ratios of homologues

由圖4可知，β-酸對DPPH自由基具有一定的清除能力，隨著質量濃度的增加，所有樣品對DPPH自由基的清除率均呈上升趨勢，且β-酸同系物的比例明顯影響樣品對DPPH自由基的清除能力。β-酸同系物樣品清除DPPH自由基的IC50依次為S1∶4（0.033 mg/mL）＜S5∶1（0.042 mg/mL）＜S1∶1（0.054 mg/mL）≈S20∶1（0.057 mg/mL）＜S10∶1（0.077 mg/mL），清除能力均低于陽性對照品蘆丁（0.015 mg/mL）。與抑制黃嘌呤氧化酶活性類似，正蛇麻酮＋加蛇麻酮比例較高的樣品S1∶4清除DPPH自由基的能力較強。Ma Yongkai等[42]在研究抗氧化肽同系物的抗氧化活性過程中發現，抗氧化肽清除DPPH自由基的能力不僅與氨基酸的組成和關鍵氨基酸位點有關，而且還與抗氧化肽的空間構型以及同系物分子質量有關，表明同系物之間在清除DPPH自由基能力上存在差異，這與本研究結果類似。

2.2.3 不同比例β-酸同系物對·OH清除能力的影響

圖5 不同比例β-酸同系物樣品對·OH的清除率Fig.5 OH radical scavenging rates of β-acid samples with different ratios of homologues

由圖5可知，β-酸也具有較好的·OH清除能力。隨著質量濃度的增加，所有樣品對·OH的清除率均呈上升趨勢，且β-酸同系物的比例與·OH的清除能力也呈現一定相關性。5 種不同比例β-酸同系物樣品清除·OH的IC50依次為S1∶4（0.52 mg/mL）＜S5∶1（0.61 mg/mL）≈S10∶1（0.64 mg/mL）＜S1∶1（0.89 mg/mL）≈S20∶1（0.91 mg/mL），但清除能力均明顯小于陽性對照樣品蘆丁。與前述結果類似，正蛇麻酮＋加蛇麻酮比例較高的樣品S1∶4樣品清除活性也是最強的，表明正蛇麻酮＋加蛇麻酮對·OH的清除能力強于合蛇麻酮。Yeung等[43]在對甲酚類化合物抗氧化性能的研究過程中發現，甲酚類同系物之間在清除·OH和超氧化物等的能力上也存在明顯差別，與本研究結果類似。

2.2.4 不同比例β-酸同系物的總抗氧化活性

由圖6可知，β-酸在胡蘿卜素-亞油酸乳化體系中具有較好的總抗氧化能力，隨著質量濃度的增加，所有樣品的AAI均呈上升趨勢，且β-酸同系物的比例對樣品的總抗氧化能力具有明顯影響。5 種樣品的總抗氧化活性達到50%時對應的樣品質量濃度依次為S1∶4（0.43 mg/mL）＜S20∶1（1.24 mg/mL）≈S5∶1（1.32 mg/mL）＜S1∶1（1.74 mg/mL）＜S10∶1（1.90 mg/mL），與陽性對照蘆丁（0.623 mg/mL）相比，S1∶4樣品的總抗氧化能力更高，且S1∶4樣品抗氧化活性要明顯好于其他比例的樣品。該結果與前述各抗氧化評價體系中得出的正蛇麻酮＋加蛇麻酮的抗氧化能力強于合蛇麻酮的結果一致。

圖6 不同比例β-酸同系物樣品的總抗氧化活性Fig.6 Total antioxidant activity of β-acid samples with different ratios of homologues

2.3 不同比例β-酸同系物的抑菌活性

由表2可以看出，不同比例β-酸同系物樣品對所測試的2 種菌株均具有良好的抑菌活性，而空白溶液（甲醇、無菌水）對兩種菌株均無抑菌作用，陽性對照160.00 mg/L的阿莫西林溶液對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌圈直徑分別為（16.9±0.4）mm和（15.7±0.3）mm。

表2 不同比例β-酸同系物樣品的抑菌圈直徑Table 2 Diameter of bacteriostatic zone of β-acid samples with different ratios of homologuesmm

由表2可知，S1∶4對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為5.00 mg/L，其余樣品的最小抑菌濃度均為10.00 mg/L。但隨著樣品的質量濃度增大，合蛇麻酮比例較高的樣品S10∶1和S20∶1的抑菌活性增加明顯，且在160.00 mg/L下，S10∶1的抑菌圈直徑與同質量濃度的陽性對照阿莫西林對金黃色葡萄球菌的抑制能力無顯著差異（P＞0.05）。對于大腸桿菌而言，所有樣品的最小抑菌濃度均為10.00 mg/L；當樣品質量濃度為160.00 mg/L時，除S1∶4樣品外，其他幾種樣品對大腸桿菌的抑菌圈直徑均與同質量濃度的陽性對照阿莫西林相當，甚至更好，同樣說明合蛇麻酮比例的提高對抑制大腸桿菌生長更為有利。Bocquet等[32]研究了合葎草酮與正葎草酮＋加葎草酮和合蛇麻酮與正蛇麻酮＋加蛇麻酮對小麥葉枯病菌（Zymoseptoria tritic）的抑制效果，結果表明合葎草酮和合蛇麻酮的IC50均小于對應的正葎草酮＋加葎草酮/蛇麻酮組分，因此推測合葎草酮/蛇麻酮的抗真菌活性較強；但該實驗中合蛇麻酮的半數抑菌濃度為660 mg/L，質量濃度遠高于本研究，證明β-酸系列組分對細菌的抑制活性遠高于真菌。此外，也有研究發現，青霉素在質量濃度為10 g/L時，對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌圈直徑分別為24.0 mm和34.7 mm[44]，但其質量濃度約高于本實驗100 倍。因此，作為一種有效的抑菌劑，β-酸具有很好的應用前景。

3 結 論

本研究對啤酒花軟樹脂中不同比例β-酸同系物樣品的體外抗氧化活性和抑菌活性進行了初步評價。結果表明，β-酸具有良好的體外抗氧化活性，且其同系物比例的差異在抗氧化活性上存在較大差異；IC50結果表明，高比例正蛇麻酮＋加蛇麻酮樣品S1∶4在4 種體外抗氧化評價體系中均顯示出最高的活性，證實正蛇麻酮＋加蛇麻酮的抗氧化活性強于合蛇麻酮。同樣，不同比例β-酸同系物樣品的抑菌活性也存在差異。與抗氧化活性不同，在較高質量濃度下（≥40.00 mg/L），高比例合蛇麻酮的β-酸樣品對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌活性均較強，與同質量濃度下的陽性對照阿莫西林的抑菌效果相當甚至更高。但高比例正蛇麻酮＋加蛇麻酮的β-酸樣品S1∶4對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最低（5.00 mg/L）；盡管S1∶4對大腸桿菌的最小抑菌濃度與其余樣品均為10.00 mg/L，但其抑菌圈直徑更大。本研究結果可為啤酒花的品種選育和β-酸的開發應用提供理論參考。但為深入闡明β-酸同系物之間活性差異的本質，仍需對上述同系物在分離純化、結構表征以及構效關系研究等方面開展更加深入細致的工作。