補體C1q/腫瘤壞死因子相關蛋白6 在腫瘤中的研究進展

包小真，陳海波

（右江民族醫學院，廣西 百色 533000）

0 引言

補體 C1q / 腫瘤壞死因子相關蛋白（complement C1q/tumor necrosis factor-related protein，CTRP）家族在2004 年首次被Wong GW[1]等人發現，該家族為高度保守蛋白家族，其與脂聯素在結構和功能上具有相似性。一個氨基末端的信號肽，一個短的可變結構域以及一個膠原樣結構域和一個與補體蛋白C1q 同源的羧基末端球形結構域構成該家族的基本結構，其中發揮生物學功能的重要結構域為球形結構域。共包含15 個成員（CTRP1-15），除CTRP4 外，其他成員均由上述結構構成。CTRP6 是一種分子量為29 kDa 的含有240 個氨基酸的糖蛋白，在哺乳動物的脂肪組織、心臟、胎盤、滑膜等[2]中廣泛分布，并在不同組織中起到不同的代謝作用。相關研究表明，CTRP6 不僅在脂肪代謝及糖代謝中發揮作用，還顯著增加抗炎因子白細胞介素-10 的表達[3]，另外，其與心肌梗死后心臟功能、心室重構的改善密切聯系[4]，近年來，有研究發現自身免疫性疾病的發生可能與CTRP6 的表達相關[5]，如類風濕性關節炎。除此之外，研究表明，在肝細胞癌、胃癌、結直腸癌等惡性腫瘤中，CTRP6 異常表達[6,7]，提示在腫瘤的發生和發展中CTRP6 具有舉足輕重的作用。因此，本文就CTRP6 與惡性腫瘤的相關性作一綜述。

1 CTRP6 與腫瘤的關系

CTRP6 與胃癌的關系胃癌（Gastric carcinoma, GC）是一種在全球癌癥死亡率中占前三的常見惡性腫瘤[8]。曲海霞[7,9]等首次闡明了CTRP6 與胃癌的關系。其通過將胃癌組織和癌旁正常胃組織中分離得到的總RNA 樣品進行基因芯片分析，發現CTRP6 mRAN 在胃癌組織中的表達明顯高于正常組織。其亦發現，胃癌細胞系AGSCTRP6 mRAN 高表達，通過敲減CTRP6 基因可以抑制胃癌細胞的增殖，干擾CTRP6 的表達則可以抑制細胞的轉移和遷徙，促進AGS 細胞的凋亡。該研究提示，CTRP6 在胃癌組織中的高表達對胃癌細胞的轉移和遷徙具有促進作用，同時抑制胃癌細胞的凋亡。

而在一項對49 例彌漫性胃腺癌標本的評價中，則有不同發現[10]。日本學者Yoshinori Iwata 等發現CTRP6 免疫反應性與胃腺癌患者預后無關，與遠端彌漫性胃癌患者的無復發生存率顯著相關。有研究表明，晚期胃癌患者，特別是彌漫性胃癌，預后差的原因之一是伴有間質纖維化[11]，該研究發現重組CTRP6 蛋白的加入可抑制TGF-β 誘導的α-SMA 在培養的人成纖維細胞中的表達。這提示了CTRP6 可能在彌漫性胃癌間質纖維化的防治中具有潛在的應用價值。

CTRP6 與肝細胞癌的關系腫瘤新生血管是惡性腫瘤生長的關鍵，肝細胞癌則是一種高血管腫瘤，其生長需要豐富的血液供應，因此，中斷血液供應可用于治療肝細胞癌的患者。Tamotsu 等[6]發現，CTRP6 在肝癌中過表達，且可能通過激活AKT 通路參與腫瘤血管生成，抑制肝細胞癌細胞的凋亡。此外，Wan 等[12]證實，CTRP6 mRNA 和蛋白在Hep3B 細胞中的表達增加。當沉默CTRP6，可誘導細胞活力抑制和凋亡，并抑制Hep3B 細胞的遷移和侵襲。同時，下調CTRP6 亦可以降低AKT 磷酸化水平。其利用AKT 的激活因子胰島素樣生長因子1（Insulin-like growth factor1 IGF-1）預處理Hep3B細胞，后轉染CTRP6 siRNA，發現所有由抑制CTRP6 引起的改變都可以被IGF-1 預處理逆轉。因此，我們可以發現，沉默CTRP6 可以通過滅活AKT 信號通路抑制細胞存活、遷移、侵襲，促進細胞凋亡。以上研究為CTRP6 成為肝細胞癌潛在的預后生物學標志物和治療靶點提供了實驗依據。

CTRP6 與腎細胞癌的關系腎透明細胞癌（ Clear Cell Renal Cell Carcinoma ccRCC）是腎細胞癌最常見的亞型，其早期無明顯典型癥狀，且對放化療不敏感，預后差。因此揭示ccRCC 潛在的發病機制和病因可能有助于發現先進的治療方法和有效的早期診斷和預后的生物標志物。Lin 等[13]通過TCGA 數據分析得出，CTRP6 基因的表達水平在腎透明細胞癌組織中顯著高于非腫瘤組織，且CTRP6 在ccRCC 中高表達與其較差的總生存率顯著相關，表明高CTRP6 表達是ccRCC患者總生存率的獨立危險因素。進一步實驗證實了CTRP6富集于利于腫瘤的增殖、侵襲和轉移的信號通路中。該研究組通過分析CTRP6 水平與ccRCC 患者的TNM 分類、年齡、性別等臨床病理特征的關系，發現CTRP6 高表達與T 分類晚期關系密切。值得注意的是，有研究表明，CTRP6 可以通過激活PI3K/ AKT 信號通路減輕腎缺血再灌注損傷[14]。2020年[15]一項在單側輸尿管結扎誘導的腎纖維化模型和TGF-β1處理的HK-2 細胞實驗表明，CTRP6、脂肪酸氧化在腎纖維化中起關鍵作用。CTRP6/AMPK 信號的激活可能是促進脂肪酸氧化防止腎臟纖維化的一種潛在手段。上述研究表明，CTRP6 在腎纖維化、腎細胞癌中均起作用。腎細胞癌的增殖、侵襲和轉移與CTRP6 基因的表達關系密切。

CTRP6 與卵巢癌的關系 CTRP6 參與卵巢癌的發生和發展。Wang 等[16]在卵巢癌患者血清和卵巢癌細胞的培養液中，發現CTRP6 的表達水平顯著低于健康志愿者。隨后該研究組以體外培養的HO8910 高轉移性卵巢癌細胞系為研究對象，分別用CTRP6 重組蛋白和CTRP6siRNA、CTRP6 特異性蛋白抗體處理HO8910 細胞，觀察CTRP6 對IL-8 和VEGF的分泌及HO8910 細胞的轉移和增殖的影響。結果顯示兩種不同處理方法，HO8910 細胞的增殖和遷移能力分別顯示為抑制和增強，表明CTRP6 可通過抑制IL-8/VEGF 信號通路而抑制卵巢癌細胞的增殖和遷移。多囊卵巢綜合征(Polycystic ovary syndrome PCOS)是一種內分泌疾病，其對育齡女性具有影響，可增加女性不孕癥的風險，近年來有研究發現CTRP6在PCOS 發病機制中起作用[17]，可能為PCOS 的治療方向和靶點提供實驗依據。

CTRP6 與結直腸癌的關系 2019 年，勾靜嫻[18]等發現CTRP6 在結直腸癌組織中高表達，但與患者的臨床病理特征均無相關性。目前CTRP6 在結直腸癌中發揮的作用及作用機制尚未見報道，仍需繼續深入研究，探索CTRP6 在結直腸癌中的作用，可為治療結直腸癌尋找一個新的靶點。

CTRP6 與肺癌的關系 Han 等[19]通過TCGA 數據庫和Oncomine 數據集分析，發現CTRP6 在肺腺癌中呈現高表達。且與肺腺癌患者是否具有淋巴結轉移有關。CTRP6 低表達的肺腺癌患者預后較高表達的患者預后好。表明CTRP6 可能是肺腺癌患者預后的獨立危險因素之一。此外，通過體外實驗，證實了CTRP6 通過調控MAPK 信號通路而促進肺腺癌的進展，但還缺乏體內實驗研究。一項在非小細胞肺癌（nonsmall cell lung cancer NSCLC）的體內外實驗中發現，抑制CTRP6 的表達可抑制非小細胞肺癌細胞的增殖、遷移和侵襲，且促進細胞的凋亡[20]?；谝陨辖Y果，這為非小細胞肺癌的治療提供了一個新的方向。

CTRP6 與膀胱癌的關系 Zhu 等[21]基于TCGA 和GEO數據庫分析，初步探索了CTRP6 在兩個獨立的公共隊列中的差異表達，與正常膀胱黏膜和配對的相鄰組織相比，CTRP6在膀胱癌組織中過表達。臨床病理特征的相關性分析發現CTRP6 高表達在TNM 晚期、病理分期和AJCC 分期中更為突出，而且高表達CTRP6 的膀胱癌患者總生存率低于低表達組。進一步的侵襲和遷移實驗證明，CTRP6 表達下調后，膀胱癌相應癌細胞系5637 和T24 遷移和侵襲能力顯著降低。以上研究結果表明，在膀胱癌中，CTRP6 高表達與膀胱癌患者預后顯著相關。且CTRP6 高表達可能與癌細胞遷移、侵襲能力的改變相關，可能是膀胱癌患者預后不良的一個潛在預測因子。但對于CTRP6 在膀胱癌中的分子機制仍需進一步研究。此外，該研究基于回顧性數據，來分析基因的表達和對預后的評估，以及樣本數量有限，數據集不同，可能導致數據分析存在一定的異質性。

CTRP6 與乳腺癌的關系非編碼小RNA（MicroRNAs miRNAs）可參與細胞因子的調控，且可通過負性抑制腫瘤抑制基因或干擾控制細胞的分化、凋亡和轉移的途徑來發揮致癌基因的作用。Wang 等[22]根據先前研究，發現miR-29b 對乳腺癌的遷移和侵襲的調控強于其他miRNA。該研究人員根據基因芯片分析miR-29b 對人乳腺癌細胞系MCF-7 中整體mRNA 表達譜的影響，并根據通路分析和熒光素酶分析證實了CTRP6 在乳腺癌細胞中的表達受到miR-29b 的抑制。miR-29b 抑制CTRP6 mRNA 的表達，從而有助于乳腺癌的侵襲能力。當前關于在乳腺癌中CTRP6 的表達及功能作用的研究較少，該方法可能有助于乳腺癌轉移中新的功能基因的鑒定。

CTRP6 與口腔癌的關系癌細胞粘附于基底膜，是癌細胞增殖-侵襲-轉移級聯反應的第一步，層粘連蛋白-層粘連蛋白受體軸被認為促進該步驟的發生[23]。而在口腔癌中，認為腫瘤的生長受到層粘連蛋白和層粘連蛋白受體的過表達而促進。Hano 等[24]通過實驗揭示，CTRP6 與人核糖體蛋白SA(human Ribosomal Protein RPSA)的產物結合，該產物也被稱為37/67 kDa 層粘連蛋白受體(37LRP/67LR)基因，CTRP6 與37/67 kDa 層粘連蛋白受體結合，阻斷了37/67 kDa 層粘連蛋白和37/67 kDa 層粘連蛋白受體的結合，抑制了癌細胞的增殖、侵襲和轉移。因此，在口腔鱗狀細胞癌中，抑制37/67 kDa層粘連蛋白和37/67 kDa 層粘連蛋白受體的結合可能是阻斷腫瘤進展的一種方法。CTRP6 在口腔癌方面的研究有限，其具體的作用及分子機制有待進一步研究。

2 CTRP6 在其他疾病方面的作用

在代謝、炎癥、宿主防御、凋亡、細胞分化、自身免疫、冬眠和器官發生等多種過程中，CTRP6 發揮不同作用。在慶大霉素所致的大鼠急性腎功能損傷中，CTRP6 可以劑量依賴式緩解損傷的程度[25]。而在骨骼肌細胞中的早期研究發現，CTRP6 通過介導AMPK-ACC 途徑從而參與脂肪酸代謝[26]。此外，在由肥胖所致的炎癥狀態及其相關并發癥中，CTRP6可起到調節改善作用[27]；CTRP6 的表達還被證實與3T3-L1脂肪細胞的脂肪生成相關，脂肪的生成在CTRP6 表達受到抑制時而顯著減少。同樣，在成肌細胞中，異位脂肪亦可以在CTRP6 高表達時，通過脂聯素受體 1/細胞外調節蛋白激酶/PPARγ 信號通路介導而生成[28]。另外，在心血管方面，CTRP6 可以通過靶向RhoA MRTF-A 通路和抑制肌成纖維細胞分化減輕梗死后心臟纖維化[4]。CTRP6 還可通過激活AKT信號通路保護心臟免受阿霉素誘導的心臟毒性，并改善心臟功能[29]。有研究發現[30]，CTRP6 通過抑制PI3K/AKT/mTOR信號通路，部分抑制了血小板源性生長因子BB（plateletderived growth factor-BB PDGF-BB) 誘導的血管平滑肌細胞（Vascular smooth muscle cell VSMC) 增殖和遷移。此外，CTRP6 的表達在小鼠類風濕性關節炎模型中呈現高水平，而在關節內注射重組人CTRP6 可治愈誘導的小鼠關節炎，說明CTRP6 可能是一種內源性補體調節因子，其可用于補體介導的疾病的治療[5]。

3 小結與展望

綜上所述，CTRP6 在癌癥的發生、發展中起關鍵性作用。CTRP6 在腸型胃癌、肝細胞癌、腎細胞癌、結直腸癌、肺腺癌、膀胱癌中呈高表達標志著腫瘤患者的預后差，表明CTRP6 可能是腫瘤診斷和預后評價的一個潛在預測分子。但CTRP6在卵巢癌患者血清中呈低表達，且CTRP6 重組蛋白實驗中可以抑制腫瘤細胞的增殖、遷移和侵襲。在口腔癌中，關于CTRP6 的相關研究少有報道，目前僅有報道表明CTRP6 在口腔鱗狀細胞癌中可能阻斷了層粘連蛋白和層粘連蛋白受體的結合從而阻止腫瘤的進一步發展。但到目前為止，關于CTRP6 與口腔癌患者的臨床病理因素的關系及其具體的分子機制尚未得到完全闡明。CTRP6 在腫瘤中的異常表達機制還待進一步實驗完善。外周血CTRP6 能否作為腫瘤診斷和預后的標志物仍有待進一步驗證。此外，CTRP6 作為腫瘤的治療靶點的應用價值仍然有待大量實驗證明。相信隨著對CTRP6 的功能及機制地不斷深入研究，其在腫瘤中的作用機制和臨床意義終會被揭示，為癌癥的早期診斷、治療和預后提供可靠的方向和手段。