Sysmex UF-1000i 全自動尿液有形成分分析儀性能評價

羅燕萍，王成，蔡珠妹，莫紅梅，張秀明

（深圳市羅湖醫院集團羅湖區人民醫院醫學檢驗科，廣東 深圳）

0 引言

尿沉渣有形成分檢測對泌尿系統疾病、腎臟疾病、感染性疾病及循環系統疾病的臨床診斷與鑒別診斷有重要價值[1-2]。Sysmex UF-10001 全自動尿有形成分分析儀基于流式細胞計數原理分析尿樣中的有形成分白細胞(WBC)、紅細胞（RBC)、上皮細胞（EC)、管型（CAST)、細菌（BACT)，并可定量顯示；《醫療機構臨床實驗室管理辦法》要求，尿液有形成分分析儀在常規使用前，應由實驗室對未加修改而使用的已確認的檢驗程序進行獨立驗證。本實驗室按照《醫學實驗室質量和能力認可準則在體液學檢驗領域的應用說明》對尿液有形成分分析儀性能進行評價。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex UF-1000i 全自動尿液有形成分分析儀（儀器編號：LJ-A-04)及相關配套試劑、校準品、UF CHECK 質控液。

1.2 標本來源

實驗標本來源于深圳市羅湖區人民醫院住院和門診及健康體檢者的尿液標本，2h 內完成實驗。

2 實驗方法

2.1 批內精密度

2.1.1 實驗方案

按照CLSI EP5-A2 指南，收集高、中、低三個濃度水平的新鮮尿液分別用自動進樣模式連續測定11 次，剔除第1 次結果，取后10 次結果計算均值（χ2）、標準差（SD）和變異系數（CV）。

2.1.2 判斷標準

所有參數批內精密度的變異系數必須符合廠商聲明要求，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST≤40.0%,B ACT ≤20.0%。

2.2 批間精密度

2.2.1 實驗方案

使用室內質控在控結果的CV%作為評價指標，至少使用兩個水平（包含正常和異常水平）的質控品，在檢測當天至少進行一次室內質控，剔除失控數據（失控結果已得到糾正）后按批號或者月份計算在控數據的CV%（至少20 次數據）。

2.2.2 判定標準

應符合Sysmex UF-1000i 說明書要求批間精密度，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST ≤40.0%,BA CT ≤20.0%。

2.3 攜帶污染率

2.3.1 實驗方案

按照CLSI EP10-A3 指南，選擇RBC、WBC、BACT 濃度分別在（1000-5000）/μl、（1000-5000）/μl 和（5000-10000）/μl 的高值尿液樣本混合均勻后連續測定3 次，測定值分別為H1、H2、H3；再用低值樣本(無菌生理鹽水)連續測定3 次，測定值分別為L1、L2、L3。按下列公式計算攜帶污染率[攜帶污染率%=（L1-L3）/（H3-L3）×100%]。

2.3.2 判斷標準

應達到Sysmex UF-1000i 儀器說明書要求的攜帶污染率，RBC 和WBC 攜帶污染率≤0.10%，BACT 攜帶污染率≤0.05%。

2.4 線性范圍

2.4.1 實驗方案

取富含紅細胞、白細胞、細菌和上皮細胞的尿液樣本（RBC：10000 個/μl、WBC：2000 個/μl、BACT：10000 個/μl）分別按1:2，1:4，1:16，1:64，1:256 的比例用鞘液進行稀釋每個稀釋度測定3 次，取均值為檢測值，將檢測值與理論值作比較，進行線性回歸相關分析，計算公式y=ax+b，驗證可報告范圍。

2.4.2 判斷標準

a 值（斜率）在1±0.05 范圍內，相關系數r ≥0.975。

2.5 準確度驗證

2.5.1 實驗方案

使用Sysmex UF-1000i 全自動尿有形成分分析儀UF CHECK 高值質控液按照說明書要求混勻后連續進行5 次測定，計算平均值（χ2），與靶值相比較，計算其偏差值。

2.5.2 判斷標準

各參數偏差值要求在質控說明書靶值范圍內，見表3。

表3 UF CHECK 質控液靶值

2.6 生物參考區間

2.6.1 實驗方案

Sysmex UF-1000i 國內目前沒有參考區間，本室對Sysmex 公司提供的日本的參考區間依據WS/T 402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》中相關要求進行驗證；選擇符合生物參考區間本室納入標準的健康體檢者尿液標本40 份，男女各20 例，年齡20-60 歲，連續上機進行測定，對結果進行統計。參考區間范圍見表4。

表4 UF-1000i 報告參數的參考區間

2.6.2 判定標準

符合率R 值計算：R=落在參考區間例數/實驗例數，要求R ≥90%為驗證通過。

2.7 實驗室內儀器間比對試驗

2.7.1 實驗方案

選擇10 份新鮮尿液樣本，包括正常與異常樣本，與參加SNCS（Sysmex nework communication system）全球室內質控比對且成績良好的UF-1000i 全自動尿液有形成分分析儀（儀器編號為MJ-A-10）進行儀器間比對實驗，每個樣本測定3次取其均值，計算兩臺儀器之間的偏差百分比。

2.7.2 判定標準

符合Sysmex UF-1000i 比對偏差要求的結果應≥80%，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST ≤40.0%,BA CT ≤20.0%。

3 實驗結果

3.1 批內精密度

3.1.1 批內精密度實驗結果

見表6。

表6 批內精密度實驗結果

3.1.2 結論

各檢測項目的CV%均小于廠商聲明要求，驗證通過。

3.2 批間精密度

3.2.1 批間精密度實驗結果

見表7、表8。

3.2.2 結論

各檢測項目低值和高值的批間精密度均符合Sysmex UF-1000i 說明書要求，驗證通過。

3.3 攜帶污染率

3.3.1 攜帶污染率實驗結果

見表9。

3.3.2 結論

RBC、WBC、BACT 攜帶污染率均小于Sysmex UF-1000i儀器說明書要求標準，驗證通過。

表7 高值批間精密度實驗結果

表8 低值批間精密度實驗結果

表9 RBC、BACT 攜帶污染率數據統計

表10 線性范圍實驗結果

表11 準確度驗證實驗數據

3.4 線性范圍

3.4.1 線性范圍實驗結果

見表10。

3.4.2 結論

RBC、WBC、BACT、EC 和CAST 的a 值（斜率）均在1±0.05范圍內，R2均≥0.975，驗證通過。

3.5 準確度驗證

3.5.1 準確度驗證實驗結果

見表11。

3.5.2 結論

各參數偏差值要求均在質控說明書靶值偏差范圍內，準確度驗證通過。

3.6 生物參考區間驗證

3.6.1 生物參考區間驗證結果

見表12、表13。

3.6.2 結論

男性、女性各項目參考區間符合率R 值計算均≥90%，驗證通過。

3.7 實驗室內儀器間比對

3.7.1 實驗室內儀器間比對結果

見表13。

3.7.2 結論

各項目比對偏差均符合要求，儀器間比對驗證通過。

表12 男性生物參考區間驗證結果

表13 女性生物參考區間驗證結果

表13 儀器間比對偏差（%）結果

4 討論

隨著科技的不斷進步，人們健康意識日趨增強，尿液檢測量大幅提升，尿有形成分人工顯微鏡檢查凸顯不足，自動化尿有形成分分析儀應運而生。目前，國內、外已較普遍使用能對尿有形成分進行自動化分析的儀器，迄今為止，這些設備主要原理為流式細胞術和顯微鏡數據成像技術，均可直接檢測不離心新鮮尿液標本，快速定量計算尿中各種有形成分，其結果重復性與人工鏡檢結果比較有顯著提高，同時能與實驗室信息系統接口，便于檢索和結果報告；大大提升了尿液檢測效率。Sysmex UF-1000i 全自動尿液有形成分分析儀的核心技術是以半導體激光作為激發光源，用核酸熒光染料對尿中各有形成分進行染色，以流式細胞術作為有形成分計數和分類手段，并以強大計算機軟件系統作為有形成分分析平臺，創立尿有形成分分析自動化的新方法[3]。

精密度是指在一定的測試條件下進行多次測定時，所得測定結果之間的符合程度，表示測量結果中隨機誤差的大小，是儀器性能評價的重要指標[4]。本實驗結果的批內精密度和批間精密度均符合廠家聲明要求，說明儀器的重復性好，這是進行其他性能評價的前提。攜帶污染率是評價儀器測定兩個樣本間干擾的程度[5]，本實驗的RBC、WBC 和BACT 的攜帶污染率結果為0.01%、0.02%、0.01%，由于儀器說明書對EC和CAST 攜帶污染率未作明確要求，但結果顯示其攜帶污染率結果均為0，說明前一高值樣本并未對后一低值樣本的檢測結果造成影響。本研究對RBC、WBC、EC、CAST、BACT 的線性范圍進行評價，結果顯示a 值（斜率）均在1±0.05 范圍內，r2均≥0.975，表明其有良好的線性范圍。因高濃度樣本較難收集，WBC、EC、BACT 的上限標本比廠家聲明要求低，故證實的線性范圍比儀器廠商聲稱的低。對于超過線性的標本，可按要求用鞘液稀釋后進行測定，將測定結果乘以稀釋倍數得出最終測定值。但張崇唯等[6]研究表明，在臨床診治過程中稀釋后的高值標本其檢測意義不大，因此無需進行稀釋，可直接報告。由于衛生部臨檢中心至今仍沒有有尿有形成分室間質評質控品，目前對于準確度的評價仍未有統一標準[7]，本實驗用UF CHECK 高值質控液按照說明書要求混勻后連續進行5 次測定，均值與靶值相比較，計算其偏差值；結果顯示各參數偏差值要求均在質控說明書靶值偏差范圍內，說明其準確度高[8]。另外，還對儀器廠家提供的生物參考區間進行驗證，結果表明其生物參考區間適用于本實驗室。同一型號不同儀器間檢測結果會存在一定的差異，其可比性對檢驗質量和臨床診斷治療至關重要,《醫療機構臨床實驗室管理辦法》和CNAS-CL02-A002《醫學實驗室質量和能力認可準則在體液學檢驗領域的應用說明》[9-12]對檢驗結果的可比性有明確的要求，本室對兩臺UF-1000i 檢測結果進行比對，結果顯示符合率均≥80%，表明檢測結果一致性好，可比性強，其結果可互認。

綜上所述，Sysmex UF-1000i 全自動尿液有形成分分析儀的主要定量參數白細胞(WBC)、紅細胞（RBC)、上皮細胞（EC)、管型（CAST)、細菌（BACT)的批內精密度、批間精密度、攜帶污染率、線性范圍、準確度、生物參考區間、實驗室內儀器間比對等指標均符合廠商聲明要求，可應用于臨床。