應(yīng)用直接化學(xué)發(fā)光法調(diào)查竹山縣縣域內(nèi)成人血清游離FT3、游離FT的參考范圍

湖北省十堰市竹山縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 湖北 竹山 442200

血清中游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離四碘甲狀腺原氨酸(FT4)的測(cè)定,對(duì)甲狀腺疾病的診斷具有重要價(jià)值。我科于2019年購(gòu)進(jìn)深圳新產(chǎn)業(yè)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀X8且應(yīng)用于臨床,該方法具有靈敏度高、線性范圍寬、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),非常適合臨床應(yīng)用。根據(jù)廠家試劑盒要求及我院臨床診療實(shí)際狀況,我院建立了竹山縣域內(nèi)成人血清FT3、FT4的參考值范圍。

1 對(duì)象與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象 籍貫：竹山縣,經(jīng)臨床體檢正常和實(shí)驗(yàn)室篩查(排除甲狀腺球蛋白抗體和甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體陽(yáng)性者),男162例,平均年齡35.2歲(范圍18～61歲),女128例,平均年齡33.6歲(范圍18～63歲),共290例。

1.2 方法

1.2.1 方法原理 FT3、FT4測(cè)定采用直接化學(xué)發(fā)光技術(shù)的競(jìng)爭(zhēng)免疫測(cè)定法,血清樣品中的FT3、FT4分別與固相試劑中的順磁離子共價(jià)結(jié)合的FT3、FT4類似物競(jìng)爭(zhēng)數(shù)量有限的、存在于標(biāo)記試劑中帶吖啶酯標(biāo)記的鼠單克隆FT3、FT4抗體,其發(fā)光強(qiáng)度與樣品中的FT3、FT4濃度成反比。分析過(guò)程采用自動(dòng)化,儀器自動(dòng)吸樣25～250μL后自動(dòng)吸入固相試劑和液相試劑。在37℃；溫育4.7 min后,試劑水沖洗,吸干,然后自動(dòng)加入試劑Ⅰ和試劑Ⅱ激發(fā)發(fā)光反應(yīng),發(fā)光計(jì)迅速記錄發(fā)光強(qiáng)度(RLHS),發(fā)光強(qiáng)度與吖啶酯含量呈良好的線性關(guān)系。

1.2.2 儀器與試劑 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀X8,深圳新產(chǎn)業(yè)生產(chǎn),試劑及定標(biāo)品均由深圳新產(chǎn)業(yè)公司提供。每種定標(biāo)品包括高、低兩種濃度,每批試劑帶有內(nèi)存標(biāo)準(zhǔn)曲線,按規(guī)定間隔進(jìn)行兩點(diǎn)定標(biāo)。質(zhì)控品包括高、中、低3種濃度,定標(biāo)時(shí)同時(shí)進(jìn)行質(zhì)控。

1.2.3 樣本 空腹靜脈抽血于促凝管,放置60 min,以3000g相對(duì)離心力離心10min,收集血清8h內(nèi)測(cè)定完畢。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)果準(zhǔn)確度 在對(duì)樣本檢測(cè)過(guò)程中,嚴(yán)格按照質(zhì)量控制程序,在試劑定標(biāo)期限內(nèi)檢測(cè),同時(shí)設(shè)置高、中、低3種水平質(zhì)控,質(zhì)控物為深圳新產(chǎn)業(yè)廠家提供(批號(hào)：40271、40272、40273),所測(cè)質(zhì)控物結(jié)果均在1s之內(nèi)(見表1)。

2.2 FT3、FT4參考范圍的建立 根據(jù) FT3、FT4的測(cè)定結(jié)果,求出95%的置信范圍(雙側(cè)界P2.5及P97.5值),結(jié)果列于表2。表中的“提示參考范圍”是指試劑盒說(shuō)明書中提示的參考范圍(下稱提示值)。結(jié)果顯示,測(cè)定得到的P2.5及P97.5值與提示值比較均有一定差異,FT3、FT4的P2.5及P97.5值均低于提示值的相應(yīng)值。將檢查對(duì)象分男、女兩組,分別計(jì)算出95%的置信范圍,男性的FT3、FT4的P2.5值及P97.5值均高于女性的相應(yīng)值(見表3)。

表1 本室20次室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果

表2 本室調(diào)查FT3、FT4 參考范圍結(jié)果

表3 成年男性與成年女性FT3、FT4 結(jié)果

3 討論

直接化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)具有高靈敏度和特異性、儀器操作自動(dòng)化,具有無(wú)交叉污染,快速簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),且結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性極好。在我院臨床實(shí)際應(yīng)用中,醫(yī)生及病友的反映均很好,但同時(shí),我們也遇到過(guò)一些問(wèn)題,尤其是關(guān)于參考值的問(wèn)題,由于沒(méi)有本地區(qū)人群的參考范圍,有時(shí)造成臨床診斷的困難。因此,我們精心選擇調(diào)查對(duì)象,并按嚴(yán)格的程序抽取、處理、保存標(biāo)本,測(cè)定出FT3、FT4值,計(jì)算出相應(yīng)的參考值范圍。結(jié)果顯示,本地區(qū)成人FT3、FT4的P2.5及P97.5值均高于提示值的相應(yīng)值,我們將調(diào)查對(duì)象分成男、女兩組,發(fā)現(xiàn)男性組FT3、FT4的P2.5及P97.5值均稍高于女性組的相應(yīng)值。此次所調(diào)查的參考范圍,已初步應(yīng)用于臨床實(shí)踐,我們發(fā)現(xiàn)此參考值更適合于臨床應(yīng)用。在以后的實(shí)踐中,將進(jìn)一步驗(yàn)證它的適用性及準(zhǔn)確性。