食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基配制、滅菌及貯藏研究

□ 吳芳媛 馮秋芳 林 黎 湖州市食品藥品檢驗研究院

當前，各個領域的檢測設備及其自動化已經得到了一定的發(fā)展，但在微生物檢驗領域，仍然采用傳統(tǒng)的檢測方法，即利用培養(yǎng)法，對微生物進行培養(yǎng)、分離以及生化鑒定。檢測的過程中，微生物培養(yǎng)基的合理性對微生物的生長、分離以及鑒定結果的準確性具有一定影響?；诖耍疚拈_展了食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基配制、滅菌及貯藏研究。

1 食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基配制

針對食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基的配制，應當根據不同檢驗目的，選擇不同的配制材料，表1 為3 種常見的培養(yǎng)基材料配比表。

表1 3 種常見的培養(yǎng)基材料配比

表1 中牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基主要用于食品微生物中細菌的培養(yǎng)，為保證培養(yǎng)基的質量，需要在125 ℃環(huán)境下持續(xù)進行15 min 的滅菌處理；Gause1 號培養(yǎng)基主要用于放線菌的培養(yǎng)，在配制的過程中，首先應當在淀粉中添加少量的冷水，通過攪拌得到糊狀淀粉后，再將其倒入100 ℃的水中，然后加熱并加入其余配制材料攪拌至溶化，配制后同樣需要在125 ℃環(huán)境下持續(xù)進行15 min 的滅菌處理；Martin 瓊脂培養(yǎng)基主要作用是食品微生物中真菌的分離，完成滅菌處理后，在使用前加入0.02%鏈霉素稀釋液，通常為100 ～150 mL，保證每毫升培養(yǎng)基當中均含有25 μg 鏈霉素。在實際食品微生物檢驗過程中，根據不同的需要對配制材料進行選擇。按照上述材料及配制方法完成培養(yǎng)基的配制，并將其裝入立式壓力蒸汽滅菌裝置當中，根據需要對pH 值進行調節(jié)。

2 食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基滅菌

培養(yǎng)基可選用物理法和化學法兩種滅菌方法，其中物理法包括濕熱滅菌法、干熱滅菌法等，化學法包括抗生素抑菌法、消毒劑消毒法等。濕熱滅菌法將培養(yǎng)基放置在高壓蒸汽裝置中，通過其潛熱作用以及穿透力，使菌體蛋白質凝固并變性[1]。高壓蒸汽裝置壓力通常在0.12 ～0.13 MPa，持續(xù)15 ～25 min 可得到最佳的滅菌效果。

干熱滅菌法利用恒溫干燥箱，將其內部溫度調節(jié)至155 ～165 ℃，持續(xù)70 ～90 min 后，將培養(yǎng)基放置在干燥箱中，達到滅菌的效果。

消毒劑消毒法常用的試劑包括甲醛（HCHO）、高錳酸鉀（KMnO4）、乙 醇（C2H6O）， 用0.5% ～0.6% 氯化汞、12.5%次氯酸鈉、飽和漂白粉等進行滅菌可達到良好的滅菌效果[2]?？股匾志ㄖ谐Ｒ姷目股匕ㄇ嗝顾?、鏈霉素和新霉素，將抗生素添加在培養(yǎng)基當中可以有效預防微生物感染，以此達到抑菌的效果。

3 食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基貯藏

按照需要將滅菌后的食品微生物檢驗常用培養(yǎng)基進行瓶裝保存或傾注至平板容器密封保存。通常情況下，培養(yǎng)基可在1.5 ～7.5 ℃的冰箱中貯藏。貯藏的有效期應當根據實際情況進行調整。

4 結語

本文針對幾種常見的食品微生物檢驗培養(yǎng)基的配制、滅菌及貯藏進行研究，為后續(xù)微生物培養(yǎng)基質量控制提供參考。在實際檢驗過程中，根據不同的檢驗目的選擇對應的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，以為檢驗結果準確性和精度的提高提供保證，以達到事半功倍的效果。