觀察益生菌干預(yù)對(duì)肝硬化患者治療臨床效果和腸道菌群的影響

趙麗然

（大慶龍南醫(yī)院，黑龍江 大慶 163453）

長(zhǎng)期慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染可演變?yōu)楦斡不桶┌Y，全球約有3.5億人受到感染，每年導(dǎo)致50萬(wàn)～100萬(wàn)人死亡。越來(lái)越多的研究表明，腸道微生物群的改變與肝硬化及其并發(fā)癥有關(guān)，如肝性腦病（HE）、自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎和其他感染等等，該致病機(jī)制可能與腸屏障的破壞有關(guān)。研究指出，LC患者經(jīng)益生菌處理后，雙歧桿菌明顯增多，而腸球菌和腸桿菌科等機(jī)會(huì)性病原菌明顯減少。經(jīng)益生菌治療后，腸道通透性參數(shù)（LPS和D-乳酸）和粘膜損傷指標(biāo)（DAO）均明顯改善[1～2]。基于此，本研究旨在評(píng)估含丁酸梭狀芽孢桿菌的益生菌混合物聯(lián)合嬰兒雙歧桿菌治療LC的效果，以期在臨床實(shí)踐中開(kāi)發(fā)一種新的LC輔助治療方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取32例LC患者，隨機(jī)分為對(duì)照、觀察組。其中對(duì)照組年齡40～70歲，平均（54.10±5.13）歲，病程2～6年，平均（5.21±1.10）年，其中男10例，女6例；

觀察組的年齡42～69歲，平均（55.21±7.20）歲，病程2～6年，平均（5.33±1.31）年，男9例，女7例；基線資料對(duì)比顯示，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。排除標(biāo)準(zhǔn)：過(guò)去2個(gè)月內(nèi)有明顯的HE病史；在過(guò)去4周內(nèi)使用益生菌、益生元、合生元或抗生素；存在神經(jīng)系統(tǒng)疾病或精神疾病；過(guò)去2個(gè)月有自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎或胃腸道出血史；已知活躍的微生物感染；有高蛋白飲食習(xí)慣。兩組均無(wú)感染等情況，意識(shí)清晰，自愿參與本試驗(yàn)。

1.2 方法

對(duì)照組采取常規(guī)治療，如抗感染、護(hù)肝等。

觀察組行益生菌干預(yù)治療：本研究所用的含丁酸梭狀芽孢桿菌與嬰兒雙歧桿菌的混合益生菌由科興生物制品有限公司生產(chǎn)。冷凍干燥的益生菌混合物每粒膠囊中，酪酸＞C.0107 CFU/g和活雙歧桿菌＞1106 CFU/g。劑量：1500 mg/次，每天三次，持續(xù)3個(gè)月。

在治療結(jié)束時(shí)，需從每個(gè)病人身上收集新鮮的糞便樣本（大約2 g）進(jìn)行細(xì)菌分析。使用QiampDNA糞便微型試劑盒（德國(guó)希爾登，QIAGEN）提取細(xì)菌基因組DNA。使用納米滴管ND-1000分光光度計(jì)分析細(xì)菌基因組DNA的數(shù)量，電泳檢測(cè)細(xì)菌基因組DNA的完整性和大小。所有細(xì)菌的基因組DNA都保存在20℃下以備使用。

1.3 觀察指標(biāo)

療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)如下：（1）顯效：膝關(guān)節(jié)功能恢復(fù)正常，局部皮膚無(wú)發(fā)熱，無(wú)新增包殼與死骨，局部骨質(zhì)愈合，無(wú)并發(fā)癥發(fā)生；（2）有效：膝關(guān)節(jié)功能有所改善，局部皮膚存在疼痛、紅腫情況，患者臨床癥狀有所緩解，無(wú)新增包殼與死骨，局部骨質(zhì)愈合，并發(fā)癥發(fā)生率較低；（3）無(wú)效：膝關(guān)節(jié)功能無(wú)改善，局部皮膚發(fā)熱紅腫，出現(xiàn)竇道和炎癥反應(yīng)，并發(fā)癥發(fā)生率較高。有效率=100%-無(wú)效率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)評(píng)價(jià)了連續(xù)變量分布，計(jì)量資料用百分比和頻率表示。此外，正態(tài)分布的連續(xù)值表示為均值和標(biāo)準(zhǔn)差，非正態(tài)分布的連續(xù)值表示為百分比和頻率。顯著性為P＜0.05。

2 結(jié) 果

2.1 兩組療效比較

對(duì)照組、觀察組的有效率分別是62.50%、93.75%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（x2=6.1442）。如表1所展示。

表1 兩組療效比較（n，%）

2.2 兩組患者糞便中主要細(xì)菌的差異

治療后，益生菌治療組與對(duì)照組腸道菌群總數(shù)基本一致。數(shù)據(jù)表明，觀察組經(jīng)益生菌治療后，I群梭菌和雙歧桿菌顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此外，經(jīng)益生菌處理后，觀察組腸球菌和腸桿菌科細(xì)菌明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討 論

腸道微生物群能夠產(chǎn)生各種各樣的化合物，這些化合物在調(diào)節(jié)遠(yuǎn)端器官的活動(dòng)中起著重要作用，而腸道微生物群相關(guān)的化合物，如短鏈脂肪酸、膽汁酸、膽堿代謝物、吲哚衍生物、維生素、多胺、脂質(zhì)、神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)活性物質(zhì)，以及下丘腦-垂體-腎上腺軸激素具有許多生物學(xué)功能。肝硬化的所導(dǎo)致的微生物失調(diào)會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥，如菌血癥和肝性腦病，并伴有小腸細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)和腸道通透性增加。近年來(lái)，有關(guān)研究揭示了慢性代謝性肝病，特別是非酒精性脂肪性肝病、酒精性肝病中腸道菌群與宿主代謝的關(guān)系，以及與代謝失調(diào)相關(guān)的代謝性疾病如糖尿病和肥胖癥的腸道菌群代謝相互作用。最近，有研究對(duì)腸道和肝臟之間的關(guān)系以及腸道和肝臟如何調(diào)節(jié)肝硬化患者全身代謝變化，結(jié)果顯示，肝硬化患者血清磷脂、游離脂肪酸、多不飽和脂肪酸，尤其是二十碳五烯酸、花生四烯酸和二十二碳六烯酸與特定糞便菌群有顯著相關(guān)性。許多臨床和實(shí)驗(yàn)報(bào)告支持脂肪酸代謝與腸道菌群之間的關(guān)系，在使用益生菌治療的肝硬化患者中，各種血液代謝組如細(xì)胞因子、氨基酸和維生素與腸道微生物群相關(guān)。因此，對(duì)腸道微生物群-肝臟代謝網(wǎng)絡(luò)的未來(lái)評(píng)估以及使用益生菌、合生元和益生元以及充足的營(yíng)養(yǎng)對(duì)這些關(guān)系進(jìn)行干預(yù)，將有助于肝硬化患者治療和預(yù)防的發(fā)展。

人體腸道微生物群在維持腸道內(nèi)環(huán)境平衡方面起著至關(guān)重要的作用，這對(duì)機(jī)體的整體健康至關(guān)重要。腸道微生物群的失調(diào)會(huì)改變結(jié)腸腔的微環(huán)境，尤其是pH值，這有助于增加腸道微生物群的氨產(chǎn)量，增加從結(jié)腸腔到血液的氨吸收，加劇臨床癥狀，誘發(fā)其他并發(fā)癥，如肝性腦病等。幾項(xiàng)研究已經(jīng)證實(shí)，益生菌是有效和安全的，毒性最小，并且在治療LC時(shí)幾乎沒(méi)有不良反應(yīng)。與乳果糖相比，益生菌安全性高，無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)，并且耐受性更好。

酪酸桿菌和嬰兒雙歧桿菌的益生菌混合物常用于調(diào)節(jié)腸道微生物群。酪酸桿菌（屬于梭菌集群I）是一種典型的產(chǎn)丁酸、產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽(yáng)性厭氧菌，能用于調(diào)節(jié)腸道菌群和治療腸道疾病；其次，作為腸道菌群的共生菌，嬰兒雙歧桿菌通常與促進(jìn)腸道健康有關(guān)。一項(xiàng)研究表明，嬰兒雙歧桿菌可以特異性地緩解腸易激綜合征的各種癥狀，療效顯著。以上兩種有益細(xì)菌可產(chǎn)生廣泛的代謝物，主要是短鏈脂肪酸，如丁酸和醋酸鹽。短鏈脂肪酸的產(chǎn)生可以改變細(xì)菌的粘附力，在維持腸道中起著重要作用，如保護(hù)黏膜屏障功能等。本次研究結(jié)果顯示，對(duì)照、觀察組的有效率分別是62.50%、93.75%，充分顯示益生菌干預(yù)治療的有效性。

綜上所述，益生菌對(duì)LC患者的治療作用顯著，可有效增加I群梭菌和雙歧桿菌總數(shù)，抑制腸球菌和腸桿菌科細(xì)菌增值生長(zhǎng)，值得推廣。