妊娠期糖尿病患者不同孕周血漿Visfatin表達檢測

胡麗燕，杜秀萍

(山西省兒童醫院山西省婦幼保健院婦產科，山西 太原 030000)

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)表現為妊娠前糖代謝或糖耐量正常，妊娠期出現糖耐量降低。近年來GDM發病率不斷升高，超過15%的孕婦被診斷為GDM[1]。GDM可引起血管病變、影響母嬰結局，如導致早產、胎兒宮內窘迫、流產、高血壓相關疾病等。目前，GDM具體發病機制尚未完全闡明，可能與胰島素抵抗(insulin resistance,IR)及胰島β細胞功能受損有關[2]。早期篩查并定期隨訪、監測對提高GDM患者妊娠期安全，改善妊娠結局有重要意義。目前常用的糖化血紅蛋白(hemoglobin A1c，HbA1c)、口服葡萄糖耐量試驗(oral glucose tolerance test,OGTT)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2 h血糖(2 h postprandial plasma glucose,2 hPG)等雖然可檢測GDM患者血糖變化及糖耐量受損情況，但需多次抽血，為有創檢測，不易被孕婦接受。另外，上述檢測需要患者服用葡萄糖，部分患者不愿配合，阻礙其廣泛應用。Visfatin是由內臟脂肪細胞分泌的肽類激素，具有促進脂肪分化及脂肪細胞成熟的作用。最新研究認為[3]，Visfatin具有胰島素樣作用，可改善IR，發揮降血糖的功能。研究顯示[4]，GDM患者血漿Visfatin顯著高于正常孕婦，且血漿Visfatin與胎兒宮內發育有關。國外研究顯示[5]，不同孕周的GDM患者血漿Visfatin含量存在差異。目前，不同孕周血漿Visfatin含量與GDM患者IR的關系研究的較少。本研究通過檢測GDM患者不同孕周血漿Visfatin水平變化，分析其臨床意義。現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年5月—2019年5月我院診治孕24～26周的GDM患者40例，同期OGTT試驗正常的孕24～26周孕婦40例為正常糖耐量(normal glucose tolerance,NGT)組。納入標準：①GDM的診斷符合2015年制訂的標準[6]：FPG≥5.1 mmol/L，1 hPG≥10.0 mmol/L，2 hPG≥8.5 mmol/L，任一項滿足者均可診斷為GDM；②年齡20～35歲；③孕婦均為單胎自然妊娠，且既往身體健康；④GDM患者血糖的控制水平符合指南[7]；餐前及餐后2 h血糖值分別≤5.3、6.7 mmol/L，特殊情況下可測餐后1 h血糖 (≤7.8 mmol/L)；夜間血糖不低于3.3 mmol/L；妊娠期HbA1c宜<5.5%。⑥均知情同意，愿意配合該研究者。排除標準：①合并腫瘤者；②合并妊娠期高血壓、多囊卵巢綜合征等；③合并潰瘍性腸炎或全身感染者；④肝腎功能不全者；⑤近期使用糖皮質激素治療者；⑥肥胖、中心性肥胖患者。GDM組和NGT組年齡、孕前體重指數、產次等比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

本研究經醫院倫理委員會批準通過，研究對象均簽署知情同意書。

表1 2組一般資料比較 Table 1 Comparison of general data between two groups

1.2方法

1.2.1血液采集 分別于孕24～26周、31～33周、38～40周采集2組孕婦晨起空腹靜脈血5 mL，加入抗凝劑抗凝后3 500 r/min離心12 min分離血漿，-20 ℃保存。

1.2.2血漿Visfatin含量檢測 采用酶聯免疫吸附測定法檢測2組血漿Visfatin含量，試劑盒購自美國Sigma公司，具體步驟按試劑盒說明書進行操作。根據孕24～26周血漿Visfatin含量中位數，將GDM組分為高Visfatin亞組和低Visfatin亞組各20例。

1.2.32組血漿FPG、HbA1c、空腹胰島素(fasting insulin,FINS)及血脂檢測 采用SE2001全自動生化分析儀(美國BD公司)檢測2組血漿FPG、HbA1c、FINS、三酰甘油(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平，并計算胰島素抵抗指數(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5[7]。

1.2.4新生兒發育狀況評估 記錄新生兒體質量、身長，計算新生兒ponderal指數(ponderal index,PI)=體重(g)/身長(cm)3×100[8]。

1.3統計學方法 應用SPSS 18.0軟件進行統計分析。計量資料采用獨立樣本t檢驗、單因素方差分析、SNK-q檢驗；Pearson相關法分析血漿Visfatin與HOMA-IR的相關性。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1GDM組與NGT組不同孕周血漿Visfatin水平比較 GDM組高Visfatin亞組、低Visfatin亞組及NGT組血漿Visfatin水平隨孕周增加而升高，兩兩比較差異均有統計學意義(P<0.05)。GDM組高Visfatin亞組孕24～26周血漿Visfatin高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組(P<0.05)，高Visfatin亞組、低Visfatin亞組孕31～33周、38～40周血漿Visfatin與NGT組比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 GDM組與NGT組不同孕周血漿Visfatin水平比較 Table 2 Comparison of plasma Visfatin levels in GDM group and NGT group at different gestational weeks

2.2GDM組與NGT組孕24～26周糖代謝和脂類代謝比較 GDM組高Visfatin亞組孕24～26周FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR及TG、TC、LDL-C均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組(P<0.05)，GDM組高Visfatin亞組孕24～26周血漿HDL-C低于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組低于NGT組，差異均有統計學意義(P<0.05)。3組孕31～33周與38～40周FPG、 HbA1c比較差異均無統計學意義(P>0.05)，見表3～5。

表3 GDM組與NGT組孕24～26周糖代謝指標比較Table 3 Comparison of gestational glucose metabolism indicators between GDM group and NGT group at 24-26 weeks of gestation

表4 GDM組與NGT組孕31～33周與38～40周FPG、 HbA1c比較 Table 4 Comparison of FPG,HbA1c between GDM group and NGT group at 24-26 weeks and 38-40 weeks of gestation

表5 GDM組與NGT組孕24～26周脂類代謝指標檢測 Table 5 Detection of lipid metabolism indicators in the GDM group and the NGT group at 24-26 weeks of gestation

2.3GDM組孕24～26周血漿Visfatin水平與HOMA-IR的相關性分析 GDM組孕24～26周血漿Visfatin與孕24～26周HOMA-IR(r=0.429,P=0.036)、31～33周HOMA-IR(r=0.568,P=0.025)、孕38～40周HOMA-IR(r=0.672,P=0.003)均呈明顯正相關，見表6，圖1～3。

2.4GDM組與NGT組胎兒宮內發育狀況比較 GDM組高Visfatin亞組新生兒體重、PI均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組，兩兩比較差異均有統計學意義(P<0.05)，見表7。

表6 GDM組孕24～26周血漿Visfatin水平與HOMA-IR的Pearson相關性分析Table 6 Pearson Correlation analysis between plasma Visfatin at 24-26 weeks of gestation and HOMA-IR in GDM group

圖1 孕24～26周血漿Visfatin與孕24～26周HOMA-IR相關的散點圖Figure 1 Scatter plot of plasma Visfatin at 24-26 weeks of gestation and HOMA-IR at 24-26 weeks of gestation

表7 GDM組與NGT組胎兒宮內發育狀況比較 Table 7 Comparison of fetal intrauterine development status between GDM group and NGT group

3 討 論

GDM可影響母嬰妊娠結局，因此早期有針對性干預對改善母體及新生兒遠期預后有重要意義。目前，IR及胰島β細胞功能低下在GDM發生中的作用已得到公認。肥胖尤其腹型肥胖是引起IR的重要因素。GDM與肥胖均存在脂類代謝紊亂、糖耐量受損等病理基礎，而此過程與脂肪細胞因子的分泌密切相關。Visfatin屬于脂肪細胞因子家族，可促進脂肪聚集、通過自分泌和旁分泌促進脂肪細胞成熟，促進葡萄糖轉運和脂質聚積，是調節機體物質轉運和能量代謝的重要因子，因此血漿一定量的Visfatin對人體生長發育和營養的維持有重要作用。康瑛等[9]對妊娠期女性血漿Visfatin進行監測發現，血漿Visfatin水平在不同孕期中出現波動，隨著孕周增加，其含量呈增加趨勢。可能的原因是隨著妊娠程度的增加，機體各種組織對胰島素的敏感性降低，Visfatin具有胰島素樣作用，為了保證孕期母體及胎兒的營養供應，通過升高Visfatin水平來增強胰島素的作用[10]。本研究NGT組隨著孕周增加血漿Visfatin水平而升高，與文獻[9]報道相符。

血漿Visfatin與GDM發病的相關性尚未闡明。李麗等[4]對100例GDM患者和100例正常妊娠孕婦血漿Visfatin檢測可知，GDM患者血漿Visfatin明顯高于正常妊娠孕婦。付穎等[11]研究表明，GDM患者血漿、臍血及胎盤組織Visfatin水平均高于糖耐量正常孕婦，且其含量可影響胎兒宮內發育。國外文獻報道[5]，隨GDM患者孕周增加，血漿Visfatin含量逐漸增高，且在孕晚期達到最高。本研究發現，GDM組高Visfatin亞組、低Visfatin亞組及NGT組血漿Visfatin水平均隨孕周增加而升高，但僅孕24～26周血漿Visfatin水平在各組間存在差異，3組孕31～33周、38～40周血漿Visfatin比較差異無統計學意義，與文獻報道相符[12]。原因如下：①雖然正常孕婦也可出現IR，但在GDM患者中IR程度更嚴重，導致血糖明顯升高，在此應激環境下，機體為了保證正常的物質代謝，代償性上調血漿Visfatin，這可能是GDM患者孕24～26周血漿Visfatin高于NGT組的原因，且增高的漿Visfatin并不足以完全抵消IR，因此出現高血漿Visfatin與IR并存；②隨著妊娠進展，胎兒附屬物也可分泌Visfatin，導致其血漿含量升高，且妊娠晚期不規則宮縮可刺激羊膜分泌Visfatin，綜合原因造成NGT孕婦與GDM孕婦無明顯差異。

GDM患者呈現明顯的糖耐量減低以及脂肪代謝紊亂，糖代謝異常主要表現為FPG升高以及FINS代償性增高；脂類代謝紊亂體現為TG升高、HDL-C降低。本研究GDM組高Visfatin亞組孕24～26周FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR及TG、TC、LDL-C均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組，GDM組高Visfatin亞組孕24～26周血漿HDL-C低于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組低于NGT組，符合GDM患者糖類和脂類代謝紊亂的表現，且Visfatin含量越高脂類代謝紊亂越明顯，與文獻報道相符[13]。動物實驗證實，Visfatin可通過誘導肝臟胰島素受體的酪氨酸磷酸化，導致大量TG在大鼠脂肪細胞聚積，引起大鼠肥胖[14]；而肥胖可降低蛋白酪氨酸磷酸酶活性，導致胰島素受體去磷酸化，以致激活胰島素的信號通路受抑制，引起IR。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸可促進脂聯素活性，增強組織器官對胰島素的敏感性，而Visfatin是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸合成的限速酶，可通過煙酰胺腺嘌呤二核苷酸影響IR。目前，在小鼠細胞模型[15]及肥胖[16]患者中，觀察到血漿Visfatin與胰島素敏感性有關。文獻報道，血漿Visfatin升高可影響糖類脂類代謝，且與IR呈正相關[12,17]。本研究結果顯示，GDM組孕24～26周血漿Visfatin與孕24～26周、31～33周、38～40周HOMA-IR均呈明顯正相關。可能是由于在高血糖的影響下，母體各種靶組織逐漸出現生物合成失調、功能受損，孕24～26周可反映組織損傷程度。

葡萄糖不僅是母體各種代謝的營養來源，且葡萄糖可通過胎盤屏障，為胎兒生長發育提供營養。GDM影響糖類代謝，因此可影響胎兒在宮內的發育。文獻報道，GDM可增加早產兒、巨大兒、胎兒先天性畸形發生率[18]。血漿Visfatin水平升高能引起胎盤組織和臍血Visfatin水平增加，且其含量與血漿中相當，呈明顯正相關。譚琴等[12]研究發現，GDM患者血漿和臍血Visfatin含量均升高，且可引起胎兒肥胖。本研究發現，GDM組高Visfatin亞組新生兒體質量、PI均高于低Visfatin亞組，且低Visfatin亞組高于NGT組，可能是由于GDM患者血漿高Visfatin引起胎盤組織Visfatin升高，Visfatin可通過脂聯素等多種途徑促進糖類轉運和脂質代謝，導致胎兒體質量增加及PI升高，進一步導致巨大兒、及難產發生[9,19]。

血漿Visfatin含量隨孕周增加而升高，GDM患者孕24～26周血漿Visfatin含量高于NGT孕婦；孕24～26周Visfatin與GDM患者糖類和脂質代謝紊亂有關，并促進胎兒宮內發育。檢測孕24～26周血漿Visfatin有助于GDM患者糖類及脂質代謝紊亂及病情嚴重程度的評估。本研究不足：樣本量較小，且為單中心研究；未進行多因素分析。因此，孕24～26周血漿Visfatin對GDM患者妊娠結局的影響，確切結論需大樣本量、多中心研究證實。