乙肝病毒血清學檢驗采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果比照觀察

刁穎

乙肝是由乙肝病毒感染導致的傳染性疾病,部分患者無癥狀,典型表現(xiàn)為惡心、嘔吐、食欲減退、黃疸、發(fā)熱等癥狀［1］。乙肝病毒的傳播途徑較多,主要包括生活接觸傳播、輸血傳播、母嬰傳播等方式［2］。早期診斷并治療干預對于控制病毒的傳播、擴散并降低病毒感染的嚴重程度具有重要的意義。實時熒光定量聚合酶鏈式反應(PCR)是診斷乙肝的金標準,但由于時間長、費用高,并不是首選。目前臨床主要采用酶聯(lián)免疫法和化學發(fā)光法檢測乙肝病毒,兩種方法各有優(yōu)缺點。本研究比照乙肝病毒血清學檢驗采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果。

1 資料與方法

1.1一般資料 納入本院2015年1月～2019年12月收治的5000例行婚前檢查體檢者。其中男2529例,女2471例；年齡20～42歲,平均年齡(36.4±5.8)歲。

1.2納入及排除標準

1.2.1納入標準 ①研究對象為臨床體檢者,病歷完整。②簽署本研究知情同意書。

1.2.2排除標準 ①合并血液系統(tǒng)疾病的患者。②合并惡性腫瘤疾病的患者。③合并嚴重精神障礙性疾病的患者。④妊娠期或哺乳期女性患者。⑤中途因個人原因退出的患者。

1.3方法 采集體檢者的靜脈血液標本,同時采用酶聯(lián)免疫法檢驗和化學發(fā)光法檢驗檢測乙肝標志物。抽血前1 d晚上禁食,抽取空腹靜脈血5 ml,經差速離心后分離血清用于檢測。①酶聯(lián)免疫法檢驗的具體操作為：根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(上海科華生物工程股份有限公司)中說明書的相關操作進行,按照相關試劑進行操作,將相應量的標準液滴入陽性、陰性孔中,隨后根據(jù)要求分別滴加相應量的特異酶混勻后進行封膜操作。經 37℃水浴孵育30 min后進行洗板、顯色。經酶標儀比色得出檢測結果。②化學發(fā)光法檢驗的具體操作為：采用全自動化學發(fā)光免疫分析儀(羅氏 Cobas e411)以及原裝配套試劑,嚴格根據(jù)操作說明書進行操作,記錄檢測結果。

1.4觀察指標 ①比較兩種檢測方法在不同血清表面抗原濃度下的靈敏度；②比較兩種檢測方法的陽性檢出率；③比較兩種檢測方法的乙肝病毒標志物檢出率。

1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1兩種檢測方法在不同血清表面抗原濃度下的靈敏度比較 化學發(fā)光法在不同血清表面抗原濃度下的檢測靈敏度均高于酶聯(lián)免疫法,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法在不同血清表面抗原濃度下的靈敏度比較［n(%)］

2.2兩種檢測方法的陽性檢出率比較 化學發(fā)光法陽性檢出率0.86%(43/5000)高于酶聯(lián)免疫法的0.52%(26/5000),差異具有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。

2.3兩種檢測方法的乙肝病毒標志物檢出率比較 化學發(fā)光法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb檢出率均高于酶聯(lián)免疫法,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩種檢測方法的乙肝病毒標志物檢出率比較［n(%)］

3 討論

婚前檢查指的是結婚前對男女雙方進行常規(guī)體格檢查和生殖器檢查,其中包括乙肝、梅毒、先天性遺傳病等,以便發(fā)現(xiàn)疾病,保證婚后的婚姻幸福?；榍皺z查對于男女雙方都有著重大意義。乙肝是臨床常見的傳染性疾病,是由乙肝病毒感染導致的慢性疾病。乙肝病毒具有較強的傳染性,可以通過血液、體液等進行傳播。近年來雖然發(fā)病率隨著臨床疾病防控有所緩解,但發(fā)病基數(shù)仍然較大,發(fā)病形勢不容樂觀。乙肝病毒感染肝臟細胞后,可以通過一系列肝臟病理損害導致肝細胞功能障礙,肝臟正常功能受損,導致患者出現(xiàn)食欲減退、肝區(qū)疼痛、腹脹、惡心等癥狀,嚴重影響患者的生活質量。乙肝病毒長期遷延不愈可以導致肝硬化、肝癌等病變,對患者生命健康造成嚴重威脅。目前臨床研究發(fā)現(xiàn)婚孕前檢查時,受檢人員中出現(xiàn)乙肝表面抗原陽性時,其配偶及子女出現(xiàn)乙肝病毒感染的幾率將明顯增加,且乙肝病毒感染還會影響母嬰結局,易導致產婦及新生兒死亡［3］。因此,加強婚孕前檢查乙肝病毒性肝炎發(fā)生狀況在控制乙肝病毒性肝炎傳染、改善母嬰結局方面具有重要價值。

乙肝病毒感染的早期患者癥狀表現(xiàn)通常不典型,容易導致誤診、漏診,不利于患者的早期治療,如何通過科學有效的診斷措施提高臨床檢出率是乙肝研究的重點。目前乙肝篩查只要通過檢測乙肝標志物,乙肝標志物檢測包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb。

乙肝是威脅人們生命健康的常見病。它通常通過血液傳播。近年來,我國感染率約為4.02%,感染人數(shù)約為4000萬。目前,本病的臨床檢查方法很多,但選擇準確率高、檢出率高的診斷方法至關重要?；瘜W發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法是臨床常用的檢測手段,通過顯色反應可以對相關指標進行定量和定性分析,具有較高的檢測準確性［4］。早期檢測和診斷對于臨床治療乙肝具有重要意義,可以防止進一步的并發(fā)癥損害。

酶聯(lián)免疫法相對簡單、成本低,常用于大量血清樣品的檢測,但易污染樣品,經常出現(xiàn)假陰性、假陽性現(xiàn)象,靈敏度相對低于化學發(fā)光法,不宜用于乙肝病毒感染的動態(tài)監(jiān)測或乙肝病毒感染的早期檢測。化學發(fā)光法檢測乙肝病毒標志物靈敏度較高,對樣品的干擾因素相對較少,自動化程度較高,可用于乙肝病毒標志物的定量檢測［5］。適用于乙肝病毒感染的動態(tài)監(jiān)測。目前,酶聯(lián)免疫法能顯著提高特異性和敏感性,但酶聯(lián)免疫法仍存在一定的假陰性和假陽性結果,特別是在無償獻血等乙肝病毒感染率較低的人群中,假陽性問題非常突出。此外,國內常用的乙肝酶聯(lián)免疫試劑沒有灰色地帶,不同廠家的試劑盒截止計算方法也不一致。同時,國產試劑盒之間的檢測異質性很大,這主要是由于假陽性因素較多。在臨床實驗室測試中,程序和使用方法應該經過評估,以確保它們完全符合要求,然后才能采用。在陽性和陰性試驗中,一般采用試驗方法來判斷不同方法是否具有相關性和一致性,但本研究中,酶聯(lián)免疫法和化學發(fā)光法在乙肝患者臨床檢測中的相關系數(shù)有較大差異,提示化學發(fā)光法可用于臨床術前篩查和血源篩選?；瘜W發(fā)光法具有靈敏度高、特異性強的特點,雖然有一些遺漏,但仍有較高的檢出率。

本研究選擇2015年1月～2019年12月來本院就診的5000例婚前檢查體檢者,同時采用酶聯(lián)免疫法檢驗和化學發(fā)光法檢驗兩種方法檢測乙肝標志物,對比兩種方法檢驗效果差異,結果表明,化學發(fā)光法在不同血清表面抗原濃度下的檢測靈敏度均高于酶聯(lián)免疫法,差異均具有統(tǒng)計學意義 (P<0.05)。化學發(fā)光法陽性檢出率高于酶聯(lián)免疫法,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)?；瘜W發(fā)光法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb檢出率均高于酶聯(lián)免疫法,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結合研究結果進行分析,酶聯(lián)免疫法雖然操作簡便、價格低廉,但容易受外界因素的干擾,臨床應用的靈敏度和陽性檢出率不高,相比之下化學發(fā)光法采用全自動儀器和配套試劑從而實現(xiàn)了檢測的標準化、自動化,進一步提高檢測效果,有利于提高檢測的準確度。

綜上所述,在婚前檢查中乙肝病毒血清學的檢測意義重大,采用化學發(fā)光法檢測的靈敏度和陽性率高于酶聯(lián)免疫法,相比之下檢測更加自動化和科學化,檢測結果更加穩(wěn)定,臨床應用價值更高。通過采用化學發(fā)光法更有利于早期診斷并防止進一步感染擴大,值得臨床推廣使用。