CA199、NSE、CA153、CEA聯合檢測在腦膠質瘤診斷及預后分析中的應用*

張 敏，牛發良，趙東霞

河北北方學院附屬第一醫院核醫學科，河北張家口 075000

腦膠質瘤屬于常見顱內惡性腫瘤之一，發病率、致死率較高，由于侵襲性較強，血供豐富，治療后易復發，患者預后不佳[1]。目前，臨床主要采用病理組織學確診腦膠質瘤，但檢測易受到操作人員及檢測部位的影響，且屬于有創檢測，不能進行重復操作，因此，尋找準確、微創、可重復的檢測方法十分必要[2]。血清腫瘤標志物在各種實體瘤篩查中廣泛應用，如血清糖類抗原(CA)199、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、CA153、癌胚抗原(CEA)在肺癌、乳腺癌等腫瘤中均具有一定的診斷價值，但由于器官特異性，4項指標在腫瘤診斷中的診斷效能差異較大[3-4]，單項檢測診斷效能并不高，但聯合檢測在腫瘤中的診斷目前仍存在一定爭議。本研究通過檢測腦膠質瘤患者血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平，旨在分析聯合檢測在腦膠質瘤診斷及預后分析中的價值?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2017年8月至2019年9月在本院治療的52例腦膠質瘤患者作為腦膠質瘤組，其中男33例，女19例；年齡18～74歲，平均(58.34±11.27)歲；平均體質量指數(BMI)為(22.36±1.27)kg/m2；吸煙者21例；飲酒者24例。依據WHO腫瘤病理分級[5]：Ⅰ～Ⅱ級(低級別腦膠質瘤組)32例，Ⅲ～Ⅳ級(高級別腦膠質瘤組)20例。納入標準：(1)患者首次患病；(2)未接受過化療、放療等腫瘤相關治療；(3)年齡不超過80歲；(4)經病理學檢查證實為腦膠質瘤；(5)膠質瘤分級符合WHO中樞神經系統腫瘤分級標準[5]。排除標準：(1)臨床資料不完整；(2)多發腦腫瘤；(3)存在其他部位原發性惡性腫瘤；(4)肝、腎功能不全；(5)合并精神系統疾病，無法配合檢查。另選取在本院接受腦外傷顱內壓手術患者60例作為對照組，其中男35例，女25例；年齡18～74歲，平均(57.61±10.45)歲；平均BMI為(22.18±1.32)kg/m2；吸煙者23例；飲酒者29例。腦膠質瘤組和對照組患者性別、年齡、BMI、吸煙比例、飲酒比例等比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會批準；且所有受試者均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1試劑與儀器 CA199檢測試劑盒購自上海透景生命科技股份有限公司(貨號：CA19901)。NSE檢測試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司[貨號：JK-(a)-2388]。CA153檢測試劑盒購自齊一生物科技(上海)有限公司(貨號：QY-H10637)。CEA檢測試劑盒購自上海鈺博生物科技有限公司(貨號：YBEA150Hu)。FC型酶標儀購自美國賽默飛世爾公司。

1.2.2標本采集 所有受試者入院后于治療前采集外周靜脈血5 mL，收集在抗凝管內，3 000×g離心10 min后收集血清，置于-20 ℃保存。

1.2.3CA199、NSE、CA153、CEA水平檢測 采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平。將標準品梯度稀釋，酶標包被板設空白對照孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、待測樣品孔。添加50 μL待測血清(血清稀釋度為 5 倍)，混勻后用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min，用洗滌液清洗5次，拍干后添加酶標試劑50 μL，空白對照孔除外，封板膜封板后置37 ℃溫育30 min，用洗滌液清洗5次，拍干。每孔先加入顯色劑A 50 μL，再加入顯色劑B 50 μL，混勻后37 ℃避光顯色15 min。 每孔加終止液50 μL，終止反應，以空白對照孔調零，450 nm波長依序測量各孔吸光度(A)值。制作標準品標準曲線，測得各指標A值，計算初始濃度。

1.2.4判定標準 采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)評估CA199、NSE、CA153、CEA在腦膠質瘤診斷中的最佳臨界值，根據臨界值判定腦膠質瘤診斷的陽性、陰性結果。CA199、NSE、CA153、CEA聯合檢測時，當其中一項為陽性，則聯合檢測結果為陽性。

1.2.5預后評估 腦膠質瘤患者治療后1個月采用門診或電話隨訪方式，記錄MRI復查結果，主要檢測腦部腫瘤的變化，根據WHO評價標準評估患者近期預后[5]，治療后腫瘤完全緩解、部分緩解視為預后良好，病灶穩定及進展視為預后不良。

2 結 果

2.1腦膠質瘤組和對照組患者血清中 CA199、NSE、CA153、CEA水平比較 腦膠質瘤組患者血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平均較對照組高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 腦膠質瘤組和對照組患者血清CA199、NSE、CA153、CEA水平比較

2.2不同惡性程度腦膠質瘤患者血清中 CA199、NSE、CA153、CEA水平比較 與低級別腦膠質瘤組相比，高級別腦膠質瘤組患者血清CA199、NSE、CA153、CEA水平均升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同惡性程度腦膠質瘤患者CA199、NSE、CA153、CEA水平比較

2.3CA199、NSE、CA153、CEA對腦膠質瘤的診斷價值分析 ROC曲線分析顯示，NSE診斷腦膠質瘤的曲線下面積(AUC)為0.709(95%CI:0.616～0.791)，臨界值為29.24 U/mL；CA199診斷腦膠質瘤的AUC為0.859(95%CI:0.781～0.918)，臨界值為29.48 U/mL；CA153診斷腦膠質瘤的AUC為0.782(95%CI:0.694～0.854)，臨界值為49.19 U/mL；CEA診斷腦膠質瘤的AUC為0.630(95%CI:0.694～0.854)，臨界值為12.40 ng/mL。以各項指標的臨界值作為陽性評定標準，則NSE診斷腦膠質瘤的靈敏度為61.54%，特異度為73.33%，準確度為67.86%；CA199診斷腦膠質瘤的靈敏度為72.55%，特異度為75.00%，準確度為73.87%；CA153診斷腦膠質瘤的靈敏度為68.75%，特異度為70.31%，準確度為69.64%；CEA診斷腦膠質瘤的靈敏度為63.04%，特異度為65.15%，準確度為64.29%。見圖1和表3。

2.4聯合檢測與單項檢測診斷效能對比 NSE、CA199、CA153、CEA聯合診斷的靈敏度為88.46%，特異度為81.67%，準確度為84.82%。4項指標聯合診斷的靈敏度、準確度均高于單項檢測，差異有統計學意義(P<0.05)。

圖1 CA199、NSE、CA153、CEA對腦膠質瘤診斷的ROC曲線

表3 CA199、NSE、CA153、CEA單項檢測及聯合檢測對腦膠質瘤的診斷結果(n)

2.5CA199、NSE、CA153、CEA水平與腦膠質瘤患者預后的關系 治療后1個月，預后良好組41例，預后不良組1例。與預后良好組相比，預后不良組患者血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平均顯著升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 CA199、NSE、CA153、CEA水平與腦膠質瘤患者預后的關系

2.6影響腦膠質瘤患者預后的Logistic回歸分析 以預后結果作為因變量，以患者NSE、CA153、CA199、CEA水平作為自變量，Logistic回歸分析結果顯示，NSE、CA153、CA199、CEA 是影響腦膠質瘤患者預后的獨立因素。見表5。

表5 影響腦膠質瘤患者預后的Logistic回歸分析結果

3 討 論

腦膠質瘤是臨床上發病率、復發率、致死率高的神經系統腫瘤之一。臨床主要采用手術輔助放化療及免疫治療腦膠質瘤，但由于腦膠質瘤位置特殊，腫瘤容易向腦組織浸潤性增長，且腦組織缺乏有效免疫系統，造成腦膠質瘤預后較差[6]。腦膠質瘤患者臨床癥狀及體征比較復雜，目前，臨床主要采取MRI、超聲、腦脊液、腦電圖等方式檢測，然而在腫瘤初期階段，臨床特征無特異性[7]，無法早期診斷腦膠質瘤。因此，尋找早期診斷腦膠質瘤的有效方式對于改善患者預后具有重要意義。

腫瘤標志物是從腫瘤細胞分泌至組織或體液中的物質，CA199屬于類糖脂分子。過往研究發現，在胃癌、胰腺癌等癌細胞產生的CA199進入血液循環，使血清中CA199水平升高，可作為腫瘤檢測標志物[8-9]。目前，CA199在腦部腫瘤中的報道不多。WANG等[10]研究發現，顱內表皮樣囊腫患者血清中CA199水平明顯高于對照組，且與患者臨床參數如腫瘤大小等具有明顯正相關關系，ROC曲線分析發現CA199對顱內表皮樣囊腫診斷的AUC為0.8，說明CA199對顱內表皮樣囊腫具有較高的診斷價值。姜宇等[11]研究發現，CA199在腦膜癌患者腦脊液中水平明顯升高，對疾病診斷具有一定的價值。以上研究表明，CA199水平的異常升高可能在腦部腫瘤中具有一定的診斷價值。本研究結果顯示，腦膠質瘤患者血清CA199水平明顯高于對照組，隨著腫瘤惡性程度的升高而逐漸升高，且對腦膠質瘤診斷的AUC為0.859，靈敏度為72.55%，特異度為75.00%，準確度為73.87%，提示CA199與腦膠質瘤發生、發展相關，對腦膠質瘤具有一定的診斷價值。

NSE屬于烯醇化酶同工酶，在神經元、紅細胞及神經細胞中表達，是組織分布特異性因子，多數學者認為NSE對神經內分泌腫瘤、腦卒中、顱腦損傷等疾病具有一定的診斷價值[12]。GEORGANTZI等[13]研究發現，神經母細胞瘤患者中NSE水平明顯升高，經治療后水平降低，對疾病的診斷、預后評估具有一定的臨床價值。姜利華等[14]研究發現，NSE在腦膠質瘤中水平升高，對腦膠質瘤的發生具有一定的診斷價值。本研究發現腦膠質瘤患者血清NSE水平明顯高于對照組，隨著腫瘤惡性程度的升高而逐漸升高，且對腦膠質瘤診斷的AUC 為0.709，靈敏度為61.54%，特異度為73.33%，準確度為67.86%，提示NSE對腦膠質瘤具有一定的診斷價值。

CA153屬于大分子量糖蛋白，主要定位于腫瘤細胞表面，當細胞發生癌變后從細胞上脫落進入血清中造成血清CA153水平升高。以往研究顯示，在乳腺癌、卵巢癌中其陽性檢出率較高[15]。CA153在腦部腫瘤中的報道較少，有研究發現，CA153在非小細胞肺癌患者腦轉移中水平顯著升高，是影響非小細胞肺癌腦轉移患者預后的獨立因素[16]。本研究發現，腦膠質瘤患者血清CA153水平明顯高于對照組，隨著腫瘤惡性程度的升高而逐漸升高，且對腦膠質瘤診斷的AUC為0.782，靈敏度為68.75%，特異度為70.31%，準確度為69.64%，提示CA153與腦膠質瘤發生、發展相關，對腦膠質瘤具有一定的診斷價值。

CEA主要存在胚胎、癌組織中，當正常細胞轉化為惡性腫瘤細胞時，基因調控受損，血清中會產生大量CEA[17]。過往研究發現，非小細胞肺癌患者中CEA水平升高與腫瘤的發生、復發有關[18]。目前，CEA在腦腫瘤中的研究不多，但有研究發現CEA在腫瘤腦轉移中水平升高，對腫瘤腦轉移具有一定的診斷價值。本研究結果顯示，腦膠質瘤患者血清CEA水平明顯高于對照組，隨著腫瘤惡性程度的升高而逐漸升高，CEA對腦膠質瘤診斷的AUC為0.630，靈敏度為63.04%，特異度為65.15%，準確度為64.29%，提示CEA對腦膠質瘤具有一定的診斷價值。

高效的生物學標志物不但應具有取材方便、檢測迅速、成本低廉等優勢，還應具有較高的靈敏度和特異度。血清腫瘤標志物往往比影像學更早發現病情，然而血清診斷靈敏度雖高，但存在較多假陽性和假陰性，不能滿足臨床診斷需求。不同的檢測方法間可提供互補的信息，達到取長補短的效果。本研究發現NSE、CA153、CA199、CEA 4項指標聯合檢測后，靈敏度、準確度均高于單項檢測，提示聯合檢測診斷價值更佳。

近期研究發現，CA199、CA153等血清腫瘤標志物與腫瘤患者預后有關[19]。本研究結果顯示，與預后良好組相比，預后不良組患者血清NSE、CA153、CA199、CEA 水平升高，推測上述4項指標水平升高可能與腦膠質瘤患者預后不良有關。進一步進行Logistic回歸分析發現，NSE、CA153、CA199、CEA為影響腦膠質瘤患者預后的獨立因素，提示NSE、CA153、CA199、CEA水平高的腦膠質瘤患者預后不佳。

本研究也存在一定的缺陷，納入的病例數量較少，后續應納入更多樣本為腦膠質瘤的診斷提供更充分的理論依據。