人參皂苷對(duì)乙二醇誘導(dǎo)大鼠腎臟結(jié)石排石的影響分析*

曾 良

南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院急診科，湖南省衡陽市 421001

腎結(jié)石是泌尿系統(tǒng)的一種較為常見的疾病，目前，其發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高，且其治療后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)也相對(duì)較高[1]。臨床上通常采用的治療方式為碎石治療或者手術(shù)治療，可能會(huì)伴有腎臟的損害以及感染的出現(xiàn)。目前，常用的藥物，如噻嗪類利尿劑等使用之后的效果并不好，同時(shí)還會(huì)伴有相應(yīng)的副作用[2]。與此對(duì)比，傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療結(jié)石方面有一系列的優(yōu)勢(shì)。人參皂苷主要分布于五加科植物人參等植物中，具有多種生物活性[3]。人參皂苷在心腦血管系統(tǒng)反映出良好的抗衰老藥理活性，同時(shí)還有一定的逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥[4]。此外，人參皂苷具有抗結(jié)石作用,本文旨在探討人參皂苷對(duì)于以乙二醇誘發(fā)大鼠腎結(jié)石的預(yù)防效果。報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 本研究采用60只6周齡的Sprague-Dawley品系雄性大鼠，每只重量250～300g。購自南華大學(xué)校內(nèi)動(dòng)物飼養(yǎng)中心，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程與步驟均遵循南華大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)中心委員會(huì)規(guī)定。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 人參皂苷(景竹生物，貨號(hào)2342710)，0.75%乙二醇(天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號(hào)20200701)，硝酸銀(深圳市博林達(dá)有限公司，批號(hào)20200624A)，全自動(dòng)生化分析儀(biobase,魯械注準(zhǔn)20192220157)、石蠟切片機(jī)(科迪，KD-2508)、雙目顯微鏡(寶士德，型號(hào)54-03002)。

1.3 方法 將實(shí)驗(yàn)大鼠按照隨機(jī)方法分為正常控制組、陰性對(duì)照組(安慰劑組)、陽性對(duì)照組、不同劑量的實(shí)驗(yàn)組六組，每組10只，先分別稱體重、抽血液和收集尿液。將六組實(shí)驗(yàn)大鼠分別利用耳朵標(biāo)示及背部標(biāo)示編號(hào)。第1組為正常控制組給正常飲水；第2組為陰性對(duì)照組(安慰劑組)給予0.75%乙二醇水，胃灌食淀粉(安慰劑)；第3組為陽性對(duì)照組給予0.75%乙二醇水，胃灌食檸檬酸—鉀(500mg/d)；第4、5及6組為給予不同人參皂苷劑量的實(shí)驗(yàn)組，分別為300mg、600mg和1 200mg。記錄實(shí)驗(yàn)4周后終止飼養(yǎng)時(shí)大鼠體重。

1.4 指標(biāo)檢測(cè) 生理代謝籠收集并記錄24h尿液樣本，第一次在第1周實(shí)驗(yàn)開始前，第二次在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后。送交檢驗(yàn)其成分，通過全自動(dòng)生化分析儀分析其數(shù)據(jù)，檢測(cè)項(xiàng)目為尿液鈣、鎂及酸堿值。血液采集時(shí)間在第1周實(shí)驗(yàn)開始前與結(jié)束后，開始前從尾巴抽取血液樣本約2ml，結(jié)束時(shí)以乙醚麻醉方式由心臟采集，采取血液檢體約3ml，置于含有肝素之抗凝血生化試管中，送交作血清生化分析。分析檢測(cè)血BUN、Cr、P、Ca2+及Mg2+含量。取血后處死所有的實(shí)驗(yàn)大鼠，收集每只大鼠的兩側(cè)腎臟，右側(cè)腎用 10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋切片，蘇木素—伊紅染色法染色、光學(xué)光顯微鏡來檢視其組織病理變化，測(cè)量腎結(jié)晶并評(píng)估嚴(yán)重程度之分級(jí)，采用“主觀性半定量計(jì)分方式”，0分代表無結(jié)晶，1分代表很少結(jié)晶，2分代表一些結(jié)晶，3分代表很多結(jié)晶沉積。

2 結(jié)果

2.1 人參皂苷對(duì)大鼠尿量及尿生化指標(biāo)的影響 陰性對(duì)照組大鼠24h尿量高于正常控制組，實(shí)驗(yàn)組和陽性對(duì)照組高于陰性對(duì)照組和正常控制組(P<0.05)。在24h尿Ca2+方面進(jìn)行對(duì)比，陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組比正常控制組的水平高，且陰性對(duì)照組比中劑量、高劑量實(shí)驗(yàn)組的含量多(P<0.05)。見表1。

表1 人參皂苷對(duì)大鼠尿量及尿生化指標(biāo)的影響

2.2 人參皂苷對(duì)大鼠血生化指標(biāo)的影響 對(duì)比大鼠血BUN、Cr的含量，陰性對(duì)照組、低劑量實(shí)驗(yàn)組比正常控制組的含量多，陽性對(duì)照組、中劑量實(shí)驗(yàn)組、高劑量實(shí)驗(yàn)組比正常控制組低(P<0.05)，與陰性對(duì)照組對(duì)比，陽性對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組下降(P<0.05)。見表2。

表2 人參皂苷對(duì)大鼠血生化指標(biāo)的影響

2.3 人參皂苷對(duì)大鼠腎臟指標(biāo)的影響 在腎臟草酸鈣結(jié)晶評(píng)分方面進(jìn)行對(duì)比，陽性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組比正常控制組的含量多，比陰性對(duì)照組的含量少(P<0.05)。見表3。

表3 人參皂苷對(duì)大鼠腎臟指標(biāo)的影響

3 討論

腎結(jié)石的高發(fā)病率在全球范圍內(nèi)廣為流行[5]。腎結(jié)石患者的遠(yuǎn)期腎功能丟失很嚴(yán)重且高風(fēng)險(xiǎn)發(fā)展為終末期腎病，因此防治腎結(jié)石至關(guān)重要[6]。腎結(jié)晶是腎結(jié)石的早期階段表現(xiàn)形式，而草酸鈣是腎結(jié)石的主要組成成分[7]。體外沖擊波碎石、經(jīng)皮腎鏡碎石、輸尿管鏡以及腹腔鏡手術(shù)已廣泛應(yīng)用于結(jié)石的治療。然而，這些有創(chuàng)方法的成本高，而且可能導(dǎo)致嚴(yán)重并發(fā)癥[8-10]。預(yù)防結(jié)石復(fù)發(fā)，清除殘余結(jié)石，仍然是泌尿外科醫(yī)師治療泌尿系結(jié)石所面臨的兩大難題。手術(shù)療法創(chuàng)傷大，保守治療排石效果不佳，在沒有藥物干預(yù)的情況下，10年之內(nèi)結(jié)石復(fù)發(fā)率在80%以上。文獻(xiàn)報(bào)道表明，有很多傳統(tǒng)中草藥物廣泛用于泌尿系結(jié)石的治療及研究中，如芙蓉花等[11-15]。人參皂苷對(duì)草酸鈣晶體的生長具有明顯的抑制作用，除具有抗結(jié)石作用外，還具有提高血管活性能力的作用，抑制草酸鈣晶體生長[16]。

本研究結(jié)果表明陰性對(duì)照組大鼠24h尿量高于正常控制組，實(shí)驗(yàn)組和陽性對(duì)照組高于陰性對(duì)照組和正常控制組，且高劑量組的24h尿量更高，說明人參皂苷可促進(jìn)大鼠排尿量明顯增加，尤其在高劑量組，有利于結(jié)石的排出。在24h尿Ca2+方面，陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組以及低劑量實(shí)驗(yàn)組比正常控制組的含量高，中劑量、高劑量實(shí)驗(yàn)組低于陰性對(duì)照組，且隨著劑量的增加有濃度下降的趨勢(shì)，說明人參皂苷可能通過降低尿鈣濃度，減少結(jié)石的生成。同時(shí)，陰性對(duì)照組大鼠血BUN、Cr水平明顯高于正常控制組，與陰性對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組水平下降，劑量越高，BUN、Cr水平降低程度更高，說明血清中BUN、Cr水平較前改善，高劑量的改善效果更好。陽性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組腎臟草酸鈣結(jié)晶評(píng)分高于正常控制組，低于陰性對(duì)照組，說明可以減少草酸鈣結(jié)晶在腎臟的聚集，加速排出，中劑量組好于高劑量組，相關(guān)機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

總之，人參皂苷對(duì)乙二醇誘導(dǎo)大鼠腎臟結(jié)石排石有一定的意義，其具體的機(jī)理還需進(jìn)一步研究。