CDX-2、β-catenin、P53的表達與胃癌臨床病理特征及預后的關系

盧麗花 江秋菊

胃癌是消化系統常見惡性腫瘤之一，發病率及死亡率較高，據調查顯示，每年約74萬人死于胃癌，病死率位居惡性腫瘤的第2位，嚴重威脅人們的生命[1]。胃癌早期癥狀不明顯，多數患者確診時已是中晚期，導致其預后差，因此，尋找與疾病相關的分子標志物，了解胃癌的發展有助于胃癌的早期診斷，對改善患者預后具有重要意義。CDX-2是同源異型盒基因家族成員之一，是與人類關系最為密切的抑癌基因，參與胚胎發育，還能調節腸上皮細胞分化及增殖；β-catenin為Wnt/β-catenin信號通路的關鍵調節蛋白，可參與腫瘤調控，在多種惡性腫瘤中表達異常[2]。已有研究證實，CDX-2、β-catenin在直腸癌發展過程中發揮重要作用[3]。P53基因是人體抑癌基因，其失活對腫瘤形成起重要作用[4]。CDX-2、β-catenin、P53均被證實與胃癌關系密切，但其與胃癌預后的關系尚不明確[5]。因此，本研究旨在探討CDX-2、β-catenin、P53的表達與胃癌臨床病理特征及預后的關系，為探索新的胃癌預后指標提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月-2021年1月本院收治的134例胃癌患者的組織標本進行研究，設為病例組，并選取同期120例本院行健康體檢胃活檢組織標本設為對照組。參照文獻[6]《胃癌診療規范》的診斷：伴有腹痛、腹脹等癥狀；嘔吐物為宿食；經電子胃鏡檢查與活檢確診。病例組納入標準：（1）符合上述診斷標準；（2）預計生存期≥3個月；（3）腫瘤未累及臨近臟器；（4）均接受胃癌根治術。排除標準：（1）合并其他臟器功能受損；（2）合并先天免疫性疾??；（3）溝通障礙；（4）血流動力學不穩定；（5）哺乳期婦女；（6）近1個月使用糖皮質激素；（7）依從性較差；（8）合并凝血功能障礙或血液系統疾病。病例組男70例，女64例；年齡29～73歲，平均（52.61±7.47）歲；賁門43例，胃體49例，胃竇42例；有淋巴結轉移49例，未轉移85例；根據預后情況分為死亡組35例，存活組99例。對照組男69例，女51例；年齡25～70歲，平均（52.39±7.13）歲。兩組一般資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。研究已獲得醫院倫理會批準實施，入組人員均知情同意。

1.2 方法

所有組織標本經10%中性福爾馬林固定，全自動脫水機前處理，包埋切片，切片厚度3 μm，65 ℃烤片60 min。經充分烤片后的片子按照檢測試劑盒的要求，在Benchmark ULTRA全自動免疫組化儀進行相關抗原（CDX-2、β-catenin、P53）的檢測，運行結束后清洗玻片，中性樹膠封片，顯微鏡下觀察。UltraView universal DAB Detection Kit檢測試劑盒，購自羅氏公司；CDX-2（克隆號：EPR2764Y）、β-catenin（克隆號：MX043）、P53（克隆號：MX008）單克隆抗體，購自福州邁新公司。

1.3 觀察指標及評價標準

（1）比較兩組CDX-2、β-catenin、P53表達情況。（2）分析CDX-2、β-catenin、P53表達與胃癌臨床病理的關系。免疫組織化學染色結果判斷：細胞質或細胞核存在棕黃色顆粒即定義為陽性細胞。在光鏡下觀察，將每一張切片中棕黃色陽性細胞數＞10%定義為表達陽性，陽性細胞數≤10%定義表達陰性。（3）比較死亡組和存活組CDX-2、β-catenin、P53表達情況。（4）進行CDX-2、β-catenin、P53與胃癌臨床病理和預后的相關性分析。

1.4 統計學處理

本研究數據采用SPSS 24.0統計學軟件進行分析和處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較

病例組CDX-2的陽性表達率為52.24%（70/134），高于對照組的18.33%（22/120）；β-catenin的陽性表達率為62.69%（84/134），高于對照組患者的9.17%（11/120）；P53的陽性表達率為73.88%（99/134），高于對照組患者的25.83%（31/120），差異均有統計學意義（P＜0.01），見表1。

表1 兩組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較[例（%）]

2.2 CDX-2、β-catenin、P53表達與胃癌臨床病理的關系

不同性別、年齡、腫瘤最大徑、腫瘤部位、組織分化程度患者的CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；有侵犯漿膜、有淋巴結轉移、Lauren分型為小腸型患者的CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結轉移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 CDX-2、β-catenin、P53表達與胃癌臨床病理的關系

表2（續）

2.3 死亡組和存活組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較

死亡組CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率分別為91.43%、85.71%、94.29%，均高于存活組的38.38%、54.55%、66.67%，差異均有統計學意義（P＜0.05），見表 3。

表3 死亡組和存活組CDX-2、β-catenin、P53表達情況比較[例（%）]

2.4 CDX-2、β-catenin、P53與胃癌臨床病理和預后的相關性分析

相關性分析顯示，CDX-2、β-catenin、P53與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結轉移、Lauren分型及預后均呈正相關，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 CDX-2、β-catenin、P53與胃癌臨床病理和預后的相關性分析

3 討論

胃癌起源于胃黏膜上皮，位居上消化道惡性腫瘤的首位，發病率高，主要與飲食習慣、幽門螺桿菌感染、遺傳等有關。目前臨床治療胃癌的主要手段為手術、放化療等，但由于胃癌早期癥狀不明顯，多數患者確診時已是中晚期，且胃癌易向周圍組織、淋巴結等轉移，病情進展迅速，導致治療效果不理想，影響患者預后[7]。有研究顯示，侵襲和轉移被認為是胃癌致死的主要原因，而腫瘤轉移是一個多因素、多階段發展過程，涉及多種分子的改變[8]。因此，尋找能準確預測胃癌預后的生物標志物對改善患者預后具有重要意義。

CDX-2為同源異型盒基因家族的重要成員，可調節腸上皮細胞分化增殖，表達于正常腸黏膜上皮細胞，能維持腸黏膜的正常發育，在腸癌中發揮抑癌細胞的作用，有研究顯示，CDX-2在結腸癌中表達上調，且可隨細胞分化程度降低、腫瘤直徑增大而增強[9]。本研究結果顯示，病例組CDX-2的陽性表達率為52.24%（70/134），高于對照組18.33%（22/120），差異有統計學意義（P＜0.05）。有侵犯漿膜、有淋巴結轉移、Lauren分型為小腸型患者的CDX-2陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結轉移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。死亡組CDX-2陽性表達率均高于存活組，差異有統計學意義（P＜0.05）。CDX-2與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結轉移、Lauren分型及預后之間均呈正相關（P＜0.05）。結果表明，CDX-2在胃癌患者中表達較高，分析其原因可能是因為CDX-2過度表達能誘導了胃黏膜腸上皮化生的發生，從而調節腫瘤細胞增殖分化。

β-catenin是一種多功能蛋白，能維持機體正常生理平衡，在正常情況下，β-catenin蛋白存在于正常細胞的胞膜，基因突變后導致細胞核內堆積，被認為是原癌基因，可導致癌性突變。有研究顯示，β-catenin參與胃癌的發生，參與胃癌細胞周期調控，促進細胞增殖[10]。本研究結果顯示，病例組β-catenin的陽性表達率高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。有侵犯漿膜、有淋巴結轉移、Lauren分型為小腸型患者的β-catenin陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結轉移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。死亡組β-catenin陽性表達率高于存活組，差異有統計學意義（P＜0.05）。進一步相關分析β-catenin與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結轉移、Lauren分型及預后呈正相關（P＜0.05）。結果表明，β-catenin在胃癌中呈高表達，與胃癌侵襲轉移及預后有關。

P53屬于細胞調控基因，在細胞受到損傷時，P53可誘導細胞周期阻滯，使細胞在新的周期得到修復，從而抑制腫瘤的發生[11]。近年來被發現在多種癌癥腫瘤組織中呈高表達，廣泛參與細胞凋亡、分化和增殖等病理生理過程[12-13]。本研究結果顯示，胃癌患者P53的陽性表達率為73.88%（99/134），高于對照組患者的25.83%（31/120），差異有統計學意義（P＜0.05）。有侵犯漿膜、有淋巴結轉移、Lauren分型為小腸型患者的P53陽性表達率均高于無侵犯漿膜、無淋巴結轉移、Lauren分型彌漫型患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。結果表明，P53在胃黏膜癌變過程中表達上調，分析其原因可能是因為胃癌的發生可使P53蛋白基因發生突變，通過加強細胞轉化從而加快惡化，從而參與胃癌的發生與發展。本研究結果還顯示，死亡組P53陽性表達率均高于存活組，且P53與胃癌患者侵犯漿膜、淋巴結轉移、Lauren分型及預后之間均呈正相關，說明P53表達與胃癌預后有密切關系[14-15]。

綜上所述，胃癌組織中CDX-2、β-catenin、P53陽性表達率升高，可能協同參與了胃癌的發生、發展，可作為評估胃癌患者預后的參考指標，CDX-2、β-catenin、P53可成為新的胃癌治療靶點。