ER、EGFR、P53在乳腺癌中的免疫組化研究

劉 麗 白春俠 曹美榮

（營口市中心醫(yī)院，遼寧 營口 115000）

乳腺癌是一種十分常見的婦科疾病，也是女性最常見的惡性腫瘤之一，世界衛(wèi)生組織的調(diào)查結(jié)果顯示，乳腺癌發(fā)病率占全身各種惡性腫瘤的7%～10%，在婦女疾病中僅次于子宮頸癌，現(xiàn)已成為威脅婦女健康的主要疾病。乳腺癌屬于乳房腺上皮組織病變，在男性中發(fā)病十分罕見，占1%～2%[1]。乳腺癌發(fā)病常與遺傳因素有關(guān)，在40～60歲或絕經(jīng)期前后的婦女發(fā)病率較高。近年來乳腺癌的發(fā)病率在臨床上有明顯提升的趨勢，因此針對乳腺癌的臨床診斷至關(guān)重要。為深入探析乳腺癌的病癥機制，本次研究采取免疫組化法，對比分析EGFR、P53、ER蛋白過度表達與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及其相關(guān)性，從而探究其作為有效預(yù)防因子的可能性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2018年5月至2019年5月收治的156例原發(fā)性乳腺癌患者為研究對象，在患者原發(fā)乳腺癌組織中，觀察其雌激素受體（ER）、表皮生長因子受體（EGFR）、P53的表達水平；抽取原發(fā)性乳腺癌標(biāo)本156例，所有患者術(shù)前均未存在化療及放療史，病理診斷明確，其中包括未吸收細胞、實驗中脫片30例，執(zhí)行ER、EGFR有效標(biāo)本100例，良性病變20例，乳腺癌80例，執(zhí)行P53試驗的有效標(biāo)本80例，良性病變20例，乳腺癌56例。

1.2 方法 ①將本次研究選中的標(biāo)本以蒸餾水進行沖洗，在H2O2甲醇液作用下持續(xù)10 min，隨后將正常的馬血清完全封閉，添加一抗，于4 ℃的條件下持續(xù)放置20 h，隨后添加二抗與三抗，此階段需在溫室下作用，途中選擇Tris/HCl液進行洗滌，促使其于DAB中顯色，并以蘇木素復(fù)染，以乙醇梯度脫水，隨后進行封片，由相關(guān)人員進行長期觀察。②Tris/HCl液代謝一抗進行空白對照分析，根據(jù)結(jié)果觀察其ER、P53細胞核的著色情況，本次研究可見，ER、P53細胞核著色情況為陽性，EGFR結(jié)果顯示，其細胞核著色情況為陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察本次研究選中的156例標(biāo)本執(zhí)行ER、EGFR、P53的有效標(biāo)本例數(shù)，同時觀察其臨床分期中的陰性與陽性差異，統(tǒng)計ER、EGFR、P53表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS21.0處理數(shù)據(jù)，（）和率（%）分別表示計量資料和計數(shù)資料，分別應(yīng)用t和χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ER表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 執(zhí)行ER有效標(biāo)本100例，80例乳腺癌中，共有陽性66例，陽性率為82.50%。ER與臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈現(xiàn)明顯的負相關(guān)性。見表1。

2.2 EGFR表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)關(guān)系 執(zhí)行EGFR有效標(biāo)本100例，在80例乳腺癌中陽性共72例，陽性率為90.00%；將EGFR與乳腺癌患者臨床參數(shù)執(zhí)行相關(guān)性分析可見，156例標(biāo)本中，EGFR與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)性，與ER呈明顯的負相關(guān)性，P＜0.05。見表2。

3 討 論

乳腺癌是目前最常見的婦科腫瘤之一，世界衛(wèi)生組織調(diào)查的結(jié)果顯示，全球乳腺癌發(fā)病率自20世紀70年代末開始一直呈上升趨勢[2]。我國雖然并非乳腺癌高發(fā)國家，但現(xiàn)狀仍舊不宜樂觀，近年我國乳腺癌發(fā)病率的增長速度高出高發(fā)國家1～2個百分點。英國《獨立報》指出，2000—2019年，我國乳腺癌年平均增長率約3.8%，而相較于美國同期下降了0.5%[3]。且隨著國家經(jīng)濟水平的發(fā)展、人民生活壓力增大，乳腺癌的發(fā)病率正呈現(xiàn)出不斷發(fā)展、增加的趨勢。

表1 ER表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系（n，%）

表2 EGFR表達與乳腺癌臨床病理參數(shù)關(guān)系（n，%）

早期階段乳頭可見于溢液現(xiàn)象，甚至乳房外觀還可能會出現(xiàn)變形；因此臨床上多提倡患者避免應(yīng)用激素類藥物，維持樂觀的心態(tài)，合理均衡飲食，從而最大程度的避免病情影響[4]。隨著病情進展，在中晚期階段，乳腺癌患者的病灶組織將合并有嚴重的紅腫反應(yīng)，生長較快，體積較大的腫瘤，可出現(xiàn)皮膚表淺靜脈怒張，腫瘤局部皮溫升高。如腫瘤接近皮膚表面時皮膚可發(fā)紅。如癌細胞阻塞了皮下淋巴管，即可出現(xiàn)皮膚水腫，出現(xiàn)橘皮樣變[5-6]。同時，腫瘤發(fā)展到晚期，腫塊長大，可使皮膚隆起，如血供不足，隨著皮膚發(fā)紅，變薄，可發(fā)生破潰。由于創(chuàng)面有大量的壞死組織及血性分泌物滲出，患者常因此出現(xiàn)消瘦、貧血征象。另外，有相對較低的概率導(dǎo)致皮膚結(jié)節(jié)、鎧甲癌等表現(xiàn)[7]。最終造成乳腺輪廓改變，導(dǎo)致乳頭乳暈改變及乳頭濕疹樣改變，發(fā)展至晚期時，將促使其區(qū)域淋巴結(jié)腫大，造成遠處轉(zhuǎn)移表現(xiàn)，經(jīng)血液或淋巴途徑發(fā)生遠方轉(zhuǎn)移，好發(fā)部位以肺、胸膜、骨、肝、腦及軟組織較多見[8]。

值得注意的是，乳腺癌的確切病因尚未完全明確，一般認為與遺傳、月經(jīng)、婚育等多種內(nèi)在和外界的因素共同作用有關(guān)，通常將其歸納為月經(jīng)初潮時間、遺傳因素、婚育、電離輻射、不健康飲食習(xí)慣等類型[9]。隨著臨床研究的不斷進展，自Jensen發(fā)現(xiàn)乳腺癌中的ER成分以來，隨著乳腺癌研究地不斷深入，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，存在EGFR表達的乳腺癌患者，相較于不存在EGFR表達的乳腺癌患者具有更強的浸潤性，且EGFR陽性的檢出率相對較高，因此，EGFR陽性或陽性程度與累及淋巴結(jié)的數(shù)目具有極高的關(guān)聯(lián)性。本次研究結(jié)側(cè)面佐證了這一理論。同時，EGFR與淋巴結(jié)的關(guān)聯(lián)性并非局限于腫瘤組織中，但僅在ER陽性的腫瘤中，二者方能存在清晰的關(guān)聯(lián)性，因此，EGFR在分化不良的腫瘤中同樣具有頻繁的表達效果，自然其強度也較為明顯，可證實其與臨床分期之間的關(guān)聯(lián)[10]。

P53是一種十分常見的癌癥因子抑制基因，其具有十分靈活的基因缺失與基因重組功能，多見于基因突變，而此類基因與乳腺癌的病變存在密切關(guān)聯(lián)。值得關(guān)注的是，近年來臨床研究表明，P53對穩(wěn)定蛋白質(zhì)的影響較為密切，能夠參與抑制細胞增殖的過程中，因此，P53免疫反應(yīng)多表現(xiàn)為核染色，其中的部分胞質(zhì)著色較為常見，因此在細胞角蛋白的交叉反應(yīng)影響下，可判定乳腺癌的中野生型P53隱藏在其胞質(zhì)組織中，是影響其無法正常運行的關(guān)鍵因素。本次研究結(jié)果可見，P53與雌激素受體存在明顯的負相關(guān)性，與上述研究結(jié)果基本一致。

綜上所述，在乳腺癌中，患者臨床分期的高低與其腋淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移均是導(dǎo)致患者預(yù)后不良的重要指標(biāo)，ER陰性可提示其預(yù)后不良現(xiàn)象，EGFR、P53蛋白表達與臨床分期、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，與ER呈負相關(guān)，因此，在臨床診斷過程中，應(yīng)用EGFR與P53均可有效判定患者預(yù)后情況，提升治療針對性。