國產某品牌血栓彈力圖儀及試劑與進口某品牌相應產品的比對研究

李 蕾，馬 靜，楊 旭，王曉琳，王培昌

首都醫(yī)科大學宣武醫(yī)院檢驗科，北京 100053

血栓彈力圖(TEG)目前是血栓與止血檢驗中應用較為廣泛成熟的檢測方法，能為臨床提供有價值的凝血功能監(jiān)測及治療數據[1-2]，指導臨床及時調整治療方案，減少異常出血或者血栓形成等并發(fā)癥的發(fā)生。因此，TEG檢測結果的準確性和可靠性尤為重要，本科室使用的進口某品牌TEG5000型TEG儀及配套試劑，具有良好的分析性能[3-4]。北京市于2019年6月15日在全市范圍內啟動醫(yī)耗聯(lián)動綜合改革，可概述為“五個一”(一降低、一提升、一取消、一采購、一改善)，其中“一降低”為重點降低部分大型儀器設備檢驗項目價格，因此本科室急需高質量國產產品替代原有進口設備，以降低檢驗成本，保證該項目的正常開展。本研究通過對國產某品牌TEG儀與進口某品牌TEG5000型TEG儀進行高嶺土檢測交叉比對，以明確使用進口某品牌儀器、試劑，國產某品牌儀器、試劑，以及進口某品牌儀器、國產某品牌試劑的檢測結果是否具有相關性和一致性，以降低實驗室檢測成本并在臨床推廣應用。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2019年5-6月于本院診治的門診和住院患者30例納入研究，其中男16例、女14例，年齡46～84歲、平均(58.59±9.03)歲。其中，9例為消化道出血患者，診斷標準[5-6]：(1)有明顯消化道出血癥狀如嘔血、黑便、血便等，伴或不伴頭昏、面色蒼白、血壓下降等外周循環(huán)障礙；(2)大便潛血或胃液潛血試驗陽性；排除腫瘤和遺傳性出血等疾病。15例患者為缺血性腦血管病患者，診斷標準：(1)符合1995年中華醫(yī)學會第四屆全國腦血管病學術會議制訂的各類腦血管疾病診斷要點；(2)患者均經顱腦MRI或CT確診；排除標準：(1)接受早期再灌注治療；(2)頭部MRI或CT證實有腦出血。其余6例為冠心病、顱內動脈狹窄等疾病患者。

1.2儀器與試劑 國產某品牌DRNX-1型TEG儀，進口某品牌TEG5000型TEG儀。國產某品牌活化凝血檢測試劑盒(批號：20190125)，試劑盒和耗材來自國產某品牌；進口某品牌活化凝血檢測試劑盒(批號：HM04104)，配套試劑盒和耗材；0.2 mol/L氯化鈣均為國產試劑盒配套試劑。

1.3方法

1.3.1試驗分組 TEG組：采用TEG5000型TEG儀及配套試劑盒進行檢測；DR組：采用DRNX-1型TEG儀及配套試劑盒進行檢測；TD組：采用TEG5000型TEG儀及國產某品牌試劑盒進行檢測。

1.3.2檢測步驟 在37 ℃條件下嚴格按照TEG檢測操作規(guī)程進行試驗，由同一人操作。取枸櫞酸鈉抗凝全血標本各1 mL分別注入TEG5000型TEG儀和DRNX-1型TEG儀，高嶺土激活，在測定杯中注入20 μL氯化鈣(于同一時間加入標本、開始操作)，對每份標本進行平行交叉檢測，并記錄各組凝血反應時間(R)、凝血形成時間(K)、凝固角(Angle)、最大振幅(MA)4個參數的檢測結果。每天所有儀器各檢測通道都進行比對且比對合格，在分析之前均用儀器原裝配套的兩個水平質控品進行室內質控檢測，質控合格后再進行標本檢測。

1.3.3生物參考區(qū)間的驗證 參考美國臨床和實驗室標準協(xié)會(CLSI) C28-A2文件[7]，選取本院20例健康志愿者，男女各半，排除血栓性疾病、低血小板、血液病、血友病等出血性疾病及有口服抗凝藥物史者，觀察TEG5000型TEG儀采用國產某品牌試劑檢測結果落在本科室引用參考區(qū)間范圍內的個數。判斷標準：符合率≥90%(符合率=結果落在參考范圍內的標本例數/實驗總標本例數×100%)。

2 結 果

2.13組檢測結果的比較 3組間R、K、Angle、MA 4個參數比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 3組間TEG4個參數的比較

2.23組檢測結果的回歸方程和相關性分析 以TEG組為參考方法X，DR組和TD組分別為試驗方法Y1和Y2，3組R、K、Angle、MA值4個參數的相關系數r>0.9(P<0.001)，表明3組檢測結果之間呈高度線性相關，見表2。

表2 3組TEG檢測結果相關性分析

2.33組檢測結果的一致性評價

2.3.13組間R的一致性評價 以兩組R的均值為X軸，TEG組與DR組的差值為Y軸，繪制Bland-Altman散點圖。TEG組與DR組的平均差值為0.35 min，95%的一致性界限范圍為-0.42～1.12 min，其中6.67%(2/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值1.1 min，均值為6.65 min，相差幅度在臨床上不可接受。TEG組與TD組差值的平均差值為0.37 min，95%的一致性界限范圍為-0.42～1.16 min，其中3.33%(1/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值為0.9 min，均值為4.45 min，相差幅度在臨床上可以接受。見圖1。

圖1 3組R的Bland-Altman圖

2.3.23組間K的一致性評價 以兩組K的均值為X軸，TEG組與DR組的差值為Y軸，繪制Bland-Altman散點圖。結果顯示TEG組與DR組的平均差值為-0.10 min，95%的一致性界限范圍為-0.32～0.12 min，所有的點均在一致性界限內，且在一致性界限范圍內，最大差值絕對值0.3 min，均值為1.75 min。TEG組與TD組的平均差值為-0.07 min，95%的一致性界限范圍為-0.40～0.26 min，其中3.33%(1/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值為0.3 min，均值為1.15 min。以上相差幅度在臨床均可以接受。見圖2。

圖2 3組K的Bland-Altman圖

2.3.33組間Angle的一致性評價 以兩組Angle的均值為X軸，TEG組與DR組的差值為Y軸，繪制Bland-Altman散點圖。結果顯示TEG組與DR組差值的平均差值為0.9°，95%的一致性界限范圍為-4.0°～5.8°，其中3.33%(1/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值為5°，均值為70.3°。TEG組與TD組的平均差值為0.9°，95%的一致性界限范圍為-3.8°～5.6°，其中3.33%(1/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值為4°，均值為62.3°。以上相差幅度在臨床均可以接受。見圖3。

圖3 3組Angle的Bland-Altman圖

2.3.43組間MA的一致性評價 以兩組MA值的均值為X軸，兩組的差值為Y軸，繪制Bland-Altman散點圖。TEG組與DR組的平均差值為-1.9 mm，95%的一致性界限范圍為-6.9～3.1 mm，其中3.33%(1/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值為5.5 mm，均值為55.65 mm。TEG組與TD組的平均差值為0.8 mm，95%的一致性界限范圍為-6.0～4.5 mm，其中3.33%(1/30)的點在一致性界限外。在一致性界限范圍內，最大差值絕對值為5.5 mm，均值為56.65 mm。以上相差幅度在臨床均可以接受。見圖4。

圖4 三組MA的Bland-Altman圖

2.4生物參考區(qū)間驗證 TEG5000型TEG儀采用某品牌國產試劑對20例健康志愿者標本進行檢測的結果與生物參考區(qū)間的符合率≥90%，符合本科室引用的參考區(qū)間。見表3。

表3 TEG5000采用國產試劑生物參考區(qū)間驗證(n=20)

3 討 論

TEG是應用TEG儀動態(tài)檢測患者凝血、血小板聚集、纖維蛋白溶解過程中凝血塊的黏彈性變化并繪制的一條血栓彈力隨時間變化的曲線，可連續(xù)、全方位監(jiān)測患者凝血情況[8-9]。R為血液注入容器到開始發(fā)生凝固的時間，相當于凝血活酶生成時間，是初期纖維蛋白形成所必需的時間。K反映血凝塊形成時間，即從R終點至描記圖幅度達20 mm所需的時間，代表纖維蛋白形成和交聯(lián)導致血栓形成后獲得固定的彈性黏度所需時間。Angle代表纖維蛋白及交聯(lián)網狀結構形成的速度,是特異性最高的參數之一。Angle越大則纖維蛋白形成越快。MA相當于血栓的最大堅固度，與血小板的質量和水平及纖維蛋白原水平有關[10]。

本院檢驗科為了順利推進醫(yī)耗聯(lián)動綜合改革，在儀器試劑以及耗材的成本控制上做出了一系列的改動，包括優(yōu)化檢驗項目組合，進口試劑更換為高質量國產試劑，安排人員對儀器、試劑、耗材進行科學合理管控等。本研究根據美國NCCLS EP9-A標準[11]和體外診斷試劑分析性能評估指導原則，對國產某品牌TEG儀與美國TEG5000型TEG儀進行高嶺土檢測交叉比對，并采用多種方法聯(lián)合評價檢測結果的一致性，以用于臨床診療。

通過對3組TEG檢測結果R、K、Angle、MA 4個參數進行方差分析，結果表明3組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。但不同組別4個參數的均值并不完全一致，這是由于凝血檢測受時間以及激活劑的影響很大，特別是顯示凝血功能的R受操作影響很大。不同廠家最終檢測結果無法做到了普通生化檢測的完全一致。TEG檢測主要考察TEG結果對于患者基礎凝血狀況的判斷是否一致。并且在實際應用中，不同的廠家參考范圍可能存在種族及區(qū)域人群分布的差異，為保證實驗結果的可信度，應建立本地區(qū)健康人群的TEG參考區(qū)間[12]。

Pearson相關分析結果表明，3組間R、K、Angle、MA四個參數的相關系數r>0.9(P<0.001)，說明國產某品牌配套儀器試劑與TEG5000型檢測儀配套儀器試劑均有高度相關性，提示重慶潤潤儀器試劑可以代替TEG5000型檢測儀進行TEG檢測；同時TEG5000型檢測儀采用國產試劑盒與進口試劑的檢測結果亦具有高度相關性，提示國產試劑盒在性能驗證良好的情況下，可在進口儀器上進行檢測。與以往的研究報道結論相似[13-14]。因此對于檢驗科來說，無論是購置國產儀器試劑，還是在原有進口儀器上使用國產試劑盒，均可替換高成本的進口設備，降低TEG的測試成本，并保證臨床數據的可靠性。

本研究采用Bland-Altman散點圖對3組數據進行一致性分析，結果表明TD組TEG的R、K、Angle、MA值4個參數均有96.77%的點在一致性界限以內，且二者的相差幅度在臨床上可接受，因此可認為TEG5000型TEG儀采用配套進口試劑盒和國產試劑盒均具有較好一致性，二者在臨床應用可互相替代。而DR組的R有93.33%的點在一致性范圍內，且最大相差幅度在臨床上不可接受。由于不同廠家的儀器試劑或不同區(qū)域人群，參考范圍存在差異[15-17]，因此仍可通過建立本實驗室儀器的參考范圍，替代進口儀器用于臨床檢測。本研究對TEG5000型檢測儀采用國產試劑進行生物參考區(qū)間的驗證，20例健康志愿者標本檢測結果與生物參考區(qū)間的符合率≥90%，符合本室引用的參考區(qū)間，可以順利投入臨床使用。

綜上所述，進口某品牌TEG儀、試劑和國產某品牌TEG儀、試劑檢測結果具有良好的一致性，能夠為臨床提供準確可靠的數據。但對于各個參數的參考范圍應根據不同廠家以及不同地區(qū)的人口特征進行適當調整和驗證，以建立本地區(qū)實驗室自己的參考范圍。本研究由于納入的血栓和出血疾病的患者例數少，在統(tǒng)計學上有一定的局限和欠缺，而且TEG的參數較多，未對其他參數進行分析比對，因此需加強后續(xù)研究。