玉米芯栽培海鮮菇配方及后熟期比較試驗

韓菊學

（河西學院人事處，甘肅張掖734000）

海鮮菇（Hypsizigus marmoreus）又名真姬菇、玉蕈、斑玉蕈，是我國食用菌工廠化生產的重要品種和最具發展潛力的食用菌新品種之一[1]。海鮮菇栽培原料營養成分、合理配比、后熟期是影響海鮮菇高產優質的重要因素。

近年來，海鮮菇原料棉籽殼價格上漲，因此篩選以玉米芯為主料培養料配方顯得尤為重要。為此筆者首先對引進的兩個海鮮菇菌株進行品種鑒定，并進一步進行適宜培養料配方篩選及最適后熟期試驗，以期為當地工廠化栽培海鮮菇提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試菌株由甘肅省應用真菌工程實驗室提供，引自張掖貫黨珍稀菇業有限公司，分別命名為海鮮菇1 號、海鮮菇2 號。原種、栽培種培養基：雜木屑78%，麩皮20%，白糖1%，碳酸鈣1%。

1.2 供試配方

共設4 個培養料配方。配方1：玉米芯78%；配方2：玉米芯48%，棉籽殼10%，木屑20%；配方3：玉米芯38%，棉籽殼20%，木屑20%；配方4：玉米芯28%，棉籽殼30%，木屑20%；對照配方（CK）：棉籽殼38%，木屑40%。以上配方均添加麩皮15%，玉米面5%，石灰1%，石膏1%，料含水量65%。

1.3 試驗方法

1.3.1 分子鑒定

將保存于4 ℃的海鮮菇母種在無菌條件下接在PDA培養基平板上，22 ℃避光培養直至長滿平板，無菌操作刮取生長旺盛的菌絲，用真菌試劑盒提取菌株的基因組DNA；之后進行PCR擴增及檢測[2]。

1.3.2 培養料配方篩選

選擇新鮮干燥、無霉變的培養料，木屑須淋水堆制發酵2個月。按照配方配料，準確稱取各材料，加水攪拌均勻，pH 8.0。選用折徑17 cm×33 cm的低壓聚乙烯塑料袋，每袋裝料折干350 g左右。采用高壓滅菌，在0.15 MPa 保持2.5 h。滅菌結束溫度降至室溫時轉移到接種室接種，每一配方接種30袋，3次重復。接種后的料袋移至培養室，溫度22～25 ℃，空氣相對濕度為50%～65%，二氧化碳780～880 mg/m3，避光培養。養菌結束后繼續培養15 d 后移至出菇室，保持室內空氣相對濕度85%～95%，溫度14～16 ℃ ，二 氧 化 碳 3 900～5 900 mg/m3，光 照 500～2 000 lx。采收時，觀察記錄子實體形態特征，測量計算平均菌柄長、平均菌柄直徑、分支數（所有子實體個數/料袋數），并計算袋鮮菇產量和袋干菇產量，篩選出最適配方。

1.3.3 海鮮菇最佳后熟時間

以1.3.2 獲得的最優配方為后熟期比較試驗培養料配方。按1.3.2中的方法裝袋、滅菌、接種、培養菌絲。待菌絲營養生長結束后，分別進行0、10、20、30、40、50、60 d 的后熟培養，每個處理重復 30 袋。觀察菌絲色澤、長勢和菌袋質地，并測定培養料的含水量和菌袋質量。菌袋質量：隨機選取20 個菌袋，測其質量，取其平均值。培養料含水量：隨機選取3個菌袋，每個菌袋單獨混勻，稱取5 g培養料，用AND MF-50水分測定儀，測其含水量，3個菌袋分別測3次重復，取平均值。

后熟期培養結束后轉移至出菇房，參照1.3.2進行出菇管理。并記錄現蕾時間，采收統計產量。

2 結果與分析

2.1 分子鑒定

2.1.1 DNA提取

對引進的兩個菌株DNA 進行1%的瓊脂糖凝膠電泳后，UVP 凝膠成像下可觀察到兩個菌株的DNA條帶明亮完整，無拖尾現象。所獲得的產物片段在750 bp 左右，符合基于PCR 反映的后續分子生物學方面的試驗研究。

2.1.2 ITS-PCR擴增分析

將供試菌株的序列測定結果提交至GenBank（基因數據庫），在NCBI（美國國家生物技術信息中心）網站上進行BLAST（生物大分子序列比對搜索工具）比對，結果表明，供試菌株為海鮮菇，且為兩個不同品種。

2.2 供試配方對海鮮菇商品性狀及產量的影響

表1 供試配方對海鮮菇1號商品性狀及產量的影響

供試配方對海鮮菇菌柄、菌蓋影響不大。海鮮菇1號菌柄長4.86～6.56 cm，菌蓋直徑1.25～1.76 cm；海鮮菇2 號菌柄長4.93～6.49 cm，菌蓋直徑1.17～1.74 cm。供試配方對海鮮菇分支數和產量的影響較大：海鮮菇 1 號，配方 4 分支數最多，為 59 個/袋，比分支數最少的配方1 多32 個/袋；海鮮菇2 號，配方4分支數最多，為65個/袋，比分支數最少的配方1多32 個/袋。海鮮菇1 號，配方4 鮮菇袋產量最高為369.61 g，比產量最低的 CK 多 95.54 g；海鮮菇 2 號，配方4 鮮菇袋產量最高為331.68 g，比產量最低的CK多54.70 g，達到顯著差異水平。

表2 供試配方對海鮮菇2號商品性狀及產量的影響

綜合考慮，配方4（玉米芯28%，棉籽殼30%，木屑20%，麩皮15%，玉米面5%，石灰1%，石膏1%）為試驗最佳配方。

2.3 后熟時間對海鮮菇生長發育的影響

2.3.1 后熟時間對海鮮菇菌絲生長發育的影響

由表3 可知，未經過后熟培養的菌絲，長勢弱，色澤灰白，菌袋質地不緊實；后熟培養10～20 d，海鮮菇1 號、2 號的菌絲長勢、色澤和菌袋質地均隨著后熟培養天數的增加而有所改觀。后熟培養20～40 d的菌絲長勢最好，兩菌株菌絲顏色潔白且菌袋質地緊實；后熟培養超過40 d 菌絲長勢明顯變弱，菌絲顏色較潔白，菌袋質地緊實度有所下降。這可能是因為后熟培養0～20 d，海鮮菇菌絲正處于營養生長轉向生殖生長的過渡期，菌絲繼續分解培養料，使菌絲的活力進一步增強；超過40 d 后，菌絲已完成后熟而趨于老化，加之培養時間過長易失水，從而使菌絲活力下降。綜合考慮后熟時間為40 d 左右為宜，菌絲長勢旺盛、顏色潔白、菌袋質地緊實。

表3 后熟時間對海鮮菇菌絲生長發育的影響

2.3.2 后熟時間對海鮮菇菌袋質量和含水量的影響

由表4可知，隨著后熟時間的增加，菌袋質量逐漸降低，而含水量逐漸上升。后熟培養40 d 與30 d菌袋質量相比，海鮮菇1 號失重為9.92 g，海鮮菇2號失重為8.89 g；菌袋含水量的變化，后熟時間為30 d 與40 d 的含水量變化最大，后熟40 d 比后熟30 d 菌袋含水量海鮮菇1 號上升了3.96%，海鮮菇2號上升了2.14%。菌絲代謝活動旺盛，消耗培養料的養分，同時產生一定量的水分、二氧化碳和其他代謝產物，致使菌袋質量減少而含水量上升。由此可見，30～40 d的后熟時間段內菌絲生長還處于旺盛時期，會繼續分解培養料積累養分，為出菇后子實體的生長提供營養物質。這與菌絲色澤、長勢與菌袋質地的表現相一致。

圖2 海鮮菇1號在供試配方中生長情況

圖3 海鮮菇2號在供試配方中生長情況

表4 不同后熟時間對海鮮菇菌袋質量和含水量的影響

2.3.3 后熟時間對海鮮菇現蕾時間及產量的影響

表5 后熟時間對海鮮菇現蕾時間及產量的影響

由表5 可知，后熟培養能明顯提高海鮮菇的袋產量，隨著后熟天數的增加，鮮菇產量先增加后減少。海鮮菇1 號，后熟30 d、40 d 的產量高，分別為236.47 g、278.94 g，海鮮菇 2 號，后熟 30 d、40 d 的產量高，分別為239.52 g、281.42 g。未后熟培養（0 d）的菇蕾現蕾最晚，平均為17 d，且產量最低，海鮮菇1 號產量僅為 196.42 g，比后熟 40 d 少 82.52 g；海鮮菇 2 號含量僅為 199.65 g，比后熟 40 d 的少 81.77 g，達到差異顯著水平；后熟培養50 d、60 d，雖然現蕾早，但產量無優勢。工廠化栽培海鮮菇一般需要大型控溫、控濕設備，故過長的后熟時間會增加生產成本。綜合考慮，最適后熟時間以40 d左右為宜。

3 小結

甘肅張掖的玉米芯資源豐富，取材方便，因此在棉籽殼價格不斷上漲的當下，用玉米芯栽培海鮮菇不僅降低生產成本，還實現了玉米芯資源化利用。試驗篩選出最佳玉米芯栽培海鮮菇培養料配方（玉米芯28%，棉籽殼30%，木屑20%，麩皮15%，玉米面5%，石灰1%，石膏1%）和最適后熟時間（40 d），對玉米芯工廠化栽培海鮮菇具有現實指導意義。