湖北省輸液輸血器具中DEHP溶出檢測與分析

湖北省醫療器械質量監督檢驗研究院 （湖北 武漢 430075）

內容提要：目的：了解湖北省使用的輸液輸血器具中DEHP的溶出情況，為醫療器械安全風險監測工作提供數據積累。方法：參考標準YY/T 0927-2014的檢驗方法，采用氣相色譜-質譜聯用法測定30個批次輸液輸血器中DEHP溶出量。結果：通過對30批輸注器具進行檢測，聲稱不含有DEHP的一批產品的結果很低，其他29批產品的DEHP溶出量在2.17～9.45mg。其中輸血器DEHP溶出量為2.17～6.79mg，輸液器DEHP溶出量為2.68～9.45mg。結論：不同生產企業由于材料和工藝不同，DEHP的溶出量存在較大差異，對于成年人而言均在安全范圍內，但是對于嬰幼兒和兒童等特殊人群的使用存在較大的安全風險。

DEHP是Di-（2-ethylhexyl）phathalate的縮寫，全名為鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯，其具有廣泛的毒性，包括生殖發育毒性、肝臟毒性、免疫毒性等[1]。目前所使用的輸液器和輸血器多采用聚氯乙烯材料，由于聚氯乙烯（PVC）材料本身質地較硬加工難度大，為了使PVC制品柔軟往往加入大量的增塑劑，DEHP由于具有優異的增塑性，易獲得性以及和PVC良好的相容性，使其成為輸注輸血器具中最為常見的增塑劑[2]。

在目前的生產工藝中，大部分輸注產品通過DEHP先與PVC樹脂和其他添加劑通過共混等方式制備含有DEHP的PVC粒料加工制造，在此共混的過程中，DEHP不以共價鍵結合而是物理結合于PVC分子上，故其可能溶出并進入血液中[1]。現行一次性使用輸液器標準GB 8368-2018[3]和一次性使用輸血器標準GB8369-2005[4]中，并未制定DEHP溶出量的檢測方法和安全限值，DEHP的測定也未在產品技術要求中作出規定，其檢測方法和結果均在企業研究資料中體現，不同企業的研究方法也不一樣，無法統一判斷標準，本文通過模擬臨床輸液過程，考察其在靜脈輸液輸血過程中可能析出量，評價PVC輸液輸血器具的安全性。采用GC-MS方法使用相同浸提條件對不同企業的產品進行測試，對湖北省內的30批輸液輸血器具產品的DEHP溶出量進行測定，評判其安全性。其中一次性使用輸液器19批，輸血器11批，包含一批聲稱不含DEHP的輸液器。

1.儀器與材料

1.1 儀器及參數

氣相色譜質譜聯用儀（賽默飛世爾TSQ Quantum XLS配有四級桿分析儀的氣質聯用儀）；電子天平（梅特勒，XP205）；真空干燥箱。

1.2 試劑

DEHP對照品（艾科試劑，批號：201302251，純度為99.0%），色譜乙醇（麥克林，C10629411，HPLC級），正己烷（TEDIA公司，14090291，HPLC級），實驗用水為超純水（Millipore純水系統制備）。

1.3 樣品

樣品來源為2019年湖北省醫療器械監督抽檢樣品，用數字1～30表示，其中一次性使用輸液器19個批次，一次性使用輸血器11個批次。

1.4 溶液的配制

1.4.1 浸提液的制備

質量密度為0.9373～0.9378g/mL的乙醇水溶液：用量筒量取一定量的色譜乙醇，加入超純水，混勻后備用。

1.4.2 DEHP標準溶液的制備

精密稱取DEHP對照品26.74mg，置50mL容量瓶中，用正己烷定容，得到質量濃度為529.452μg/mL的標準儲備溶液。分別取一定量的儲備溶液配制成濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、100.0μg/mL濃度的系列對照品溶液。

1.4.3 樣品溶液的制備

將250mL乙醇水混合溶液組成灌裝，以25滴/min的速度通過樣品，大致通過時間為4h，用玻璃器皿收集浸提液。取1mL浸提液于玻璃試管中，放入真空干燥箱，在50°C下真空干燥，干燥后，冷卻至室溫，加入等體積的正己烷，渦旋溶解得到供試品溶液。

2.測試方法

2.1 色譜條件

色譜柱：TR-5MS石英毛細管柱（30m×0.25mm×0.25μm，賽默飛世爾）。

掃描方式：溶劑切除時間4min，全掃描模式45～450amu（定性）和選擇離子模式m/z=149（定量）。

分流模式：分流比20:1；流速1.5mL/min；進樣量1μL。

色譜條件：起始溫度150°C，保持0.5min，然后以20°C/min升至280°C，保持7min。

2.2 方法學考察

專屬性試驗：分別取標準溶液、正己烷溶劑進入GC-MS進行測定，記錄質譜圖。結果見圖1。溶劑峰在DEHP對照品溶液相同保留時間無干擾，專屬性良好。

圖1. DEHP的GC-MS譜圖（注：A.對照品溶液譜圖；B.供試品溶液譜圖；C.空白溶劑譜圖。）

線性及范圍：取標準溶液進行測定，記錄色譜圖，以DEHP質量濃度為橫坐標，離子強度為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程為Y=101378+907412X，R=1.0000（n=6）。結果表明，DEHP質量濃度在0.5～100μg/mL范圍內與離子強度線性關系良好。

精密度試驗：取對照品溶液連續進樣6次測定，記錄離子信號強度。RSD為3.25%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.3 樣品測定

對每支輸液輸血器進行稱量后按照1.4.3制備樣品溶液，取30批樣品溶液，分別進行測定，每批樣品平行測定3次，計算DEHP含量。結果見下表1和表2。

表1. 19批輸液器中DEHP的檢測結果(mg)

表2. 11批輸血器中DEHP的檢測結果(mg)

3.結果與討論

輸血器屬于接觸血液或血液成分的醫療器械，原則上應使用人體血液或血液成分作為浸提液。一次性使用輸液器一般采用臨床實際輸注液體作為浸提溶劑，如氯化鈉注射液和葡萄糖注射液等。因DEHP在水中的溶解度較低，而在有機溶劑中的溶解度較大，因此如果使用條件下存在有機溶劑能增加其溶出。為了能綜合評估兩種產品的DEHP溶出性，選擇了質量密度為0.9373～0.9378g/mL的乙醇水混合溶液作為替代浸提溶劑測定輸液器和輸血器中DEHP的釋放量[5]。其浸提能力嚴于臨床接觸的介質，所以本研究結果僅供參考使用。通過對30批輸注器具進行檢測，聲稱不含有DEHP的一批產品的結果較低，其他29批產品的DEHP溶出量在2.17～9.45mg。其中輸血器DEHP溶出量為2.17～6.79mg，輸液器DEHP溶出量為2.68～9.45mg。有3個批次產品的DEHP溶出量超過了9mg。

根據FDA對PVC醫療器械DEHP的安全性評價，DEHP血液接觸途徑的TI值為0.6mg/(kg·d)[6]。根據GB/T 16886.17[7]，取成年人的體重為70kg，則每個成年人的可耐受暴露量為42mg/d，幾乎所有被檢樣品的溶出量均小于可耐受暴露量，由于普通輸液器和輸血器均可用于嬰兒和兒童，材料排出的物質會在體內有較大的蓄積，所以在計算預期用于嬰兒和兒童的醫療器械的各TI時，嬰兒和兒童接觸的數據才更有可參考性。取嬰兒體重為3.5kg，兒童體重為10kg，計算嬰兒的可耐受暴露量為2.1mg/d，兒童的可耐受暴露量為6mg/d[6]。按照本研究的檢測結果判斷，除聲稱不含DEHP的輸液器和一批輸血器外，絕大多數的產品用于嬰兒存在較大風險，大部分產品用于兒童存在一定的風險。本實驗浸提液只有250mL，如果臨床上輸注多瓶溶液時，溶出量還有可能上升，風險較大。

目前我國的PVC醫療器械大部分采用DEHP作為增塑劑，相對應的法規也并未禁止使用或者給出一定的安全限值。已有的DEHP毒理學數據都來源于動物實驗，對于適用于人體的毒理學數據并未建立，只有制定科學可信的限度值才能從根本上控制用DEHP作為增塑劑的醫療器械的質量。所以建議在法規層面，一方面對醫療器械的產品中的DEHP含量進行限值控制，另一方面推動企業對于終產品中DEHP的釋放量進行測定并評估其安全性，鼓勵企業開發新型的耐遷移的增塑劑來替代DEHP，推動產業升級，以徹底解決DEHP溶出帶來的問題。期待通過更多的研究來制定出限度，解決DEHP溶出帶來的安全性問題。