Sysmex XN-2000血細胞分析儀的性能驗證

山東大學生殖醫學研究中心，國家輔助生殖與優生工程技術研究中心，生殖內分泌教育部重點實驗室 （山東 濟南 250001）

內容提要：目的：對本實驗室Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀進行性能評價，保證儀器檢驗結果的準確可靠。方法：按照中華人民共和國衛生行業標準WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規項目的分析質量要求》及相關文件的要求，對該儀器的本底計數、攜帶污染率、批內精密度、日間精密度、線性范圍、正確度、不同吸樣模式可比性、實驗室內結果的可比性、準確度、儀器間五分類比對和人機五分類比對進行驗證，判斷是否符合衛生行業標準的要求。結果：該儀器的本底計數良好，攜帶污染率、批內精密度、日間精密度、正確度、準確度等均在要求范圍內，不同吸樣模式比對和實驗室內結果比對的偏差均符合要求，儀器間白細胞五分類比對和人機五分類的結果也均合格。結論：本實驗室Sysmex XN-2000血細胞分析儀各項指標性能良好，符合質量目標要求。

臨床實驗室的全面質量管理越來越受到各方面的關注與重視，對于醫療儀器設備的性能要求也越來越嚴格，醫療儀器設備的質量和性能直接關系著患者檢驗報告的可靠和準確性，檢驗報告的可靠和準確性也將直接影響到醫生正確的臨床診斷及治療方案，所以定期進行校準和驗證檢驗儀器設備的性能指標是非常必須和必要的[1]。本實驗研究主要參照中華人民共和國衛生行業標準WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規項目的分析質量要求》[2]，參考NCCLS EP6-P2[3]、EP9-A2[4]、EP15-A2[5]文件要求，通過Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀對白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血小板（PLT）、紅細胞壓積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、中性粒細胞百分比（NEUT%）、淋巴細胞百分比（LYMPH%）、單核細胞百分比（MONO%）、嗜酸性粒細胞百分比（EO%）、嗜堿性粒細胞百分比（BASO%）等檢測項目的檢測數據，對Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀的性能參數進行驗證，從而保證檢測報告準確可靠。

1.材料與方法

1.1 一般資料

標本來源：血液標本均為本院門診患者及住院患者的新鮮樣本。

儀器與試劑：儀器為Sysmex XN-2000全自動血液分析儀，標準品、質控品和試劑均為希森美康公司配套產品，且均在有效期內。

1.2 方法

1.2.1 本底計數

把稀釋液當成樣本測定，連續測3次，3次結果的最大值應符合要求。要求：WBC≤0.5×109/L，RBC≤0.05×1012/L，HGB≤2g/L，PLT≤10×109/L。

1.2.2 攜帶污染率

高濃度樣本連測3次，測定值為H1、H2、H3；低濃度樣本連測3次，測定值為L1、L2、L3。根據公式|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%計算攜帶污染率。高濃度樣本應滿足要求（WBC＞90×109/L，RBC＞6.2×1012/L，HGB＞220g/L，PLT＞900×109/L），低濃度樣本應滿足要求（WBC＜3×109/L，RBC＜1.5×1012/L，HGB＜50g/L，PLT＜30×109/L）。攜帶污染率要求：WBC≤3%，RBC≤2%，HGB≤2%，PLT≤4%。

1.2.3 批內精密度

使用1份滿足要求的樣本，重復測定11次，計算后10次結果的變異系數。樣本要求和變異系數要求如表1所示。

表1. 批內精密度檢驗結果

1.2.4 日間精密度

使用2個濃度水平的質控品，在檢測當日至少進行1次室內質控，剔除離群值，計算1個月內各項目的變異系數。變異系數要求：WBC≤6%，RBC≤2.5%，HGB≤2%，HCT≤4%，PLT≤8%，MCV≤2.5%，MCH≤2.5%，MCHC≤3%。

1.2.5 線性范圍

使用1份接近本實驗室檢測上限的高值樣本，按照100%、80%、60%、40%、20%、10%、0比例稀釋，每份稀釋樣本測3次，計算其均值。將儀器實際測定值與理論稀釋值進行比較，得出y=ax+b，進行線性范圍驗證。要求斜率a在1±0.05范圍內，相關系數r≥0.975。

1.2.6 正確度

使用10份結果在參考區間內的樣本，每份樣本測2次，計算20次結果的均值，以本實驗室內參加衛生部臨檢中心和山東省臨檢中心室間質評成績優良、定期校準合格的血細胞分析儀（序列號為13903）的測定均值為標準，計算偏倚。偏倚要求：WBC≤5%、RBC≤2%、HGB≤2.5%、HCT≤2.5%、PLT≤6%、MCV≤3%、MCH≤3%、MCHC≤3%。

1.2.7 不同吸樣模式的結果可比性

使用5份樣本分別采用自動模式和手動模式進行測定，每份樣本各測2次，根據公式（自動模式均值-手動模式均值）/自動模式均值×100%，計算兩種不同模式的相對差異。相對差異要求：WBC≤5%、RBC≤2%、HGB≤2%、HCT≤3%、MCV≤3%、PLT≤7%。

1.2.8 實驗室內結果的可比性

使用20份樣本，每份樣本分別在本實驗室標準儀器和比對儀器上進行檢測，計算相對偏差，每個項目相對偏差滿足要求的比例應≥80%。（選取樣本濃度的要求和相對偏差要求如表2所示）。

表2. 比對樣本的濃度要求及可比性驗證的允許偏差

1.2.9 準確度

使用5份衛生部室間質評物進行檢測，計算每份樣本結果與參考值的相對偏差，每個項目的相對偏差滿足要求的比例應≥80%。相對偏差要求：WBC≤15.00%、RBC≤6.00%、HGB≤6.00%、HCT≤9.00%、PLT≤20.00%、MCV≤7.00%、MCH≤7.00%、MCHC≤8.00%。

1.2.10 儀器間五分類比對

參照本儀器說明書，使用10份樣本，樣本濃度覆蓋整個生物參考區間，每份樣本分別在標準儀器上和比對儀器各檢測2次，計算兩次結果均值的偏差。判斷標準：NEUT%偏差≤3.0%、LYMPH%偏差≤3.0%、MONO%偏差≤2.0%、EO%偏差≤1.0%、BASO%偏差≤1.0%，10份樣本中8份滿足要求為比對合格。

1.2.11 人機五分類實驗

使用20份樣本分別采用人工鏡檢和儀器法進行白細胞五分類。人工鏡檢由2位具備資格的檢驗工作人員，通過雙盲法對每一份樣本的血涂片計數200個細胞，計算99%的可信區間[6,7]。儀器法對20份樣本分別測定2次，判斷儀器法結果的均值是否在99%可信范圍內。

2.結果

2.1 本底計數檢驗結果

檢驗結果的最大值均在要求范圍內，驗證合格。

2.2 攜帶污染率檢驗結果

計算得出的各項目攜帶污染率均在要求范圍內，驗證合格。

2.3 批內精密度檢驗結果

批內精密度檢驗結果見表1。

2.4 日間精密度檢驗結果

本實驗室一個月的質控在控數據的變異系數結果均在要求范圍內，驗證合格。

2.5 線性范圍檢驗結果

以下各項目WBC高值、WBC低值、RBC、HGB、HCT、PLT高值、PLT低值的線性回歸方程的斜率均在1±0.05范圍內，相關系數r≥0.975，均在要求范圍內，驗證合格。

2.6 正確度驗證檢驗結果

各項目的偏倚均在要求范圍內，驗證合格。

2.7 不同吸樣模式可比性的檢驗結果

自動模式和手動模式下檢測結果均值間的相對差異均在要求范圍內，驗證合格。

2.8 實驗室內結果可比性的檢驗結果

各項目相對偏差滿足要求的比例≥80%，驗證合格。見表2。

2.9 準確度的檢驗結果

本次實驗5份衛生部室間質評樣本，每個項目的相對偏差滿足要求的比例為100%，驗證合格。

2.10 儀器間五分類比對檢驗結果

本次實驗10份樣本偏差均在要求范圍內，驗證合格。

2.11 人機五分類實驗結果

本次實驗20份樣本儀器法結果的均值均在參考方法的99%可信范圍內，驗證合格。

3.討論

實驗室醫療儀器設備的性能驗證直接關系到檢驗結果的準確性，也是保證儀器自身性能穩定的重要因素，同時在臨床實驗室的全面質量管理中有著舉足輕重的作用。性能驗證也是醫學實驗室認可和等級醫院評審通過必備的條件。CNAS-CL02醫學實驗室質量和能力認可準則（ISO15189:2012）[8]要求定期驗證要求的測量準確度和測量系統功能。CNAS-CL02-A001《醫學實驗室質量和能力認可準則在臨床血液學檢驗領域的應用說明》[9]要求設備出現故障，應先分析原因，如果影響方法學性能，修復后必須進行相關的驗證。例如穿刺針磨損嚴重進行更換后，要進行質控驗證和樣本比對，驗證其加樣精度偏差是否滿足檢測要求，驗證通過后才能正常進行患者樣本的檢測。

本實驗室在依照相關標準的同時，參考已通過ISO 15189認可實驗室和三甲醫院評審的經驗，制定了該套針對本實驗室血液分析儀性能驗證的方案。本套方案在對基本常規指標進行驗證的同時，增加了不同吸樣模式可比性、實驗室內結果的可比性、儀器間五分類比對和人機五分類比對的驗證。目前大部分實驗室為了提供快速高效的檢驗報告都有多臺血細胞分析儀，參加衛生部或省級室間質評的也只有一臺儀器，而且同一臺機器還有不同的吸樣模式，儀器之間及不同吸樣模式之間的偏差是固然存在的，所以為了同實驗室內檢測結果的一致性，需要評估自己實驗室內部檢測數據的差異性，故增加了這幾個項目的比對。本次性能驗證的兩臺儀器數據偏差均在標準范圍內，表明本實驗室兩臺血細胞分析儀的差異小，有良好的可比性。

另外，白細胞分類作為血常規檢測的重要數據，其分類直接影響醫生對疾病的判斷，儀器自動化的白細胞分類計數又能減輕臨床實驗室的勞動強度和工作壓力，故血細胞分析儀的白細胞分類驗證十分重要，本實驗室增加了白細胞人機五分類比對[10]。白細胞分類以具備資格的專業技術人員閱片結果為金標準，驗證儀器的白細胞五分類結果是否在99%可信范圍內。本次研究儀器的五分類結果均在99%可信范圍內，說明儀器的白細胞五分類結果可靠。但在日常工作中，還需要檢驗工作人員結合報警信息以及散點圖進行全面分析，必要的時候進行人工鏡檢[11]。

綜上所述，此次性能驗證結果顯示本實驗室Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀本底計數低，符合要求。攜帶污染率在要求范圍內，儀器沖洗效果良好。精密度結果在允許范圍內，儀器重復性良好。線性良好，儀器準確度好，結果可靠。兩臺儀器之間的數據差異小，白細胞五分類結果可靠。所以，本實驗室Sysmex XN-2000血細胞分析儀驗證的所有項目均符合要求，性能驗證通過，可以滿足本院臨床樣本分析的需求。