電位滴定法測定咳痰清糖漿中總氯量

★ 劉艷平（廣州白云山星群〈藥業(yè)〉股份有限公司 廣州 510288）

咳痰清糖漿收載于《國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》中，具有化痰止咳功效，用于急性支氣管炎屬痰濁壅肺之咳嗽、咯痰。處方中含有鹽酸麻黃堿、遠(yuǎn)志流浸膏、桔梗流浸膏、甘草流浸膏、枇杷葉流浸膏、氯化銨、薄荷腦、木餾油、牡荊油等九味藥。其中鹽酸麻黃堿、氯化銨都具有化痰止咳的作用，而且都含有氯離子。原標(biāo)準(zhǔn)中已經(jīng)用高效液相色譜法對鹽酸麻黃堿進(jìn)行含量測定，對氯化銨未做含量測定。

目前對咳痰清糖漿中的氯化銨含量暫時還沒有專屬有效的方法進(jìn)行定量測定。結(jié)合咳痰清糖漿的處方中鹽酸麻黃堿和氯化銨都有氯離子的具體情況，本研究思路是鹽酸麻黃堿仍然用高效液相色譜法進(jìn)行含量控制；用電位滴定法測定咳痰清糖漿中的總氯量，以總氯量來間接控制氯化銨的含量。本研究建立了電位滴定法測定總氯量，間接控制氯化銨的含量，為咳痰清糖漿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 ZD-2型自動電位滴定儀（上海雷磁儀器有限公司）；玻璃-飽和甘汞電極（杭州齊威儀器有限公司）；JB-1A攪拌器（上海雷磁儀器有限公司）。

1.2 試劑 0.1 mol/L硝酸銀滴定液，由廣州白云山星群（藥業(yè)）股份有限公司提供。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)品 氯化銨，分析純（含量＞99.5 %），廣東汕頭市西隴化工廠提供。

1.4 供試品 咳痰清糖漿，由廣州白云山星群（藥業(yè)）股份有限公司提供（批號：BM30001、BM30002、BM30003、BM30004、BM30005、BM30006、CM30001、CM30002、DM30001、DM30002）。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備 精密量取咳痰清糖漿15 mL，置200 mL燒杯中，補加蒸餾水至50 mL，搖勻，作為供試品溶液。

2.2 陰性對照品溶液的制備 按照咳痰清糖漿處方量，取遠(yuǎn)志流浸膏、桔梗流浸膏、甘草流浸膏、枇杷葉流浸膏、薄荷腦、木餾油、牡荊油等制成不含鹽酸麻黃堿、氯化銨的陰性對照品溶液。

2.3 測定方法 將盛有供試品溶液的燒杯置電磁攪拌器上，浸入玻璃-飽和甘汞電極，攪拌，并自滴定管中分次滴加滴定液；開始時可每次加入較多的量，攪拌，記錄電位，至將近終點前，則應(yīng)每次加入少量，攪拌，記錄電位，至突躍點已過，仍應(yīng)繼續(xù)滴加幾次滴定液，并記錄電位。

2.4 滴定終點的確定 根據(jù)實驗得到的E值與相應(yīng)的V值，依次計算一級微商△E/△V（相鄰兩次的電位差與相應(yīng)滴定液體積差之比）值，將測定值（E，V）和計算值列表。再將計算值△E/△V作為縱坐標(biāo)，以相應(yīng)的滴定液體積（V）為橫坐標(biāo)作圖，一級微商△E/△V的極值時對應(yīng)的體積即為滴定終點。△E/△V達(dá)極值時前后兩個滴定液體積讀數(shù)的平均值即為終點時的滴定液體積。

2.5 線性關(guān)系考察 精密量取供試品溶液（批號：DM30001）3、5、10、15、20、25、50 mL 置200 mL燒杯中，補加蒸餾水至50 mL，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L；f=1.046）滴定，記錄硝酸銀滴定液的用量。結(jié)果表明，在供試品溶液取樣量為3～50 mL范圍內(nèi)，硝酸銀滴定液的用量呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=0.972 3X-0.021 6（r=0.999 9）。

2.6 重現(xiàn)性試驗 精密量取同一批供試品溶液（批號：DM30001）15 mL，共6份，分別置200mL燒杯中，補加蒸餾水至50 mL，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L；f=1.046）滴定，記錄硝酸銀滴定液的用量，每1 mL硝酸銀滴定液（0.1 mol/L）相當(dāng)于3.545 mg的氯。結(jié)果表明，用硝酸銀滴定液測得平均總氯量為3.622 mg/mL，精密度良好（RSD=0.89 %，n=6）。

2.7 穩(wěn)定性試驗 精密量取同一批供試品溶液（批號：DM30001）15 mL，共6份，分別置200 mL燒杯中，補加蒸餾水至50 mL，分別放置0、1、2、3、4、5 h后，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L；f=1.046）滴定，記錄硝酸銀滴定液的用量。結(jié)果表明，供試品溶液在放置0～5 h內(nèi)，用硝酸銀滴定液測定總氯量，穩(wěn)定性良好（RSD=1.10 %，n=6）。

2.8 回收率試驗 精密量取同一批供試品溶液（批號：DM30001）10 mL，共6份，分別置200 mL燒杯中，分別加入氯化銨溶液（精密稱取氯化銨0.544 0 g，置100 mL量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻）10 mL，分別補加蒸餾水至50 mL，照電位滴定法，分別用硝酸銀滴定液滴定（0.1 mol/L；f=1.046）滴定，記錄硝酸銀滴定液的用量，計算回收率。結(jié)果表明，用0.1 mol/L硝酸銀滴定液測定供試品中的總氯量，平均回收率100.77 %，RSD=1.315 %（n=6）。

2.9 樣品測定 取十批供試品（批號分別為BM30001、BM30002、BM30003、BM30004、BM30005、BM30006、CM30001、CM30002、DM30001、DM30002），每批平行取兩個樣，共20份，分別置200 mL燒杯中，補加蒸餾水至50 mL，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L；f=1.046）滴定，記錄硝酸銀滴定液的用量，每1 mL硝酸銀滴定液（0.1 mol/L）相當(dāng)于3.545 mg的氯。結(jié)果10批咳痰清糖漿含總氯量平均值為3.58 mg/mL，RSD=1.72 %（n=10）。

按處方量計算，咳痰清糖漿含總氯量理論值應(yīng)為3.494 mg/mL。根據(jù)以上十批樣品的總氯量測定結(jié)果及理論值，建議控制咳痰清糖漿中總氯量應(yīng)為3.15～3.84 mg/mL。

3 討論

3.1 測含氮量不適用于咳痰清糖漿中氯化銨的含量測定 氯化銨為無機鹽。對無機鹽的含量測定，通常的方法是針對其中的陽離子或陰離子，利用不同的化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行定量測定。目前的技術(shù)條件，還沒有比較有效的方法對復(fù)方制劑中的銨離子進(jìn)行定量。若選擇測定其中的含氮量，咳痰清糖漿處方中含有的四種流浸膏中是否含有未除去的蛋白質(zhì)不確定，所以測含氮量不適用于咳痰清糖漿中氯化銨的含量測定。

3.2 指示劑不適用于復(fù)方制劑中指示滴定終點 氯化銨為《中國藥典》二部收載品種，類別為祛痰藥，輔助利尿藥，常用于止咳化痰類復(fù)方制劑中。氯化銨作為原料藥時的含量測定方法是加糊精溶液（1→50）5 mL、熒光黃指示液8 滴與碳酸鈣0.10 g作為指示劑，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L）進(jìn)行滴定。該方法是利用氯化銨中的氯離子與銀離子結(jié)合生成氯化銀沉淀，再根據(jù)硝酸銀滴定液的用量計算出總氯量。由于咳痰清糖漿處方中含有四種流浸膏：遠(yuǎn)志流浸膏、桔梗流浸膏、甘草流浸膏、枇杷葉流浸膏，咳痰清糖漿的顏色為橙棕色，將嚴(yán)重影響用指示劑法滴定終點的判斷。用電位滴定法指示滴定終點，靈敏度更高。

3.3 電位滴定法滴定終點的確定 電位滴定法滴定終點的確定分為作圖法、一階導(dǎo)數(shù)數(shù)和二階導(dǎo)數(shù)法。作圖法是以指示電極的電位（E）為縱坐標(biāo)，以滴定液體積（V）為橫坐標(biāo)，繪制滴定曲線，以滴定曲線的陡然上升或下降部分的中點或曲線的拐點為滴定終點。二階導(dǎo)數(shù)法是以二級微商△2E/△2V作為縱坐標(biāo)，以相應(yīng)的滴定液體積（V）為橫坐標(biāo)作圖，二級微商△2E/△2V等于零（曲線過零）時對應(yīng)的體積為滴定終點。

本次實驗過程中對以上兩種滴定終點的確定方法進(jìn)行比較，結(jié)果無顯著性差異。本方法確定采用一階導(dǎo)數(shù)法確定滴定終點，既可以避免因操作人員不熟練導(dǎo)致判斷錯誤，也可以避免相對比較復(fù)雜的計算量。

3.4 總氯量測定結(jié)果的探討 由于咳痰清糖漿處方中含有鹽酸麻黃堿和氯化銨，這兩個成分同時含有氯離子，因此，本方法測定的總氯量既包含氯化銨中氯離子的含量，也包含鹽酸麻黃堿中的氯離子含量。

本次實驗共選取了十批咳痰清糖漿測定其中的總氯量，測得十批樣品中總氯量為3.491～3.699 mg/mL，批間波動不大。但是測定結(jié)果普遍高于總氯量的理論值。分析認(rèn)為，氯離子廣泛存在于自然界及飲用水中，在藥材提取過程中，會引入部分氯離子，導(dǎo)致實測值比理論值略有偏高的結(jié)果。

4 小結(jié)

本方法靈敏度高，操作簡單，方便快捷，檢測成本低，能有效克服因其他成分的干擾導(dǎo)致的熒光指示劑不能靈敏指示滴定終點的缺點。因此本方法可以作為咳痰清糖漿中總氯量的含量測定方法，可間接控制制劑中氯化銨的含量。