益氣活血法對血管損傷保護作用的研究*

吳 燁， 雷 燕， 修成奎， 王 雪， 胡艷紅， 吳 丹， 劉奕清，劉逸南， 歐陽競鋒， 楊 靜

(中國中醫科學院醫學實驗中心，北京市中醫藥防治重大疾病基礎研究重點實驗室， 北京 100700)

高血壓、動脈粥樣硬化、冠心病、腦卒中、糖尿病血管病變等重大疾病發病率逐年上升，已嚴重威脅到人類的生命健康[1]。這些重大疾病的發生都與血管損傷有關，因此改善血管損傷對預防這類重大疾病有重要意義。當血管遭遇機械、炎癥等損傷因素時，在化學因子、切應力、生長因子的刺激下，血管內皮受損導致炎性細胞浸入、血管平滑肌細胞增殖遷移，導致血管增厚再狹窄、粥樣硬化、斑塊破裂，這就是血管損傷，也是損傷發生后修復不良的主要原因之一[2]。中醫對血管損傷未有明確病名記載，但有大量關于血管損傷表現的古籍記載。中醫認為引起血管損傷的主要病機是氣虛血瘀[3]，臨床常采用益氣活血法治療血管損傷相關疾病。由于血管損傷貫穿于許多重大疾病的始終，因此如何改善和治療血管損傷越來越得到醫療界的重視，目前已有許多藥物及其機制研究開展，筆者就近5年內使用益氣活血法改善與治療血管損傷的研究進行了述評與總結。

1 中醫學對于血管損傷病變的認識

1.1 血管損傷背景

中醫對于血管及血管病變有著豐富的記錄，《黃帝內經》曾明確提出“血脈”的概念，如《靈樞·決氣》中“何為脈，壅遏營氣，令無所避，是謂脈”。其中明確指出脈是封閉的管道?！端貑枴っ}要精微論篇》載:“夫脈者，血之府也”，指出“血脈”是容納血液運行的通道?！鹅`樞·本臟》中言:“經脈者,所以行血氣而營陰陽,濡筋骨,利關節者也”，指出經脈運行氣血而充盈機體。《靈樞·平人絕谷》說:“血脈和利,精神乃居”，以上均體現了血脈在人體生理中的重要性，從上述可見，“血脈”“脈道”即基本等同于今人所言血管。

《靈樞·口問》說: “夫百病之始生也,皆生于……血氣分離,陰陽破敗,經絡厥絕,脈道不通……經脈虛空……乃失其?！保岢鰵庋\行失常，陰陽失調，經絡受損，脈道運行不流利是疾病產生的原因；王叔和《脈經》說: “一損損于皮毛,二損損于血脈,血脈虛少,不能榮于五臟六腑”[4]。王清任《醫林改錯》曰: “周身之氣,通而不滯,血活而不瘀”，指出氣血運行須“通”“活”；“元氣既虛,必不能達于血管,血管無氣,必停留而瘀”，指出機體元氣虧虛導致血管運行無力形成瘀滯[5]；《傷寒雜病論》提到“營衛不通，血凝不流”“血脈相傳，壅塞不通 ”[6]，都描述了氣血在脈道中出現的病理現象。

1.2 氣虛血瘀是血管損傷的主要病機之一

中醫氣血理論認為，氣血既是組成人體的最基本物質，也是維持人體生命活動的物質基礎，二者在生理上相互依存、彼此轉化，在病理上也會相互牽連、相互影響[7]。中醫學認為“氣為血之帥，血為氣之母”，氣血相互滋生源源不斷，機體在遭受外感、內傷后，氣虛無權推動血液的運行，致使脈道艱澀難行，血液運行緩慢受阻，遷延日久，臟腑失去營養物質濡養，故耗傷機體氣血又生化乏源，形成氣虛血瘀的循環[8]，故氣虛血瘀是血管病變的主要病機，益氣活血法是治療血管損傷的基本治則之一。提出益氣活血法治療血管損傷的理論，較早源于《素問·陰陽應象大論篇》中“定其血氣，各守其鄉。血實宜決之，氣虛宜掣引之”的論述，氣虛當補氣，血瘀當活血，使氣旺得以鼓動血行，促使血流通暢，氣血互根，使氣血充盈調和，故益氣活血法是治療血管損傷的主要治法，應用益氣活血方藥治療保護血管損傷，治療血管病變在臨床中較為常見。

2 益氣活血方藥對血管損傷的保護作用研究進展

2.1 保護血管內皮

血管內皮具有多種生理功能，可參與機體的血管調節、免疫、纖溶、凝血、物質轉運和生物活性物質釋放等生命活動。當血管內皮遭受缺氧等損傷時，內皮細胞受損能合成分泌多種血管活性物質來調節血管張力、血液流動性及黏附性，如一氧化氮(NO)、血管內皮素ET、血管內皮素-1 (ET-1)、血管假性血友病因子(vWF)、血栓素A2(TXA2)、前列腺環素(PGI2)等，它們在機體含量變化都將影響機體血管病理改變，因此這些指標常被用于預測血管損傷程度[9]。國內外越來越多學者發現，血管內皮損傷是許多血管病變的起始環節，所以積極保護內皮對防治血管損傷性疾病意義重大。

陳冰等[10]通過研究，將大劑量的黃芪注射液和小劑量的鹽酸川芎嗪注射液聯合用藥，二者聯用后可抑制缺氧損傷內皮細胞的凋亡，促進內皮細胞分泌NO，并抑制分泌ET，從而發揮舒張血管、保護血管的作用。周曦等[11]研究發現，白藜蘆醇可抑制棕櫚酸誘導的內皮細胞氧化應激損傷，其途徑是通過激活細胞轉錄因子EB完成的。劉磊等[12]研究發現，紅景天苷可顯著抑制高糖導致的人臍靜脈內皮細胞中細胞間黏附分子-1(ICAM-1)和血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)水平升高，說明紅景天苷可保護血管內皮，降低炎性因子。研究表明[13]補陽還五湯可以通過調節MAPK激酶信號通路，阻斷p38 MAPK、ERK1/2活化的表達，維持內皮細胞完整，從而起到抗動脈粥樣硬化的作用。Wenting Chen等[14]研究表明，當歸四逆湯可以通過維持細胞活力，促進細胞增殖和成管能力，有效保護胰島內皮細胞免受缺氧損傷，其過程是通過P13K/Akt/eNOS途徑完成的。Ungvari,Z等[15]發現，麝香保心丸可以通過提高eNOS活性來促進NO的生成，這可能是麝香保心丸保護內皮細胞免受ROS誘導損傷的另一種機制。Kar Wah Leung等[16]研究結果顯示，人參皂苷Re在60 s時誘導NO產生峰值，且隨Ca2+ 的升高而升高，由此得出結論：人參皂苷Re可以作為GR的激動劑引起Ca2+ 內流和NO的產生。

2.2 抑制平滑肌增殖

正常生理狀態下，血管內膜下層不會含有平滑肌細胞，只有在病理因素作用下，血管內皮受到損傷時，才會產生多種血管活性物質作用于血管平滑肌膜受體[17]，使平滑肌細胞發生表型轉化、增殖，從而導致血管內膜增生，促進心血管疾病的發生發展，所以抑制平滑肌細胞增殖和遷移、誘導平滑肌細胞凋亡、減輕內膜增生對損傷血管的保護起到重要作用。

有研究表明，補陽還五湯可以抑制平滑肌細胞向內膜遷移，阻止內膜增生[18]。郭春蘭[19]等通過制備補陽還五湯含藥血清，用不同濃度含藥血清對平滑肌細胞進行體外保護，其后分別加入Rho激酶抑制劑、激動劑、Rho激酶，檢測各含量血清對平滑肌細胞增殖的影響。結果顯示，高濃度補陽還五湯含藥血清可通過抑制Rho激酶活性降低平滑肌細胞增殖的程度，從而保護平滑肌細胞，減輕動脈粥樣硬化程度。樊凱芳[17]等發現當歸四逆湯可抑制AngⅡ誘導的血管平滑肌細胞的增殖和遷移，為防治動脈硬化閉塞癥提供科學依據及有效方藥。陳文明等[20]通過實驗得出人參皂苷Rg3可減輕大鼠血管內膜的增生程度，新生內膜區平滑肌細胞凋亡率顯著增加，這一過程人參皂苷Rg3是通過調節Fas、Bcl-2的表達完成的。趙京山等[21]研究表明，羥基紅花黃色素A這種天然單體通過降低細胞增殖標志基因 PCNA表達和 MEK-ERK1 /2信號通路抑制PDGF誘導的大鼠血管平滑肌細胞增殖。還有研究表明[22]，川芎嗪可以通過下調JNK磷酸化并調節平滑肌細胞內FGFR-1蛋白、分泌VCAM-1，ET-1和NO含量等途徑抑制PM2.5誘導的血管平滑肌增殖。梁戎等[23]的研究證明，白藜蘆醇可能通過調節miR-21-5p/PDCD4通路來抑制血管平滑肌細胞增殖，達到治療高血壓的作用。Li Zhang等[24]首次證明，補陽還五湯可能通過調控MMP-9的表達及SIRT1的激活來抑制衰老的人主動脈平滑肌細胞遷移和侵襲的作用。

2.3 抗氧化應激

氧化應激是指體內氧化水平超過抗氧化水平，使體內過氧化物或高活性氧分子如活性氧ROS及自由基水平升高，過量的自由基與細胞內蛋白質、核酸等物質發生過氧化反應[25]，從而導致器官、組織等的過氧化損傷以及血管結構和功能的損害，進而導致心腦血管疾病的發生。

劉淑玲等[26]研究結果顯示，紅花黃色素處理造模組MDA、ROS水平明顯升高，SOD、GSH-Px水平明顯降低，提示紅花黃色素可能通過抑制氧化應激反應起到抗動脈粥樣硬化的作用。王雪等[27]通過對益氣活血中藥人參-三七-川芎提取物的研究發現，其可以升高線粒體膜電位，減少ROS生成，從而起到延緩由高糖高脂引起的血管內皮細胞衰老。還有研究表明[28]，機體在高糖及缺血缺氧狀態下呈高度氧化應激狀態，而白藜蘆醇可明顯降低機體的氧化應激狀態，起到有效保護血管及缺血器官的作用。Chunlan Fan等[29]通過研究發現，人參皂苷R1可以抵抗高糖誘導的內皮損傷，可能是由于其具有調節細胞內氧化還原狀態的能力。Huang Guidong等[30]發現，人參皂苷Re對H2O2引起的人臍靜脈內皮細胞氧化損傷具有保護作用。周彬等[31]發現，人參皂苷 Rb1 能顯著降低衰老細胞 NF-κB p65 的活性，提升 SOD 活力，降低 MDA、IL-6、TNF-α 水平，結果表明人參皂苷 Rb1 可通過抑制NF-κB p65 介導的氧化應激和炎癥反應延緩復制性內皮細胞衰老，對延緩機體衰老、防治心腦血管疾病都有重要影響。王圣鑫等[32]通過建立氧糖剝奪模型發現，補陽還五湯具有抗氧化應激損傷的作用，其過程之一是通過調節P13K/Akt信號通路增加P13K、Akt蛋白表達水平完成的，為補陽還五湯應用于臨床奠定了基礎。鄭華珠等[33]研究證明，補陽還五湯可通過抑制ROS的生成及上調SIRT1表達水平起到抗氧化應激的作用，從而說明補陽還五湯抗腦缺血再灌注損傷的作用機制。

2.4 抗炎癥反應

大量研究表明，除血管內皮損傷外，炎癥反應在多種血管疾病的形成與發展中亦具有樞紐性的作用。炎癥反應的始動環節是白細胞與內皮細胞的黏附，白細胞在內皮細胞中的黏附過程中，產生黏附因子滲出導致血管及組織被破壞與清除，從而產生炎癥[34]。黏附因子是產生炎癥反應的重要分子基礎，如p-選擇素、TNF-α、IL-1、CRP等。

蘇燕青等[35]通過建立體外內皮細胞氧糖剝奪模型，使用紅景天苷處理氧糖剝奪模型組，結果發現紅景天苷能明顯減輕氧糖剝奪組內皮細胞的損傷，減少LDH釋放量，降低p-選擇素的表達，結果提示其機制可能與紅景天苷能降低黏附因子p-選擇素的表達水平，從而減少白細胞黏附、起到抑制炎性反應的作用有關。劉磊等[36]發現，紅景天苷可降低炎性因子濃度而保護高糖導致的內皮細胞損傷，且與濃度呈依賴性關系。郭建峰等[37]實驗表明，丹紅注射液聯合阿托伐他汀可顯著降低ACS患者PCI術后TNF-α、IL-1及CRP水平，效果優于單純使用阿托伐他汀組，說明丹紅注射液與阿托伐他汀聯用具有更好的抗炎癥反應效果。張濤等[38]實驗結果中，丹紅注射液治療組中hs-CRP、TNF-α、IL-6 等致炎因子水平明顯降低，且血漿黏度與全血還原黏度均下降，提示丹紅注射液明顯減輕了炎癥反應，從而降低PCI術后患者的風險因素，改善其臨床癥狀。還有研究表明[39]，丹紅注射液能顯著降低IL-6、IL-1、TNF-α、hs-CRP水平，抑制炎癥反應的發生，改善血栓性靜脈炎的臨床癥狀。Zhen Hu等[40]實驗結果顯示，丹紅注射液可以顯著降低血漿中TNF-α、IL-6、CRP的水平，證明丹紅注射液可以抑制炎性反應，修復受損內皮，達到改善PCI術后冠心病患者癥狀并預防再狹窄的作用。李嬌等[41]通過實驗得出，川芎嗪可抑制由補體旁路激活導致的人微血管內皮細胞炎癥反應中黏附因子及炎性介質的表達。Bo Liu[42]等通過網絡藥理學進行動物實驗發現，補陽還五湯可通過多途徑發揮抗炎作用，如PI3K Akt信號傳導途徑、MAPK信號傳導途徑和NF-κB信號傳導途徑等。Hongmin Zhang[43]等通過實驗發現，當歸補血湯可以降低糖尿病性動脈粥樣硬化的炎癥標志物水平，且其對降低體內血糖沒有直接作用。

2.5 促進血管新生

血管新生指新生毛細血管從已存在的血管側枝中出芽與再塑，在心肌梗死、糖尿病下肢缺血、急性腦梗死等缺血性疾病中，需要促進血管新生來改變器官組織缺血的狀態[44]，但是過多的血管新生也可能帶來壞的臨床結果，如糖尿病視網膜病變、動脈粥樣硬化、腫瘤等疾病。當前越來越多學者利用中藥多靶點、多方位、多功效的特點來研究血管新生治療疾病血管損傷的作用，如利用血管新生緩解組織缺血、建立側支循環等。

吳幫衛等[45]通過實驗發現，麝香保心丸可抑制LATS1磷酸化，激活YAP后上調內皮細胞血管新生相關基因的表達，達到促血管新生的作用，對于缺血性心臟病等都有緩解病情的作用。而沈偉[46]等發現，麝香保心丸在促進缺血心肌區血管新生的同時還具有抑制動脈粥樣硬化區血管新生，達到穩定斑塊的作用。這說明同一藥物在不同部位可以發生截然相反的作用。鄒江等[47]實驗結果顯示，紅花黃色素可以促進HUVEC管型形成和遷移，上調VEGFA水平，進而促進血管新生，起到保護心肌的作用。劉暖等[48]實驗中，治療組大鼠新生血管數量顯著增加，CD34和VEGF的水平明顯升高，說明黃芪提取物可促進心梗大鼠心肌中血管新生，并促進血管的發育和成熟。還有研究表明[49]，川芎嗪可以促進腦微血管內皮細胞的增殖、遷移及管腔形成，其促進血管新生的機制可能與其能提高細胞因子SDF-1及VEGF水平有關；胡輝等[50]發現，補陽還五湯含藥血清可能通過上調HBMECs中miRNA-210表達激活血管內皮細胞VEGF信號通路有關。

2.6 改善脂質代謝

脂質代謝紊亂與血管損傷性疾病息息相關，當血液中脂質含量升高，可引起血管內皮細胞炎癥反應及氧化損傷，導致血管通透性增加，LDL進入血管內膜被氧化為OX-LDL，促進單核細胞成為巨噬細胞，巨噬細胞又吞噬大量膽固醇變為泡沫細胞，不斷刺激著平滑肌細胞增殖，引起血管內膜增生，從而引起一系列血管相關性性疾病[49]。

劉淑玲等[51]通過建立兔高脂血癥模型，給予紅花黃色素處理，研究結果顯示，注射紅花黃色素處理組血清中TC、TG、LDL-C和OX-LDL水平降低，HDL-C、ApoE、LDL-R和SR-B1水平升高，并且動脈粥樣硬化程度降低，說明紅花黃色素可能通過調控脂質代謝這一途徑來抑制動脈粥樣硬化進展。李俊等[52]通過對122例老年冠心病介入術后患者使用麝香保心丸治療，通過對內皮功能檢測，最終得出麝香保心丸可通過降低TC、LDL-C、和TG水平，從而提高HDL-C水平，改善脂質代謝紊亂。有研究表明，三七皂苷R1可以抑制OX-LDL導致的HUVEC損傷，其過程可能是通過調節miR-421表達完成的[53]。

3 總結

綜上，通過對益氣活血法治療血管損傷的文獻梳理，發現常用的益氣活血藥有補陽還五湯、麝香保心丸、丹紅注射液等復方，人參皂苷、白藜蘆醇、紅花黃色素等中藥單體，以及單味藥如三七、川芎、人參等。益氣活血類方藥主要通過保護血管內皮、抑制平滑肌增殖、抗氧化應激、抗炎癥反應、促進血管新生及改善脂質代謝紊亂等多種途徑發揮治療作用。從中可以發現，無論是單味中藥、單體還是復方，都不止從單方面發揮作用，而是通過多靶點、多層次共同發揮作用起到對血管損傷的保護作用，這為未來研究者應用益氣活血藥治療血管損傷提供了寶貴參考，也為發現藥物的新靶點、新路徑提供了研究基礎。然而中藥成分復雜，不良反應也尚未完全明確，對益氣活血方藥保護損傷血管的研究有待進一步深入，為規范使用益氣活血藥治療血管損傷提供完善的研究依據。