嗜堿性粒細胞活化試驗在過敏性疾病應用中的研究進展①

張 敏 崔振澤 李 悅 徐 超

（大連市兒童醫院，大連116000）

雖然世界醫療水平、工業發展程度以及感染性疾病的防治水平不斷提高，但是過敏性疾病的發病率卻在全球呈現增高的趨勢，嚴重影響公共健康，已成為21 世紀需著重研究和防治的疾病之一［1］。臨床工作中主要根據相關病史以及體內和體外試驗對過敏性疾病作出診斷，但因描述病史有一定的不精確性和主觀性，故主要診斷依據為體內試驗和體外試驗［2］。目前常用的體內試驗包括皮膚點刺試驗、斑貼試驗、激發試驗；常用的體外試驗包括過敏原吸附試驗、嗜堿性粒細胞組胺釋放試驗以及特異性IgE 及IgG 檢測等［3］。其中體內試驗存在誘發過敏反應的潛在風險。傳統體外試驗具有易干擾、特異度低等缺點，如特異性IgE 檢測不能評估過敏性疾病的發病風險及嚴重程度［4-5］；嗜堿性粒細胞組胺釋放試驗（histamine release test，HRT）由于組胺來源的多樣性使得其敏感性低于體內試驗等［6］。因此臨床工作中亟需進一步探索安全簡便有效的輔助診斷過敏性疾病的檢測方法。

流式細胞術（flow cytometry，FCM）可快速簡便的通過識別免疫標志物來區分細胞類型，并對某種特定細胞進行定量分析［7］。微流體技術（microfluidic technology）是在FCM基礎上進一步發展起來的一種高精度處理小體積流體的技術［8］。近年來，在上述兩種技術發展的基礎上，嗜堿性粒細胞活化試驗（basophil activation test，BAT）作為一種輔助診斷過敏性疾病的新方法應用而生。本文就嗜堿性粒細胞的相關概念、分別基于FCM 及微流體技術的BAT及其對過敏性疾病輔助診斷的應用價值做一綜述，以期為今后過敏性疾病的臨床診斷提供相關理論指導。

1 嗜堿性粒細胞的相關概念

1.1 嗜堿粒細胞 嗜堿性粒細胞于1879年由EHRLICH 發現，是迄今為止研究較少的一類白細胞。由于嗜堿性粒細胞占外周血白細胞的比例很小（＜0.3%），所以既往通過分離培養來獲得純的嗜堿性粒細胞樣本進行研究，進而檢測并分析其釋放組胺、白三烯及細胞因子等情況［9］。然而因采血量大，步驟繁多，耗時較長，影響因素多等局限在很長一段時間內限制了該細胞的研究進展。

近年來隨著科技水平的提高，嗜堿性粒細胞的提純方法也逐漸興起，如流式細胞分選術以及磁珠負性選擇和密度梯度離心相結合的純化方法，使得高純度的嗜堿性粒細胞更為簡便，因此科學界對嗜堿性粒細胞的研究掀起了新的熱潮。有學者曾將此現象稱為“ 一個被忽視的小群體重新贏得了尊重”［10-11］。

嗜堿性粒細胞源自骨髓造血多能干細胞，在骨髓中成熟后分布于外周血［12］。該細胞廣泛存在于生物界，如在哺乳類、兩棲類和魚類等均存在［13］。正是該細胞存在的廣泛性揭示了其在生命活動過程中的必要性，具體表現為該細胞在IgE介導的Ⅰ型超敏反應中扮演著重要的角色。其胞漿中的嗜堿性顆粒內貯存有大量的炎癥介質，如組胺、白三烯、抗微生物肽、趨化因子及白細胞介素等［14］。當機體初次接觸過敏原時，在體液免疫作用下漿細胞便產生針對過敏原的特異性IgE 抗體，這些特異性IgE 抗體可與嗜堿性粒細胞及肥大細胞表面的高親和力IgE 受體（FcεRⅠ）結合，使嗜堿性粒細胞和肥大細胞處于致敏狀態。當機體再次接觸同種過敏原時，即使很小劑量進入機體，便可很快與致敏嗜堿性粒細胞和肥大細胞表面的IgE 結合，通過交聯作用使上述致敏細胞激活、脫顆粒并釋放胞漿中的炎癥介質，誘發不同程度的過敏反應，嚴重時可產生致命的全身性反應。因此嗜堿性粒細胞也被稱為“循環中的肥大細胞”，具有免疫調節和免疫應答的作用［15］。

嗜堿性粒細胞通過活化來參與多種變態反應性疾病，如過敏性支氣管哮喘、蕁麻疹等［16-23］。活化是其發揮免疫作用的關鍵。一方面與該細胞活化分泌多種炎癥介質相關，如過敏性支氣管哮喘作為常見的氣道過敏性疾病，在其發病過程中處于致敏狀態的嗜堿性粒細胞在變應原的刺激下活化分泌組胺、白三烯、嗜酸性粒細胞趨化因子、中性粒細胞趨化因子及血小板活化因子等炎癥介質，可使支氣管黏膜血管通透性增加，進而介導氣道炎癥的產生、氣道平滑肌的收縮及氣道黏液的分泌，使氣道處于高反應性狀態，誘導支氣管哮喘的發生［16-17］；再如蕁麻疹作為一種臨床常見的皮膚過敏性疾病，有研究報道其發病與嗜堿性粒細胞活化分泌組胺、花生四烯酸代謝產物等炎癥介質相關，在這些炎癥介質的作用下皮膚及黏膜小血管擴張、毛細血管通透性增加，進而出現皮膚潮紅、風團樣皮疹的臨床表現［18］。另一方面與該細胞活化后誘導Th1/Th2 免疫失衡相關，主要表現為Th2 免疫應答的增強。目前學術界普遍認為支氣管哮喘的氣道慢性炎癥與Th1/Th2 細胞比例失衡相關，具體表現為Th2 細胞數目的增加及功能的增強［19-20］。而有研究報道嗜堿性粒細胞在活化后可產生Th2 型細胞因子如IL-4、IL-13 等，可介導局部引流淋巴結內Th0 向Th2 細胞分化，使Th2 免疫應答增強的同時Th1 免疫應答得到抑制，同時可促進B 細胞分泌IgE 抗體［21-22］，進而來參與支氣管哮喘的發生；同樣蕁麻疹的發病亦與相應變應原誘導的以Th2 細胞為主的免疫失衡相關［23］。

目前研究發現嗜堿性粒細胞的活化途徑包括IgE 介導的活化和非IgE 介導的活化。其中經典的活化途徑為IgE 介導的活化，表現為：當機體首次受抗原刺激后，可產生抗原特異性IgE，并與體內已存在的IgE 受體結合，其中嗜堿性粒細胞表面常規表達有高親和性IgE 受體，故當其與抗原特異性IgE 結合后可使嗜堿性粒細胞致敏［24］。當相同抗原再次進入機體并與致敏嗜堿性粒細胞膜表面的抗原特異性IgE 結合后，嗜堿性粒細胞可通過胞吐的過程來釋放胞漿嗜堿性顆粒內的相關炎癥介質，如嗜堿性粒細胞趨化因子和組織胺等，進而參與過敏反應的發生。非IgE 介導的活化途徑包括IgG1、IgD、細胞因子、蛋白酶以及Toll 樣受體配體和補體等介導的途徑［25］。

1.2 嗜堿性粒細胞表面的相關標志物 嗜堿性粒細胞活化脫顆粒釋放各種炎癥介質的同時，活化相關膜標志物也在發生改變［26］。 主要包括CD45、CD203c、CD63、CD69、CD123、CCR3、CRTH2、CD13、CD107a、CD107b、CD164 等［27-28］。其中最常用的為CD203c和CD63。

1.2.1 CD63 CD63 又稱溶酶體相關膜蛋白3，表達于多種細胞膜表面，如活化的嗜堿性粒細胞、肥大細胞、血小板及嗜酸性粒細胞等［29-32］。作為嗜堿性粒細胞活化的特異性標志物，對處于未激活狀態（靜息狀態）的嗜堿性粒細胞而言，CD63主要表達于胞質內的嗜堿性顆粒膜表面，而在細胞膜表面幾乎不表達，表達量＜5%；對受抗原刺激處于活化狀態的嗜堿性粒細胞而言，其胞質的嗜堿性顆粒逐漸向細胞膜靠近并與之發生融合，CD63發生由胞質顆粒膜向細胞膜的轉移，使得其在細胞膜表面的表達量增多［33-34］。根據CD63 在嗜堿性粒細胞活化過程中表達上調的特點，便可對處于激活狀態的嗜堿性粒細胞進行檢測，并計算其活化率。此外有學者進一步提出通過量化嗜堿性粒細胞活化后細胞膜表面CD63 的表達量來評估嗜堿性粒細胞受變應原刺激后的活化程度，進而間接反應機體發生過敏反應的程度［8］。

1.2.2 CD203c CD203c 是一種Ⅱ型糖基化跨膜分子，其表達于嗜堿性粒細胞以及肥大細胞的細胞膜表面，是嗜堿性粒細胞的識別標志物及活化標志物之一［35］。CD203c 既表達于靜息狀態的嗜堿性粒細胞，也表達于處于活化狀態的嗜堿性粒細胞。但不同的是其表達量隨著細胞活化程度的變化而變化，具體表現為在處于靜息狀態的細胞表面低表達，而在受抗原刺激處于激活狀態的細胞表面表達量則上調。此外有研究表明處于相同活化狀態的嗜堿性粒細胞表面CD63 和CD203c 的表達情況存在差異，后者的表達量明顯優于前者［36-37］。因此筆者認為根據CD203c 的上述表達特點，可利用FCM對嗜堿性粒細胞進行檢測，并通過計數CD203c 表達量上調的細胞所占的比例來進一步評估嗜堿性粒細胞的活化率。

1.2.3 CD45 CD45 是Ⅰ型跨膜糖蛋白，又稱白細胞共同抗原。作為一種受體蛋白酪氨酸磷酸酶，可參與細胞膜的信號轉導，同時作為有核血細胞表面的特異性標志物，僅表達于除成熟紅細胞和血小板以外的所有有核血細胞表面，主要參與血細胞的發育、活化、衰老和凋亡，尤其對淋巴細胞的作用顯著，故在淋巴細胞膜表面的表達密度較高，依次是單核細胞、粒細胞，且CD45 的表達量隨細胞的成熟而增加［38-39］。筆者認為CD45 可輔助其他標志分子對嗜堿性粒細胞進行檢測。

1.2.4 其他表面分子 CCR3 是一種趨化因子受體，主要參與炎癥細胞的浸潤。其主要表達于嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞及肥大細胞等細胞膜表面［40］。CD123 為白細胞介素3 受體的1 個亞單位，對白細胞介素3 有較高特異性，表達于嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞及肥大細胞表面［41］。CRTH2是1種化學誘導趨向性受體，在人體外周血中主要表達于Th2 細胞、嗜堿性粒細胞及嗜酸性粒細胞表面，其通過與前列腺素D2 結合介導炎癥細胞浸潤來參與過敏反應的發生［42］。

2 BAT

2.1 FCM 及微流體技術 FCM 是一種利用流式細胞儀進行快速細胞定量分析和細胞分選的技術，具有速度快、分析全面、可定性及定量分析、測量參數多、分選純度高等特點［7］。

微流體技術是一種高精度處理小體積流體的技術，通常只需微升到納升的標本量［43］。微流控免疫親和細胞分離（microfluidic immunoaffinity cell separation）是一種特殊的細胞分離技術，即把可與目標細胞特異性結合的抗體固定在微流控芯片的表面，之后通過與細胞結合來捕獲細胞，再進行光學檢測，對分離得到的目標細胞進行進一步的研究。該技術曾被用于全血中淋巴細胞及中性粒細胞等白細胞的分離［44］。

2.2 基于FCM 的傳統BAT 傳統的BAT 是在FCM的基礎上對嗜堿性粒細胞加以定性及定量分析的方法，其步驟為：每批標本都需通過設立陽性對照與陰性對照來進行檢測，其中抗FcεRⅠ抗體為陽性對照，刺激緩沖液為陰性對照［26］。將20 μl刺激緩沖液加入至100 μl 肝素化血液中孵育10 min，孵育時溫度控制在37℃；終止嗜堿性粒細胞脫顆粒通過置于冰箱冷卻5 min 實現；之后加入被標記的相關檢測抗體（如被PE標記的抗IgE抗體及被FITC標記的抗CD63 或者被PE 標記的CD203c 抗體及被FITC 標記的抗CD63抗體），并于室溫下放置10 min，實現細胞與相應抗體的結合；最后用溶血素處理溶解紅細胞，經離心洗滌后通過流式細胞儀實現對嗜堿性粒細胞活化程度的定性和定量分析［45］。嗜堿性粒細胞活化程度用嗜堿性粒細胞活化率（即活化的嗜堿性粒細胞數與總嗜堿性粒細胞數的比值）來表示，通常活化率≥2% 可認為嗜堿性粒細胞活化。但當考慮到非特異性激活的因素時，活化率≥5% 考慮嗜堿性粒細胞活化［14，46］。國外也有學者提出用刺激指數（stimulation index，SI，即由過敏原激活的嗜堿性粒細胞百分比/自發激活的嗜堿性粒細胞百分比）來表示檢測結果，然而目前關于SI 的公認標準尚未確定，需要有待進一步的研究［47］。

基于FCM 的傳統BAT 存在耗時長、成本高以及對操作技術要求高等缺點，限制了其在臨床工作中的普及，目前國內很多醫院尚未開展BAT，故亟需改良傳統BAT來滿足臨床需求。

2.3 基于微流體技術的新型BAT（miBAT） 在臨床需求的推動下，近年來瑞典有學者提出了miBAT，國內尚未有關于miBAT 的文獻資料報道。其具體方法步驟為：第一步制備微流控芯片器件并進行表面改性：①使用聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane，PDMS）平版印刷技術制備微流控器件；②經氧等離子體的短暫處理將PDMS 復制品粘在玻璃載玻片（70 mm×30 mm）上；③用3-巰基丙基三甲氧基硅烷（3-mercaptopropyl trimethoxysilane）處理芯片1 h為后續的固定捕獲嗜堿性粒細胞的抗體（即抗CD203c生物素）做準備；④用乙醇洗滌后，與0.01 μmol/ml 4-馬來酰亞胺丁酸N-羥基琥珀酰亞胺酯（4-maleimidobutyric acid N-hydroxysuccinimide ester，GMBS）在乙醇中室溫孵育20 min；⑤先后用乙醇及磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS）洗滌后，加入10 μg/ml 中和素溶液并于PBS 中在4℃下孵育過夜；⑥于實驗前，注入生物素化抗CD203c 并孵育60 min，完成捕獲抗體的固定，為后續捕捉嗜堿性粒細胞做準備。第二步微流控芯片中嗜堿性粒細胞的捕獲：①在PBS 中用1% 牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）以20 μl/min 的速度洗滌和封閉芯片，以去除未結合（抗CD203c 生物素）抗體；②200 μl 的全血以3 μl/min 的速度流過，然后用1%BSA 以20 μl/min 的速度將非嗜堿性粒細胞洗滌出去。第三步被捕獲嗜堿性粒細胞的過敏原激發：①每組均需設立陽性和陰性對照，其中抗FcεRⅠ抗體作為陽性對照，刺激緩沖液作為陰性對照。分別用相關過敏原、陽性及陰性對照液刺激被捕獲的嗜堿性粒細胞25 min；②用1%BSA 洗滌后，用4%多聚甲醛（paraformaldehyde，PFA）在室溫下固定10 min，然后清洗芯片；③用抗CD203c 抗體在室溫下孵育1 h，再用熒光結合Alexa-488 的二級抗鼠抗體在室溫下染色1 h；用Alexa-647結合的抗CD63抗體在室溫下孵育30 min 后檢測CD63 的活化，并用霍氏染色檢測細胞核；④用1%BSA 清洗芯片，Nikon-Ti-Eclipse 顯微鏡掃描，Zyla 5.5scmos 相機采集圖像，用MicroManager 1.4 版軟件傳輸，Image J 軟件插件處理。第四步微流控芯片中CD63 平均熒光強度（mean fluorescence intensity，MFI）的測量：熒光強度測量是用Image J軟件直接在細胞上的多個點進行。圖像的深底為背景測量。熒光強度測量用背景測量和目標測量的數值差表示。嗜堿性粒細胞的活化程度可以用嗜堿性粒細胞的MFI 比率（即活化嗜堿性粒細胞的MFI/非活化嗜堿性粒細胞的MFI表示）［8］。

目前國外學者提出可以通過預制芯片及用抗體涂層芯片，優化流速和孵育程序來縮短試驗時間，利用計算機軟件自動讀取和分析圖像，并對非活化細胞和活化細胞進行自動識別，來進一步優化該試驗［8］。

miBAT 無需預先標記和處理樣品，可直接從全血中捕獲CD203c 陽性細胞（即嗜堿性粒細胞），并將捕捉到的嗜堿性粒細胞用抗FcRⅠ抗體激活，于熒光顯微鏡下檢測嗜堿性粒細胞CD63 的表達水平。微流體技術的引入成功的解決了基于FCM 的傳統BAT 存在的局限，不僅在降低成本的同時減少了對試劑量和生物樣本量的需求，而且可實現高通量自動化分析以及將多個操作步驟集成在一個設備的目標，使得操作更簡便高效。

2.4 BAT 的常見門控策略 BAT 的核心在于對樣本進行處理后篩選符合要求的嗜堿性粒細胞。下面介紹幾種常見的篩選門控策略：①IgE、CD63聯合設門。第一步通過前向角與側向角確定出嗜堿性粒細胞所在的大致區域，即白細胞群的區域；第二步根據嗜堿性粒細胞表面的IgE 受體可與IgE 特異性結合的特點，利用IgE-FITC 對其進行標記，篩選嗜堿性粒細胞；第三步根據嗜堿性粒細胞被激活后細胞膜表面有CD63 表達的特點，利用CD63 設門對處于活化狀態的嗜堿性粒細胞進行篩選，并由此計算嗜堿性粒細胞的活化率［48］。然而由于IgE 可能會非特異地與單核細胞、B 細胞等黏附，因此可能使嗜堿性粒細胞活化率略低。故筆者認為在第一步操作時利用前向角與側向角來確定粒細胞群的區域可在一定程度上減少IgE 非特異性黏附帶來的誤差，但有待進一步實驗來驗證；②IgE、CD45、CD63聯合設門。第一步根據嗜堿性粒細胞表面表達有高親和性的IgE 受體及CD45 的特點利用FCM 篩選出嗜堿性粒細胞，第二步根據嗜堿性粒細胞被激活后細胞膜表面表達CD63 的特點，利用CD63 設門將活化的嗜堿性粒細胞篩選出來，并由此計算出嗜堿性粒細胞活化率［34］；③IgE、CD45、CD203c 聯合設門。第一步同②設門思路，第二步根據嗜堿性粒細胞被激活后高表達CD203c 的特點，利用CD203c 設門篩選出表達量明顯上調的細胞即活化嗜堿性粒細胞，并計算嗜堿性粒細胞活化率［34］；④CRTH2、CD4、CD63聯合設門。第一步利用CRTH2和SSC雙參數設門選取CRTH2陽性細胞；第二步根據嗜堿性粒細胞表面CRTH2 陽性且CD4 陰性的特點，利用CD4 聯合CRTH2 設門對嗜堿性粒細胞進行篩選；第三步在上述篩選結果的基礎上利用CD63 設門將活化的嗜堿性粒細胞篩選出來，并計算出嗜堿性粒細胞活化率［49］；⑤CD123、HLA-DR、CD63 聯合設門。第一步根據嗜堿性粒細胞表面CD123 陽性且HLADR陰性的特點，利用CD123和HLA-DR設門篩選嗜堿粒細胞，第二步在上述操作的基礎上利用CD63設門篩選出活化的嗜堿粒細胞，并計算出嗜堿性粒細胞活化率［50-51］。但由于CD123 并不是特異性存在于嗜堿性粒細胞表面，也表達于血液中的中性粒細胞等細胞表面，故該設門法存在一定局限，可能會使得到的活化率偏低；⑥CD45、CD63、CD203c 聯合設門［26］。根據嗜堿性粒細胞表面表達有CD203c 及CD45 的特點，第一步利用CD45 和SSC 雙參篩選出CD45 陽性的細胞即有核細胞，第二步利用CD203c和SSC雙參數篩選出CD203c陽性的細胞，第三步在上述篩選基礎上再次通過CD45 和SSC 回選，確定CD203c 和CD45 雙陽性的細胞，即為純的嗜堿性粒細胞；第四步根據嗜堿性粒細胞活化后表面高表達有CD63 及CD203c 的特點，通過CD63 聯合CD203c篩選出活化的嗜堿性粒細胞，并計算嗜堿性粒細胞活化率。

綜上所述，筆者認為上述⑥的設門思路是一種最優的設門思路［26，52］。國內有相關研究便是采用該設門思路，如徐翀等［26］研究戶塵螨過敏性疾病時便是采用該設門思路，并將試驗結果與血清sIgE 及SPT 的結果對比，發現該設門思路的BAT 較sIgE 法而言在敏感度、假陰性率及陽性預測值方面均占有優勢。再如劉欣躍等［52］采用該設門思路的BAT 研究診斷藥物過敏時得出相同的結論，進一步證實該設門思路的可行性。該設門思路的優勢具體表現為：一方面利用CD203c 聯合CD45 對嗜堿性粒細胞進行分離較IgE 設門法而言效果更好，很好地避免了IgE非特異地黏附于血液中的單核細胞、B細胞等導致的誤差；另一方面利用CD63 和CD203 聯合設門對活化的嗜堿性粒細胞進行篩選可有效提高篩選的精確性。然而實踐工作中有待對不同設門思路進行對照研究來進一步對BAT的設門進行規范。

3 BAT在過敏性疾病診斷中的應用

BAT 作為一種安全高效的輔助診斷過敏性疾病的方法，已被學術界廣泛認可。國外已有關于BAT 用于診斷花粉、屋塵螨、藥物、食物等過敏反應的報道。有學者研究發現CD203c 不僅在診斷人體對昆蟲毒液過敏時的敏感性高，而且與進行毒液脫敏治療時副作用的發生風險相關［53］。因此可通過檢測CD203c 的表達來評估毒液脫敏治療過程中副作用的發生風險。此外有研究報道哮喘患兒嗜堿性粒細胞CD63、CD203c 水平雖與病情的嚴重程度無關，但與患兒的哮喘急性發作次數呈正相關，即隨著CD63、CD203c 的表達量上調，其發病次數增多［54］。因此可通過檢測哮喘患兒治療前后嗜堿性粒細胞表面CD63、CD203c 的表達水平來評估哮喘的治療效果，及時采取措施預防哮喘的急性發生。由此可見BAT 不僅可用于輔助診斷過敏性疾病，而且還可以通過評估嗜堿性粒細胞的過敏原閾值來監測免疫治療過程中副反應發生的風險，指導臨床的預防工作。

關于藥物誘導的過敏反應，有學者通過研究藥物誘發的急性間質性腎炎（acute interstitial nephritis，AIN），認為BAT 可用于輔助診斷藥物超敏反應引起的AIN，且認為當嗜堿性粒細胞的激活率＞5% 且刺激指數＞2 時，便可得到臨床證實［9］。因此BAT 有望成為臨床工作中及時對藥物過敏做出診斷的有效輔助工具。

此外國外學者對日光性蕁麻疹的研究表明，嗜堿性粒細胞在血清光過敏原刺激下通過IgE 介導的途徑發生活化，并提出BAT 有望成為檢測血清光致敏原的新方法，但需要對更多的日光性蕁麻疹患者進行研究［55］。可見BAT 在診斷不同過敏性疾病方面有廣闊的應用空間，有待進一步探索。

4 BAT的局限與展望

4.1 BAT 的局限 目前雖有關于BAT 輔助過敏性疾病診斷的研究報道，但尚未建立公認的標準化檢測方案。具體從以下4 點來闡明：①關于標本的保存條件、保存時間范圍尚沒有統一標準，關于不同保存條件對實驗結果的影響以及最佳的保存條件仍需進一步研究；②關于樣本的處理，全血法可能會有血清成分的干擾，嗜堿性粒細胞分離法可能會使體外激活而導致假陽性；③關于BAT 檢測指標的選擇標準仍需進一步探索，如何根據不同的條件選擇合適的設門指標仍有待研究；④關于檢測結果假陰性及假陽性的尚未有統一的處理標準。

4.2 BAT的展望 BAT較體內試驗而言更安全、高效、特異，較體外試驗如特異性IgE 檢測而言避免了交叉反應的影響，更加特異、精確，再如較嗜堿性粒細胞組胺釋放試驗而言避免了組胺來源多樣性的干擾，更具特異性、更易操作。BAT 彌補了目前過敏性疾病體內和體外試驗室診斷方法的不足，有助于更加全面的認識過敏性疾病。綜上所述，相信進一步標準化后的BAT 將因其安全有效的特點得到普及，成為未來IgE 介導的Ⅰ型超敏反應的首選診斷方法，為無數過敏性疾病患者帶來福音。