液相色譜在食品檢測中的運(yùn)用研究

◎ 龍四紅，黃家?guī)X

（貴州省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測院，貴州 貴陽 550014）

液相色譜法是指一種以液體為流動相的色譜檢測方法。此方法能夠從被檢測物中有效分離出檢測目標(biāo)，以達(dá)到準(zhǔn)確測定檢測目標(biāo)含量的效果，因此，為持續(xù)推進(jìn)食品安全建設(shè)，人們將此液相色譜法應(yīng)用到食品檢測領(lǐng)域，以期實(shí)現(xiàn)對食品質(zhì)量的嚴(yán)謹(jǐn)把關(guān)，推動食品產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展。

1 在食品營養(yǎng)成分檢測中的應(yīng)用

1.1 水飛薊賓含量檢測

水飛薊賓是一種能夠改善肝功能效用的營養(yǎng)成分，可以從植物的果實(shí)中提取，其被人體吸收后，能夠?qū)Ω渭?xì)胞膜產(chǎn)生明顯的保護(hù)和穩(wěn)定作用，因此，水飛薊賓逐漸成為保健食品中一項(xiàng)重要的營養(yǎng)成分，其含量也在很大程度上決定了保健食品的質(zhì)量。為此，人們需借助液相色譜法可將檢測目標(biāo)物質(zhì)分離的能力，對保健食品中的水飛薊賓含量進(jìn)行檢測，由此評估保健食品的質(zhì)量和價(jià)值，為保健食品領(lǐng)域的高質(zhì)量發(fā)展奠定基礎(chǔ)[1]。在液相色譜法的應(yīng)用中，采用甲醇、超聲波，對樣品進(jìn)行預(yù)處理，去除一部分水飛薊賓以外的其他物質(zhì)。將經(jīng)過預(yù)處理的樣品放入液相色譜儀進(jìn)行檢測，并選用C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱，由此得出各項(xiàng)基礎(chǔ)數(shù)據(jù)參數(shù)。按照水飛薊賓含量計(jì)算公式，得出食品中的水飛薊賓含量，完成液相色譜法的應(yīng)用。

1.2 核苷酸含量檢測

核苷酸是一種含氮的營養(yǎng)成分，是母乳中的重要營養(yǎng)成分，也是支持嬰兒成長的必需營養(yǎng)成分。一般情況下，核苷酸的存在狀態(tài)為游離態(tài)，含量范圍通常為5～8 mg/100 mL，當(dāng)嬰幼兒配方奶粉中核苷酸含量達(dá)到其范圍量時，其營養(yǎng)供給能力才能接近母乳喂養(yǎng)。為此，需對市場上的嬰兒奶粉進(jìn)行核苷酸含量檢測，以評估其在功能上是否達(dá)到合格水平。

液相色譜-紫外線檢測法作為高效、準(zhǔn)確的核苷酸檢測方法之一，人們通過將液相色譜法與紫外線檢測法聯(lián)合應(yīng)用，對奶粉產(chǎn)品質(zhì)量嚴(yán)格把關(guān)，為乳制品領(lǐng)域的發(fā)展提供助力。在液相色譜法的應(yīng)用中，需先用硫酸溶液作為清洗劑，去除液相色譜設(shè)備管路、系統(tǒng)中的污垢，再用硝酸對設(shè)備進(jìn)行鈍化處理，由此保證設(shè)備的靈敏度[2]。將經(jīng)過預(yù)處理的樣品，放入配有紫外線檢測裝置的液相色譜檢測設(shè)備中，得出檢測參數(shù)，按照現(xiàn)行的公式進(jìn)行計(jì)算，即可得出核苷酸的含量，實(shí)現(xiàn)液相色譜法的應(yīng)用。

1.3 維生素含量檢測

維生素作為各類食品中的重要營養(yǎng)物質(zhì)，能維持人體健康。因此，維生素含量迅速成為評定食品質(zhì)量的一個重要指標(biāo)。目前，應(yīng)用液相色譜法對維生素B1、B2含量進(jìn)行檢測時，維生素B1、B2能被有效地從樣品中分離。同時，液相色譜法的自動化水平較高，所需的人工干預(yù)較小，可提高含量檢測的準(zhǔn)確性，優(yōu)化檢測工作效率。在液相色譜法應(yīng)用中，先對樣本進(jìn)行預(yù)處理，送入專業(yè)設(shè)備后進(jìn)行檢測，聯(lián)機(jī)計(jì)算分析，由此得出維生素的含量。其中，在液相色譜設(shè)備操作上，需選用色譜柱uBondpak C18，將流動相設(shè)置為甲醇∶水=40∶60（V/V）、流速設(shè)置為 0.8 mL·min-1，同時加入熒光劑，以輔助檢測，提高檢測效果。

2 在食品添加劑檢測中的應(yīng)用

2.1 辣椒素含量檢測

辣椒素是一種調(diào)味品食品添加劑，常見于休閑食品中，其本身具有一定的刺激性，會使人的口腔產(chǎn)生灼燒感。因此，為避免過量添加引起的不良反應(yīng)，人們將辣椒素含量作為一項(xiàng)重要的添加劑檢測項(xiàng)目，以更好地評估食品的風(fēng)味和質(zhì)量。液相色譜法能夠?qū)崿F(xiàn)對辣椒素的有效分離和檢測，且運(yùn)行自動化水平較高，因此，人們常采用液相色譜法檢測食品中辣椒素的含量。在液相色譜法的應(yīng)用中，選用 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），或其他等效色譜柱，同時，將流動相設(shè)置為體積比為65∶35的甲醇溶液，流速設(shè)置為1 mL·min-1，溫度設(shè)置為30 ℃。在此過程中，標(biāo)準(zhǔn)品辣椒堿純度大于95%，二氫辣椒堿純度大于90%，以標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行樣品的峰面積定量，由此計(jì)算出檢測結(jié)果。

2.2 甜蜜素含量檢測

甜蜜素是一種用于增加食品甜味的添加劑，其甜度可達(dá)蔗糖的30～40倍，被廣泛應(yīng)用于各類的食品加工中，當(dāng)攝入過量時，會對精神系統(tǒng)和肝臟系統(tǒng)造成損害。因此，甜蜜素一直是食品安全檢測中的一個重要項(xiàng)目。液相色譜法是檢測甜蜜素最常用的方法，可高效地將甜蜜素從樣品中分離。在應(yīng)用液相色譜法檢測甜蜜素過程中，對樣品進(jìn)行預(yù)處理時注意，對于固體樣品，盡量將其粉碎，否則會影響甜蜜素的提取，導(dǎo)致最終測得的含量結(jié)果偏低。②將預(yù)處理好的樣品送入色譜儀中，并選用C18色譜柱，（4.6 mm×250 mm，5 μm）、流動相乙腈∶水=80∶20，進(jìn)行液相色譜法檢測。③運(yùn)用檢測結(jié)果進(jìn)行聯(lián)機(jī)計(jì)算，得出甜蜜素的含量。若樣品中含有多糖、蛋白質(zhì)等有機(jī)化合物，可能出現(xiàn)有機(jī)化合物凝結(jié)成膠狀的情況，導(dǎo)致甜蜜素的提取受到干擾，此時，應(yīng)要適當(dāng)增加稀釋倍數(shù)，或用超聲震蕩法進(jìn)行處理，以消除膠狀凝結(jié)問題，提高液相色譜法的應(yīng)用效果。

2.3 富馬酸含量檢測

富馬酸是一種用于調(diào)節(jié)食品酸度的添加劑，具有一定的防腐功能，可在一定程度上延長粉末狀食品的保存期限，但有輕微的刺激性，過度添加不僅會影響風(fēng)味，人們食用添加富馬酸過量的食品后，可能使人體產(chǎn)生不良反應(yīng)。因此，在食品添加劑檢測中，富馬酸也是一項(xiàng)重要的檢測內(nèi)容。現(xiàn)階段，在富馬酸的檢測中，人們通常采用液相色譜法，將富馬酸從樣品中分離，再用紫外線檢測法，對富馬酸進(jìn)行定量檢測，通過計(jì)算得出富馬酸的含量。采用液相色譜法檢測富馬酸含量時，需使用配有紫外線檢測器的色譜儀，選用C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）的色譜柱，并將流速控制在0.1～10 mL·min-1。在預(yù)處理過程中，需采用超聲震蕩對樣品進(jìn)行脫氣處理，以免樣品液體中產(chǎn)生氣泡，影響測定結(jié)果[3]。

3 在食品污染物檢測中的應(yīng)用

3.1 麻痹性貝毒檢測

現(xiàn)階段，隨著人類海上活動規(guī)模的不斷擴(kuò)大，海洋污染、富營養(yǎng)化問題不斷加劇。在此過程中，海洋的富營養(yǎng)化，使赤潮中的有毒藻類數(shù)量迅速增加，這些有毒藻類中所含的毒素將通過食物鏈進(jìn)入、累積在貝類海鮮體內(nèi)，導(dǎo)致貝類海鮮中帶有麻痹性貝毒，這種污染物在毒理上類似河豚毒素，會毒害人類的神經(jīng)系統(tǒng)，嚴(yán)重時會直接導(dǎo)致食用者死亡。因此，在污染物檢測中，此項(xiàng)毒素已成為檢測工作的要點(diǎn)。在此背景下，人們探索出一種可靠的毒素含量檢測法，即液相色譜柱后氧化法，它取代了傳統(tǒng)的小白鼠法，使毒素檢測結(jié)果更加精準(zhǔn)。采用液相色譜法對麻痹性貝毒進(jìn)行檢測時，可直接在分子水平上對樣品中的毒素進(jìn)行分離與定量檢測，由此得出精度較高的檢測結(jié)果。根據(jù)檢測結(jié)果評定被檢測的貝類是否能夠正常食用。就目前來看，在液相色譜法的應(yīng)用下，毒素檢測效率得到了顯著的提高。與傳統(tǒng)方法相比，節(jié)省了50%的成本，深入優(yōu)化了食品安全建設(shè)水平[4]。

3.2 PAHs檢測

PAHs，即多環(huán)芳香烴，是一種常見于海鮮產(chǎn)品的污染物，主要由海運(yùn)過程中的漏油問題造成，會對食用者帶來潛在的健康風(fēng)險(xiǎn)，目前，此類污染物已被一些國家確定為重點(diǎn)污染物。由于液相色譜法的檢測周期較短，能夠滿足海鮮類食品的保鮮需求，因此，在PAHs的檢測中，液相色譜法的應(yīng)用較為廣泛。采用液相色譜法測定PAHs時，需選用色譜柱PAH （4.6 mm×50 mm，3 μm），將進(jìn)樣量設(shè)置為10 μL，溫度設(shè)置為35 ℃，結(jié)合專業(yè)的Empower軟件，進(jìn)行聯(lián)機(jī)觀測和計(jì)算，即可得出污染物的含量。一般來說，每次檢測僅需4 min即可得到檢測結(jié)果。在檢測過程中，要做好熒光標(biāo)定工作，以明確檢測目標(biāo)物質(zhì)，提高液相色譜法的應(yīng)用效果。此外，在使用儀器前，做好調(diào)試工作，并嚴(yán)格按照現(xiàn)行的技術(shù)規(guī)程進(jìn)行操作，以保證檢測結(jié)果的可靠性，優(yōu)化液相色譜法應(yīng)用水平[5]。

3.3 霉菌毒素檢測

食品中所含有的霉菌毒素包括黃曲霉、大腸桿菌等多種類型，一旦含量超標(biāo)，會為食用者帶來健康風(fēng)險(xiǎn)。因此，在食品檢測中，需對霉菌毒素的含量進(jìn)行檢測，以評估食品質(zhì)量是否合格。在此過程中，鑒于液相色譜法的種種優(yōu)勢，人們通常會用此方法對食品中霉菌毒素含量進(jìn)行檢測。采用液相色譜法檢測食品中霉菌毒素含量時，需根據(jù)所檢測食品的特質(zhì)，選用相應(yīng)的液相色譜法應(yīng)用方案，以保證此檢測方法的應(yīng)用效果。考慮到液相色譜法的應(yīng)用優(yōu)勢主要集中在物質(zhì)分離上，因此，在實(shí)際的液相色譜法應(yīng)用中，人們更傾向于將此方法與一些在定量檢測方面存在優(yōu)勢的方法進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用，由此提高檢測結(jié)果的精度，優(yōu)化食品檢測工作水平。此外，在此方法的應(yīng)用中，也可從樣品預(yù)處理上入手，通過改善預(yù)處理中存在的檢測結(jié)果影響因素，以增強(qiáng)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，保證液相色譜法的應(yīng)用效果。

4 結(jié)語

增強(qiáng)液相色譜法的應(yīng)用效果，有助于食品安全檢測水平的提升。在食品檢測中，通過科學(xué)運(yùn)用液相色譜法開展檢測工作，可以強(qiáng)化食品質(zhì)量、控制添加劑與污染物含量，從而更好地發(fā)揮食品檢測結(jié)果效能，促進(jìn)食品產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)優(yōu)化發(fā)展。