GB 5009.27—2016檢測食品中 苯并（a）芘時注意事項

◎ 崔瑞霞，賽 平

（河南中測技術檢測服務有限公司，河南 鄭州 450000）

《食品安全國家標準 食品中苯并（a）芘的測定》（GB 5009.27—2016）[1]是國家市場監督管理總局發布的強制標準，基本涵蓋所有可能含有苯并（a）芘食品類別，是食品檢測中常用的檢測標準。近年來，隨著人們生活水平的提高，食品安全也被更多的人關注和重視，其中食品中苯并（a）芘也被列入每年的國家食品抽檢項目中。該標準雖然前處理簡單，但會出現試劑空白中檢出苯并（a）芘、平行樣相對偏差大、回收率低等現象，并且存在一定安全隱患。基于此，結合前處理操作過程中需要注意的問題做以下總結。

1 安全防護

苯并（a）芘是一種多環芳香烴類化合物[2]，對人體具有強致癌性、致畸性、致突變性等危害[3-13]。苯并（a）芘的測定一定要在通風櫥中操作，帶上口罩和手套，盡量減少暴露，同時全部采樣器具均應使用玻璃制品，避免與塑料或橡膠接觸。檢測過程中，部分步驟必須更換手套以防交叉污染，對從事實驗過程的整個區域桌面和器具進行有效清理。如已污染了皮膚，應采用10%次氯酸鈉水溶液浸泡和洗刷，在紫外光下觀察皮膚上有無藍紫色斑點，直到藍色斑點消失為止。

2 材料

該標準中有2種凈化方法，即中性氧化鋁柱凈化法和分子印跡柱法凈化法，其中中性氧化鋁柱需儲存在避光干燥的環境中，否則空氣中水分會影響中性氧化鋁柱的性能，從而直接影響苯并（a）芘的加標回收率。苯并（a）芘分子印跡柱凈化法不同廠家的質量差距較大，每次使用苯并（a）芘分子印跡柱前處理時一定要做全程質控加標回收，確定回收率達到要求才能作為檢測使用。

3 試劑

樣品前處理過程中，會用到水、甲苯、正己烷、二氯甲烷和乙腈，從多次試驗中發現，甲苯、正己烷、二氯甲烷、乙腈一定要用色譜純試劑，并且需做全程試劑空白試驗，扣除試劑空白以確保試驗數據的準確性。

4 標準溶液

標準溶液是對樣品中的目標物定性定量的重要參考物，標準溶液的采購、保存、溶劑和配制過程也是保證實驗結果準確非常重要的因素。①采購正規的、能夠附有被認可的證書的標準溶液或標準品（純度≥99%），并且避光保存在0～5 ℃的冰箱中。②標準溶液的溶劑是色譜純乙腈，要用能準確定量的移液槍逐級稀釋標準溶液。③在配制和逐級稀釋標準溶液過程用到的槍頭、容量瓶和吸量管需要先用干凈的色譜純乙腈潤洗至少2遍，在配制和逐級稀釋標準溶液過程中需注意需先加入少量乙腈至容量瓶，再加入標準品或標準溶液，最后用乙腈定容。④標準溶液應臨用現配。標準溶液放置一段時間后濃度會有所改變，每次用之前應與之前的、同樣濃度的標準溶液圖譜進行比較，檢查其同樣濃度的標準溶液峰面積是否有較大的變化，若變化較大應重新采購新的標準溶液或標準物質重新配制。

5 樣品制備

樣品制備是樣品預處理中至關重要的步驟，對后續樣品提取和凈化起到基石性的作用。一定要取可食用部分，去除雜質，固體樣品要打碎均勻或絞碎均勻，保存在樣品瓶中，注意樣品編號、檢測狀態和保存溫度，待稱取用。

6 天平

標準要求使用是千分之一電子天平，先檢查其是否水平，再開機提前預熱30 min以上。天平室環境溫濕度要特別注意，濕度需控制在80%以下，溫度控制在 25 ℃左右。前處理過程中用到的玻璃儀器一定要用記號筆做好標記，離心管無污染且刻度清晰，一次性吸管要完全干燥。稱取樣品前檢查樣品，充分混勻樣品，盡可能減少樣品間不均勻性。樣品直接稱取至50 mL離心管中，盡量不要粘在離心管壁上，稱量結束后按要求及時填寫天平的使用記錄，稱重數據直接寫在原始記錄上。

7 提取

正己烷特別容易揮發，稱取好樣品的離心管加入正己烷后需盡快擰緊離心管蓋。每次加入5 mL正己烷，先渦旋混合0.5 min，再在40 ℃水的超聲波中超聲提取10 min，此過程中注意控制溫度不超過40 ℃。4 000 r·min-1離心5 min，用一次性移液管轉移出上清 液，至少提取2次，合并正己烷提取液待凈化。

8 凈化

日常工作中用苯并（a）芘分子印跡柱，在正式投入使用前要進行驗收，確保為合格品。先加二氯甲烷再加正己烷逐次活化柱子，加二氯甲烷的目的是去除固相萃取柱中的殘留物，且需注意一定要使用色譜純的二氯甲烷不能用分析純二氯甲烷。收集凈化液再在水浴溫度40 ℃氮吹蒸發吹干，切記在氮吹前一定要用酒精棉擦洗氮吹管，且氮吹管不得離凈化液面過近，以防污染樣品。

9 上機測定

色譜柱一定要按標準要求用C18柱（4.6 mm× 250 mm，5 μm）或性能相當者。選用合適的色譜柱，柱子過短易造成分離不開、假陽性等問題，流動相用到的乙腈一定是色譜純，水一定要用GB/T 6682—2008[14]規定的一級水。熒光檢測器先預熱，最好是檢測器燈打開，基線平穩至少30 min后再采集進樣。

10 原始記錄

原始記錄必須做到真正原始，一定要能反映現場狀態的全部信息，應及時、準確、完整、客觀，具備重現性。①數字修約應符合GB/T 8170—2008[14]數值修約規則與極限數值的表示和判定。②計算按照標準要求結果保留小數點后一位。③記錄如需更改要按照《法定計量檢定機構考核規范》（JJF 1069—2012）[15]中的要求，在改動的內容處劃杠改加簽名。④原始記錄要三級審核簽名，以確認相關信息和數據準確無誤。

11 其他注意事項

①化驗室新購買的試劑應先做試劑空白，確定試劑是否符合要求。②移液槍使用后應調到最大刻度并放到移液槍專用架子上。③當檢測結果在標準規定的臨界值附近或離散數據容易造成誤判時或檢測過程中發生異常情況（如環境變化、儀器故障、停電、停水等）有可能會影響檢測結果時需要進行復測。