可選擇性的讓甘氨酸和D-丙氨酸從肽N末端游離的曲菌肽酶

楠木憲一

有報告說革蘭氏陰性菌Ochrobacterium anthropi的D-氨基酸特異性氨肽酶（D-stereospecific aminopeptidase，DAP），會從基質開始以極為特異的方式讓N末端的D-丙氨酸游離。幾乎找不到有關真核生物的D-氨基酸的特異性氨肽酶的相關報告，但研究人員還是從曲菌基因中抽取到的氨基酸氨肽酶中，發現了與上述DAP相同的基因。

與O.Anthropi的DAP有相同性的DNA領域在某種絲狀菌的基因中找到了，考慮到該基因的特異性，將其命名為甘氨酸-D-丙氨酸氨基肽酶（glycine-D-Alanine aminopeptidase，gdaA）。gdaA與O.Anthropi的DAP在氨基酸排列上的有43%是相同的，即讓gdaA基因過量表達并使其積蓄在曲菌細胞內。曾用最少瓊脂培養基和全瓊脂培養基培養gdaA基因高表達株、該菌破壞株以及對照株，并未發現它們在繁殖以及孢子形成上的差別，由此認為gdaA基因并非曲菌繁殖所必需的基因。另外，用液體全培養基培養基因破壞株和對照株，從回收的菌體中調制無細胞的提取液，檢測其氨基肽酶活性，結果顯示對照株隨著培養時間的延長其比活性增長，而gdaA基因破壞株的分解活性卻始終處于低水，據此可認為gdaA是曲菌細胞內使甘氨酸和D-丙氨酸游離，即氨基肽酶活性的主要酶。