血清COMP、血漿ADAMTS13與維持性血液透析患者血管鈣化的相關性分析

楊靜，張悅，劉秋艷

（河南省直第三人民醫院腎內科，河南 鄭州 450007）

維持性血液透析（MHD）是目前臨床治療終末期腎臟病的常用手段，雖能有效控制疾病進展，但同時可導致患者出現各種并發癥，其中血管鈣化是MHD治療過程中的嚴重并發癥之一，也是導致患者心血管死亡的重要因素[1-2]。因此，如何診斷以及預防MHD發生血管鈣化對于改善患者預后十分重要。軟骨寡聚基質蛋白（COMP）已被應用于骨關節炎（OA）的療效判斷及預后等研究中[3-4]，但最新研究發現，COMP在心血管疾病的發生、發展中具有重要作用[5]。血管性血友病因子裂解酶（ADA MTS13）一種調控vWF結構與功能的的金屬蛋白酶，具有抑制血小板黏附、聚集及微血管性血栓形成等作用[6]。目前國內關于血清COMP、ADAMTS13與血管鈣化的相關性的研究較少。本研究擬分析血清COMP、血漿ADAMTS13與MHD患者血管鈣化的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2017年12月至2020年12月在我院進行維持性血液透析的120例患者作為研究對象。男性65例，女性55例；年齡25～80歲，平均（55.36±3.65）歲；原發疾病：慢性腎小球腎炎39例，高血壓腎小動脈硬化28例，糖尿病腎病25例，系統性血管炎12例，紫癜性腎炎6例，其他10例。納入標準：⑴血液性透析治療且規律透析≥3個月；⑵患者/家屬簽署知情同意書。排除標準：⑴透析時間＜3個月；⑵合并原發性甲狀旁腺或惡性腫瘤者；⑶3個月內進行較大手術者；⑷近期使用激素或免疫抑制劑藥物者；⑸伴有癲癇發作者；⑹中途退出者。本次研究已獲得我醫學倫理委員會的批準。

1.2 方法 ⑴收集臨床資料：包括年齡、性別、透析時間、體質指數（BMI）、吸煙史、高血壓、糖尿病、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、堿性磷酸酶、血鈣、血磷、鈣磷乘積、全段甲狀旁腺素（iPTH）等。⑵血管鈣化評估：采用胸部和腹部計算機斷層掃描檢測MHD患者血管鈣化（包括胸主動脈、腹主動脈和冠狀動脈鈣化）情況，隨后由經驗豐富的、固定的影像科醫生和腎內科醫生根據動脈存在的鈣化或斑塊共同判定患者是否存在血管鈣化,并將本研究患者分為血管鈣化組68例、無血管鈣化組52例。⑶COMP、ADAMTS13與生化指標檢測：所有患者入院后抽取兩份清晨空腹外周靜脈血，一份5 ml不抗凝，室溫3000 r/min離心10 min，取上清液存放至-80℃冰箱內保存。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測血清COMP水平；采用日本日立公司生產的全自動生化分析儀（HITACHI 7600-110）檢測患者TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALB、堿性磷酸酶、血鈣、血磷、鈣磷乘積水平，iPTH采用全自動電化學發光免疫分析儀測定（E601，Roche公司，瑞士）。另一份3 ml至枸櫞酸鈉抗凝離心管，充分顛倒混勻后1 h內以3000 r/min離心10 min，取上層血漿置于-80℃低溫冰箱保存。采用ELISA檢測血漿ADAMTS13水平，試劑盒均由武漢華美生物有限公司公司提供，具體步驟嚴格按說明書進行操作。

1.3 統計學方法 采用SPSS 23.0軟件進行數據分析。正態分布計量資料以（±s）表示，兩組比較采用t檢驗；計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析；采用受試者工作特性曲線（ROC）分析血清COMP、血漿ADAMTS13對MHD發生血管鈣化的診斷價值，多因素Logistic回歸分析MHD患者發生血管鈣化相關因素；P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料與生化指標比較 血管鈣化組年齡、透析時間、糖尿病、高血壓及鈣磷乘積、iPTH、COMP水平均明顯高于無血管鈣化組，血鈣、ADAMTS13水平低于無血管鈣化組（P<0.05），見表1。

表1 兩組一般資料與生化指標比較

2.2 MHD患者血清COMP、血漿ADAMTS13水平與各指標相關性分析COMP水平與透析時間、年齡、iPTH、鈣磷乘積均呈正相關，與血鈣呈負相關（P<0.05）；ADAMTS13水平與透析時間、年齡、iPTH、鈣磷乘積均呈負相關，與血鈣呈正相關（P<0.05），見表2。

表2 MHD患者血清COMP、血漿ADAMTS13水平與各指標相關性

2.3 COMP、ADAMTS13對MHD發生血管鈣化的預測 經ROC曲線結果顯示：COMP曲線下面積、敏感度、特異度分別為0.792、85.3%、80.6%；ADAMTS13曲線下面積、敏感度、特異度分別為0.810、82.4%、79.2%。且COMP、ADAMTS13曲線下面積、敏感度、特異度均高于iPTH、鈣磷乘積指標，見表3。

表3 COMP、ADAMTS13對MHD發生血管鈣化的預測

2.4 MHD發生血管鈣化影響因素多因素Logistic回歸分析 本研究以COMP、ADAMTS13、iPTH、鈣磷乘積為自變量，以有無血管鈣化為因變量（無=0、有=1），經Logistic回歸分析得出，COMP、ADAMTS13、iPTH、鈣磷乘積均為影響MHD發生血管鈣化的相關因素，見表4。

表4 MHD發生血管鈣化影響因素多因素Logistic回歸分析

3 討論

維持性血液透析（MHD）是治療終末期腎臟病的常用方式，但治療過程中由于容易出現血管鈣化，而血管鈣化能夠引起患者出現心血管事件（心肌缺血、心力衰竭等），嚴重時導致患者死亡[7-8]。因此，早期診斷并預防MHD發生血管鈣化至關重要[9]。

本研究結果顯示，血管鈣化組COMP水平高于無血管鈣化組，ADAMTS13水平低于無血管鈣化組（P<0.05），表明COMP、ADAMTS13與血管鈣化的發生發展存在密切關系。相關性分析顯示：COMP與iPTH、鈣磷乘積均呈正相關，與血鈣呈負相關；ADAMTS13與iPTH、鈣磷乘積均呈負相關，與血鈣呈正相關（P<0.05）,提示COMP、ADAMTS13可能是影響MHD患者血鈣、iPTH和鈣磷乘積的重要因素。ROC曲線結果顯示：COMP、ADAMTS13曲線下面積、敏感度、特異度均高于iPTH、鈣磷乘積指標，由此可見COMP、ADAMTS13對預測MHD發生血管鈣化具有更高的價值。Logistic回歸分析得出，COMP、ADAMTS13均是影響MHD發生血管鈣化的相關因素。上述結果綜合表明，血清COMP、血漿ADAMTS13二者有望作為臨床預測、診斷維持性血液透析患者血管鈣化的有效生物標志物。

COMP是一種由血小板反應家族的軟骨細胞合成分泌的組織特異性基質蛋白，能夠被血管平滑肌細胞合成，并且在血管鈣化及脂質沉積為斑塊的過程發揮重要作用[10]。而血管鈣化是由于血管內皮細胞、平滑肌細胞轉化為類成骨/軟骨細胞，進而分泌有機質并伴隨鈣磷沉積等因素導致。COMP水平升高時，伴隨平滑肌細胞遷移轉化，血管內膜發生增生及中膜鈣化[11]。ADAMTS13是一種含I型血小板結合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶家族第13位成員，主要是由肝星狀細胞和血管內皮細胞分泌與合成，不僅能夠抑制炎癥反應，還能通過上調血管內皮細胞表達而誘導血管生成[12-13]。ADAMTS13上調能夠參與細胞外基質蛋白的清除，限制其過渡沉積，防止內膜纖維化[14]。ADAMTS13下調時，能夠促進慢性腎臟病炎癥反應與血管內皮細胞損傷，抑制細胞外基質蛋白清除，促進血管纖維化，導致患者發生血管鈣化。當然，本研究也存在一定局限性，⑴由于條件限制，本研究只有一次“入院后”采集血樣檢測，并沒有做治療前和治療后的比較；⑵不同患者透析時間（年）有長有短，患者相關指標數據在不同時間段有可能不一樣，本研究并未觀察相關指標的變化；上述問題有待下一步細化分析。

綜上所述，MHD血管鈣化患者血清COMP水平升高，血漿ADAMTS13水平降低，二者均是MHD患者發生血管鈣化的相關因素，有望用作MHD患者發生血管鈣化的預測生物標志物。