血清Omentin-1和Lp-PLA2水平檢測在川崎病中的應用價值

劉 懿，陳偉芝，邵亞望

(1.西安交通大學第一附屬醫院檢驗科，陜西 西安710061；2.西安交通大學附屬紅會醫院檢驗科，陜西 西安 710054；3.陜西省咸陽市第一人民醫院兒科，陜西 咸陽 712000)

川崎病(Kawasaki disease,KD)是一種與冠狀動脈血管炎相關的兒童炎癥性疾病，是發達國家兒童獲得性心臟病的最常見病因。目前KD的病因尚不清楚[1]。研究表明KD可能并發動脈瘤、冠狀動脈血栓形成以及心肌梗死等[2]，早期診斷和治療可以改善預后。網膜素1(Omentin-1)是一種脂源性細胞因子，可能參與炎癥反應、冠狀動脈粥樣硬化、血管損傷等疾病的病理過程[3]。脂蛋白相關磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)作為一種血管炎性標志物,與動脈粥樣硬化性心血管疾病的發生發展密切相關[4]。本研究通過分析KD患兒血清Omentin-1和Lp-PLA2水平的變化,旨在探討Omentin-1和Lp-PLA2與KD患兒冠狀動脈損傷的相關性,為KD臨床診治提供理論依據。報告如下。

1 資 料 與 方 法

1.1一般資料 選擇2012年1月—2020年1月西安交通大學附屬第一醫院收治的KD患兒93例，依據超聲心動圖結果分為冠狀動脈正常(normal coronary artery,NCA)組54例和冠狀動脈病變(coronary artery disease,CAD)組39例。KD診斷標準符合美國心臟病協會2004年提出的川崎病診斷標準[5]。冠狀動脈擴張診斷標準參照2012年川崎病并發冠狀動脈病變的臨床處理建議[6]。CAD組年齡<3歲患兒,冠狀動脈內徑≥2.5 mm;年齡3～9歲患兒,冠狀動脈內徑≥3.0 mm;年齡>9歲患兒,冠狀動脈內徑≥3.5 mm。NCA組年齡<3歲患兒,冠狀動脈內徑<2.5 mm；年齡3～9歲患兒,冠狀動脈內徑<3.0 mm；年齡>9歲患兒,冠狀動脈內徑<3.5 mm。CAD組包括冠狀動脈小瘤患者(冠狀動脈內徑≤4 mm)30例,冠狀動脈中瘤患者(冠狀動脈內徑>4～8 mm)5例和巨大冠狀動脈瘤患者(冠狀動脈內徑>8 mm)4例。排除標準：傳染性單核細胞增多癥、膿毒血癥、猩紅熱、Steven-Johnson綜合征、伴有典型的心血管并發癥者。另選取同期體檢30名健康者作為對照組。3組性別、年齡、體重指數差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

本研究經西安交通大學附屬第一醫院、西安交通大學附屬紅會醫院及咸陽市第一人民醫院醫學倫理委員會批準通過,所有研究對象監護人知情同意并簽署知情同意書。

表1 3組一般資料比較 Table 1 Comparison of general data among three groups

1.2儀器與試劑 Omentin-1試劑盒購自美國 GBD公司。Lp-PLA2試劑盒購于天津康爾克生物科技有限公司。酶標儀購自荷蘭雷勃公司。采用 GE ViVid E9 Dimension型彩色多普勒超聲儀進行超聲檢查,M5S探頭(頻率2.0～4.5 MHz),12S探頭(頻率4.5～12.0 MHz),4V探頭(頻率2.5～3.6 MHz)。

1.3方法

1.3.1Omentin-1和Lp-PLA2水平檢測 所有受試者抽取空腹靜脈血5 mL,以3 000 r/min離心10 min,分離血清,于-20 ℃保存備用，采用酶聯免疫吸附法檢測Omentin-1和Lp-PLA2水平。

1.3.2心臟彩色超聲檢查[7]所有受試者常規行超聲心動圖檢查。患兒處于睡眠或安靜狀態,取左側臥位,常規在劍突下、心尖、胸骨旁、胸骨上窩探查心臟各標準切面。于胸骨旁大動脈短軸切面略向下傾斜探頭,使之清晰顯示左側冠狀動脈主干及其分支近端,測量舒張期左側冠狀動脈主干(left main coronary artery,LMCA) 內徑、左前降支(left anterior descending coronary artery,LADC) 內徑及右側冠狀動脈近段(proximal right coronary artery,PRCA)內徑。發現冠狀動脈瘤者測量瘤體內徑和長度(至少測量3次,取平均值),并注意瘤內有無血栓形成。

1.4統計學方法 應用SPSS 21.0統計軟件分析數據。計量資料比較采用獨立樣本的t檢驗、單因素方差分析和SNK-q檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson法；建立受試者工作特征曲線(ROC曲線)評價Omentin-1和Lp-PLA2對診斷KD和KD冠狀動脈損傷的預測價值。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.13組血清Omentin-1和Lp-PLA2水平比較 NCA組和CAD組Omentin-1水平低于對照組，Lp-PLA2水平高于對照組，CAD組Omentin-1水平低于NCA組，Lp-PLA2水平高于NCA組,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清Omentin-1和Lp-PLA2水平比較Table 2 Comparison of serum levels of omentin-1 and Lp-PLA2 among three groups

2.23組冠狀動脈內徑比較 CAD組LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑明顯高于NCA組和對照組,差異有統計學意義(P<0.05)；NCA組和對照組LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑差異無統計學意義(P>0.05)。見表3,圖1，2。不同年齡段CAD組LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表3 3組冠狀動脈內徑比較Table 3 Comparison of internal diameter of coronary artery among three groups

2.3相關性分析 相關性分析結果顯示，CAD組中Omentin-1與LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑呈負相關(r=-0.623,-0.627,-0.650,P均<0.01)。Lp-PLA2與LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑呈正相關(r=0.629,0.587,0.615,P均<0.01)。

2.4ROC曲線分析 以NCA組和CAD組為因變量分析顯示，血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷KD的AUC分別為[0.770(95%CI：0.635～0.905,P<0.001)，0.805(95%CI：0.685～0.926,P<0.001)]，敏感度和特異度分別為69.0%和93.7%，82.8%和81.2%(圖3)。以CAD組為因變量分析顯示,血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷KD冠狀動脈損傷的AUC分別為[0.748(95%CI：0.612～0.883,P<0.001)，0.756(95%CI：0.619～0.893，P<0.001)]，敏感度和特異度分別為58.6%和93.9%、69.0%和88.6%(圖4)。說明血清Omentin-1和Lp-PLA2水平對KD及KD冠狀動脈損傷的診斷有臨床意義。

表4 不同年齡段CAD組與對照組冠狀動脈內徑比較Table 4 Comparison of internal diameter of coronary artery between CAD group and control group at different ages

圖1 KD患兒左側冠狀動脈擴張

圖2 KD患兒左側、右側冠狀動脈巨大瘤樣擴張

圖3 血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷KD的ROC曲線

圖4 血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷冠狀動脈損傷的ROC曲線

3 討 論

研究顯示,KD的發生發展與機體的脂質代謝紊亂有關。脂肪組織可分泌多種具有生物活性的多種炎性細胞因子,促進KD患兒血管的炎癥反應過程[8]。Omentin是新近發現的一種脂肪因子,由313個氨基酸組成,相對分子質量為34 000,具有較強的親水性，表達于人體內臟的脂肪組織、內皮細胞、血管平滑肌細胞及血管內皮細胞中,其中脂肪組織及血清中含量較高。Omentin有2種亞型,包括Omentin-1和Omentin-2,血清中主要為Omentin-1。既往研究顯示，Omentin-1水平降低與心血管疾病、肥胖、糖尿病及腫瘤等疾病的發生和發展有關[9]。接受阿托伐他汀治療的急性冠狀動脈綜合征患者的炎癥反應明顯減輕,血清Omentin-1表達顯著增加[10]。研究發現，Omentin-1可能通過磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B通路調控泡沫巨噬細胞炎癥因子的釋放與凋亡[9]。Omentin-1水平降低能促進腫瘤壞死因子α等炎性因子的大量釋放，進而誘導血管炎癥反應的發生[11]。Omentin-1在KD中的作用已被證實,KD患兒血清Omentin-1水平明顯降低,表明Omentin-1與KD的發生有關,提示KD患兒可能存在嚴重的脂質代謝紊亂及炎癥反應。急性期KD患兒血清Omentin-1水平明顯低于亞急性期患兒,冠狀動脈損傷患兒血清Omentin-1水平明顯低于無冠狀動脈損傷患兒[11]。本研究結果與上述觀點相符。KD患兒早期可能合并冠狀動脈損傷或者冠狀動脈瘤[12]。本研究結果顯示，NCA組和CAD組Omentin-1水平低于對照組，CAD組Omentin-1水平低于NCA組。相關性分析結果顯示，血清Omentin-1水平與LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑呈負相關,推測該因子與KD的病情進展密切相關,且其水平越低,患兒發生冠狀動脈損傷的風險越高。

Lp-PLA2是新近發現的動脈粥樣硬化相關血管內皮損傷因子,人體血液循環中的Lp-PLA2能夠特異性水解內膜下低密度脂蛋白中的氧化磷脂,生成促炎物質氧化型游離脂肪酸和溶血卵磷脂[13],進而促進炎性反應的發生和細胞毒素的釋放,Lp-PLA2與血管炎性反應的發生有明顯相關性。研究表明,Lp-PLA2是心血管特異性的炎性標志物,可作為心血管事件的獨立預測因子[14]。目前Lp-PLA2已被應用于心血管疾病的診斷和治療。周嬿等[15]的研究發現,老年急性冠狀動脈綜合征患者血清Lp-PLA2水平顯著高于老年穩定型心絞痛患者,并且高危組患者的Lp-PLA2水平顯著高于中危組和低危組。胥玲等[16]對KD患兒的研究顯示，急性期血清Lp-PLA2水平明顯升高,而恢復期明顯降低。Lp-PLA2對KD急性期的診斷具有較高的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值。另外,KD患者血清Lp-PLA2水平明顯增高。冠狀動脈損傷KD患兒血液Lp-PLA2水平明顯高于無損傷者[4]。表明Lp-PLA2可能誘導KD的發生,并可能導致冠狀動脈損傷。本研究結果顯示,NCA組和CAD組Lp-PLA2水平高于對照組，CAD組Lp-PLA2水平高于NCA組。相關性分析結果顯示，Lp-PLA2水平與LMCA內徑、LADC內徑和PRCA內徑呈正相關。提示，Lp-PLA2可能參與KD的病理過程,其水平的增高可能反映了KD病情的嚴重程度。

通過ROC分析的結果顯示,Omentin-1和Lp-PLA2對KD及KD冠狀動脈損傷的診斷有較好的臨床意義,并且具有較高的敏感度和特異度。

綜上所述,血清Omentin-1和Lp-PLA2與KD的發生和發展有關,并可能參與KD患兒冠狀動脈損傷的病理過程。血清Omentin-1水平越低、Lp-PLA2水平越高,患兒并發冠狀動脈病變的風險越高。因此血清Omentin-1和Lp-PLA2可作為診斷KD及其并發冠狀動脈病變的可靠指標。