抗核抗體、類風濕抗體在老年人梅毒特異性抗體檢測中的影響

江云川 龔麗坤 高 衛 楊 婷 沈 藍 張 瑛

1 云南省楚雄州中醫醫院醫學檢驗科，云南省楚雄市 675000； 2 云南省滇南中心醫院急診醫學部； 3 云南省昭通市第一人民醫院醫學檢驗科

梅毒是嚴重影響人體健康的性傳播疾病，是由感染蒼白螺旋體(TP)誘發，可通過血液、母嬰、性接觸等途徑擴散，具有極大危害性,臨床可通過青霉素類藥物治療梅毒，部分患者可治愈[1]。目前，臨床使用較多的梅毒相關抗體檢測包括梅毒血漿快速反應素(RPR)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)、梅毒特異性抗體酶聯免疫吸附實驗(TP-ELISA)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)等實驗室方法，其中RPR和TRUST極易受到各種因素的影響出現假陽性所以必須聯合其他梅毒特異性抗體實驗才能診斷梅毒感染[2]。而梅毒特異性抗體酶聯免疫吸附實驗(TP-ELISA)是臨床上應用最多的梅毒特異性抗體檢測方法,有報道單純的TP-ELISA檢測的準確性有限，在一些情況下易出現假陽性[3]。相關研究發現自身抗體隨年齡增長陽性率逐漸升高，而老年人群梅毒發病率也居高不下，老年人自身抗體水平顯著高于其他人群或可影響梅毒抗體檢測，但臨床尚無系統的研究[4-5]。鑒于此，本研究探討抗核抗體(ANA)和類風濕抗體對老年人梅毒特異性抗體檢測中的影響?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2017年2月—2019年7月TP-ELISA有反應的老年患者1 043例，其中男612例，女431例；年齡60～79歲，平均年齡(69.48±5.62)歲；體質量指數20.75～28.36，平均體質量指數24.31±2.18。

1.2 入選標準 (1)納入標準：①TP-ELISA有反應；②入組前6個月，未使用免疫增強或抑制藥物者；③無嚴重精神系統疾病者；④患者及其家屬均知情同意。(2)排除標準：①存在病原體感染如艾滋病病毒、丙型肝炎、乙型肝炎等；②存在惡性腫瘤者；③不能配合檢查或中途退出者。

1.3 檢測方法 清晨采集受試者3ml空腹靜脈血，30min靜置，10min離心，3 000r/min，取血清備用，首先用TP-ELISA對所準備的血清標本進行篩查,對TP-ELISA實驗有反應的標本進行ANA、TPPA、類風濕因子(RF)檢測。TP-ELISA檢測：采用上海科華生物工程股份有限公司生產的梅毒特異性抗體檢測試劑盒,操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行, TP-ELISA實驗有反應的判定標準：S/CO>1。ANA檢測：采用歐蒙(杭州)醫學實驗診斷有限公司生產的抗核抗體IgG(接免疫熒光法)檢測試劑盒，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行，試驗結果通過奧林巴斯BX-51熒光顯微鏡觀察，陽性標本判斷標準：滴度≥1∶100出現陽性反應。TPPA檢測：采用日本富士瑞必歐株式會社生產的TPPA試劑盒，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行, 陽性標本判斷標準:稀釋度≥1∶80出現陽性反應。RF試驗：采用德國雅仕通診斷有限兩合公司生產的類風濕抗體檢測試劑盒, 操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行, 陽性標本判斷標準,類風濕抗體IgA、IgG、IgM任意抗體定量>18U/ml。依據各項檢測結果，分為ANA陽性組、RF陽性組、RF、ANA同時陽性組及RF、ANA同時陰性組(對照組)。以TPPA檢測結果作為梅毒特異性抗體診斷的“金標準”。分別記錄TPPA檢測結果，計算TPPA與TP-ELISA不符合率。

1.4 統計學方法 采用SPSS23.0統計學軟件分析數據，以%和n表示計數資料，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

與對照組相比，ANA陽性組、RF陽性組及RF、ANA同時陽性組的TPPA與TP-ELISA不符合率均較高，差異有統計學意義(χ2=24.188、10.432、20.625，P=0.000、0.000、0.000)。見表1。

表1 ANA及RF檢測結果

3 討論

近年來我國梅毒發病率不斷增長，主要由TP感染而誘發疾病，其致病機制無準確定論，但有研究發現，因老年人身體條件特殊，免疫力低下，且伴有高血壓、糖尿病等合并癥，易感染TP，進而損傷器官組織，促使自身免疫原性成分釋放，進而刺激免疫系統，使其出現免疫應答，促使自身抗體形成，加重組織損傷。尤其是老年人隱性梅毒發病率比較突出，梅毒螺旋體感染者作為唯一感染源，感染性強烈，唾液、乳汁、精液、血液等多種途徑均可傳播，但相當一部分梅毒螺旋體感染者無特異性癥狀，其臨床診斷采取合適的實驗室方法尤為重要[6]。

目前，臨床上常用TP-ELISA、TP-SA方法進行檢測，前者適用于大批量檢測，但假陽性較高，后者成本高、時間長，檢測結果并不理想。本研究采用TPPA檢測作為梅毒特異性抗體診斷的“金標準”，其檢測特異性強、敏感度高，但不能實現自動化操作和判讀結果，在大規模篩查中不適用。而TP-ELISA在多數情況下擁有可靠的特異性、敏感度，而且實現了自動化操作和判讀結果臨床上應用尤為廣泛，但在特殊條件下抗干擾能力較弱。研究結果顯示，梅毒特異性抗體TP-ELISA有反應性的1 043例老年人中，對照組TPPA與TP-ELISA不符合率1.10%，ANA陽性組TPPA與TP-ELISA不符合率8.70%，RF陽性組TPPA與TP-ELISA不符合率5.42%，RF、ANA同時陽性組TPPA與TP-ELISA不符合率8.65%，三組結果均與對照組有明顯差異，提示TP-ELISA檢測梅毒特異性抗體在存在抗核抗體和類風濕抗體時會增加其假陽性率，而臨床診斷中如果僅僅使用TP-ELISA+RPR/TRUST診斷在此人群會有較多誤診現象。另外，相關研究還發現，相較于健康人群，老年梅毒感染患者ANA陽性率較高，其原因也可能是老年人身體條件特殊，感染梅毒螺旋體進而損傷器官組織，促使自身免疫原性成分釋放，進而刺激免疫系統，使其出現免疫應答，促使自身抗體形成[7-8]。此外，老年患者因自身伴有免疫系統功能異常，在TP感染后，會導致多種非特異成分增加，包括甲胎蛋白、糖尿病自身抗體、嗜異性抗體、治療性抗體等，更易出現自身免疫反應。而ANA作為一種自身抗體，可作用于細胞核內的蛋白、DNA、RND等成分，識別多種細胞核組分，在自身免疫性溶血性貧血、系統性硬化癥、風濕熱、類風濕性關節炎等多種自身免疫性疾病可特征性的形成。因此，在TPPA對TP-ELISA的結果進行復查的基礎上，可輔助ANA檢測，以提高臨床診斷符合率，幫助患者早期確診治療。

綜其所述，TP-ELISA檢測梅毒特異性抗體在老年人群特別是有自身抗體存在的人群中假陽性率較高，TP-ELISA+RPR/TRUST在此人群中的應用有很大局限性。在TP-ELISA有反應性的老年人標本中應當使用TPPA對TP-ELISA的結果進行復查確認，有條件的最好同時進行ANA檢測，一方面可以提高梅毒感染臨床診斷可靠性，另一方面也可發現梅毒感染患者的自身免疫性疾病情況，協助臨床相關診斷治療。