巴拉圭茶對高脂血癥小鼠氧化還原狀態的影響

◎ 李翔輝，劉瑞霞

（漯河食品職業學院，河南 漯河 462300）

隨著經濟的發展，人們的膳食結構也在發生變化，主要體現在高鹽、高脂、高糖飲食習慣的增加，這對人們的身體健康具有不利影響[1]。已有研究表明，長期高脂膳食會造成機體氧化還原狀態失衡，進而引起各類慢性疾病，危害人們的健康[2]。尋找天然的抗氧化劑具有非常意義，巴拉圭茶（Ilex Paraguariensis）原產于南美，具有多酚、黃酮等活性成分，具有抗氧化、減肥等作用[3-4]。本文擬通過建立高脂血癥小鼠模型，探討巴拉圭茶對高脂血癥小鼠氧化應激的調節作用，為進一步研究巴拉圭茶抗氧化活性提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 設備與材料

UV2600 紫外可見分光光度計（島津公司）、BSA124S 電子分析天平（賽多利斯公司）、CenLee 18K 離心機（湖南湘立科學儀器有限公司）。

巴拉圭茶茶（阿根廷進口）；活性氧自由基（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）及丙二醛（MDA）測定試劑盒，由南京建成生物工程研究所有限公司提供。

高脂飼料配方：78.8%基礎飼料添加1%膽固醇、10%豬油、10%蛋黃粉和0.2%豬膽鹽。

1.2 實驗方法

1.2.1 小鼠高脂模型建立

48 只雄性C57 小鼠，預養一周后，12 只小鼠給予普通飼料，另外36 只小鼠給予高脂飼料，高脂血癥模型造模4 周后，禁食12 h 眼眶靜脈叢采血，測定膽固醇、甘油三酯等血脂指標，以確定模型是否成功。

1.2.2 實驗動物分組

造模成功后，36 只高脂飼料小鼠隨機分為模型組、巴拉圭茶低劑量組、巴拉圭茶高劑量組，每組12 只。對照組繼續進食基礎飼料，其余3 組繼續進食高脂飼料，高脂+巴拉圭茶低劑量組灌胃1 g·kg-1劑量巴拉圭茶，高脂+巴拉圭茶高劑量組灌胃2 g·kg-1劑量巴拉圭茶，灌胃容量為20 mL·kg-1，連續灌胃4 周。

1.2.3 組織樣品采集

小鼠禁食12 h，取肝臟組織，在預冷的生理鹽水中沖洗干凈后，按照比例稱取肝臟組織和生理鹽水（w ∶v=1 ∶9）混合勻漿，低溫離心，取上清液，置于-20 ℃環境中備用。

1.2.4 氧化還原指標測定

嚴格按照試劑盒說明測定肝臟中活性氧自由基（ROS）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）的含量。

1.3 數據處理

使用SPSS 軟件對數據進行處理分析，結果以“平均值±標準差”表示，顯著水平為p ＜0.05，極顯著水平為p ＜0.01。

2 結果與分析

2.1 巴拉圭茶對小鼠肝臟中活性氧自由基水平的影響

脂類代謝過程會有自由基的產生，長期高脂膳食會導致過量的自由基無法及時得到清除，造成機體氧化還原狀態失衡。ROS 是反應機體氧化還原狀態的一個重要指標，如圖1 所示，與對照組相比，高脂日糧可顯著提高小鼠肝臟中ROS 水平（p ＜0.05），與模型組相比，低劑量巴拉圭茶和高劑量巴拉圭茶均可顯著降低小鼠肝臟中ROS 水平（p ＜0.05），巴拉圭茶低劑量組和巴拉圭茶高劑量組小鼠肝臟中ROS 水平差異顯著，說明巴拉圭茶對降低高脂血癥小鼠肝臟中ROS 水平具有一定的作用。

圖1 巴拉圭茶對小鼠肝臟中活性氧自由基水平的影響圖

2.2 巴拉圭茶對小鼠肝臟中丙二醛含量的影響

MDA 的含量可以間接反應組織細胞受自由基攻擊的程度，如圖2 所示，與對照組相比，高脂日糧可顯著提高小鼠肝臟中丙二醛含量（p ＜0.05），與模型組相比，高劑量巴拉圭茶可顯著降低小鼠肝臟中丙二醛含量（p ＜0.05），巴拉圭茶低劑量組可降低小鼠肝臟中丙二醛含量，但差異不顯著，說明高劑量巴拉圭茶對降低小鼠肝臟中丙二醛含量具有一定的作用。

2.3 巴拉圭茶對小鼠肝臟中過氧化氫酶活性的影響

過氧化氫酶是抗氧化體系中一個重要的酶，具有重要作用，如圖3 所示，與對照組相比，高脂日糧可顯著降低小鼠肝臟中過氧化氫酶活性（p＜0.05），與模型組相比，低劑量巴拉圭茶和高劑量巴拉圭茶均可顯著提高小鼠肝臟中過氧化氫酶活性（p＜0.05），巴拉圭茶高劑量組和對照組小鼠肝臟中過氧化氫酶活性差異不顯著，說明巴拉圭茶對提高小鼠肝臟中過氧化氫酶活性具有一定的作用。

圖2 巴拉圭茶對小鼠肝臟中丙二醛含量的影響圖

2.4 巴拉圭茶對小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性的影響

圖3 巴拉圭茶對小鼠肝臟中過氧化氫酶活性的影響圖

超氧化物歧化酶可以協助清除過剩的自由基，對于清除體內ROS 具有關鍵作用，如圖4 所示，與對照組相比，高脂日糧可顯著降低小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性（p＜0.05），與模型組相比，低劑量巴拉圭茶和高劑量巴拉圭茶均可顯著提高小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性（p＜0.05），對照組和巴拉圭茶高劑量組小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性差異不顯著，說明巴拉圭茶對提高小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性具有一定的作用。

圖4 巴拉圭茶對小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性的影響圖

3 結論

隨著社會的發展，有更多的人們開始關注飲食健康，而膳食結構的變化對人們的健康具有重要的影響，因此有關膳食結構與健康的課題非常值得關注。本實驗通過研究巴拉圭茶對高脂血癥小鼠氧化還原狀態的影響，發現巴拉圭茶能夠顯著降低高脂血癥小鼠肝臟中ROS 水平和MDA 含量，提高CAT 和SOD 活性，說明巴拉圭茶對改善高脂血癥小鼠氧化還原狀態具有一定的作用，已有研究表明巴拉圭茶對改善小鼠氧化還原狀態，保持機體健康具有重要意義[4-6]，抗氧化活性往往與機體健康具有密切關系，接下來還需進一步研究巴拉圭茶對機體氧化還原狀態的影響與機體健康之間的關系。